對映體過量值測定的速差電泳法的開發(fā).pdf

1、近年來，毛細(xì)管電泳法成為手性物質(zhì)對映體對映體過量值測定的常用方法之一，在毛細(xì)管電泳方法中，手性拆分劑的選擇極其重要，手性拆分劑必須能確保手性物質(zhì)有足夠大的分離度，從而測定手性物質(zhì)的對映體過量值。然而手性拆分劑的應(yīng)用范圍較窄，盡管市售拆分劑種類不斷增多，但是仍舊滿足不了對映體過量值測定的需要。此外，手性拆分劑的選擇是個(gè)費(fèi)時(shí)費(fèi)力的過程，所以，為了增大手性拆分劑的應(yīng)用范圍并簡化實(shí)驗(yàn)方法，我們設(shè)計(jì)開發(fā)了新型毛細(xì)管電泳速差（Velociy Gap

2、, VG）方法，此設(shè)計(jì)方法是利用三電極電源構(gòu)建出兩個(gè)不同強(qiáng)度的連續(xù)電場，通過改變電場強(qiáng)度將樣品分成兩部分，從而降低手性物質(zhì)中兩異構(gòu)體的比例及樣品的濃度，從而降低樣品的縱向擴(kuò)散進(jìn)而使樣品達(dá)到基線分離，并計(jì)算出相應(yīng)的對映體過量值，并同傳統(tǒng)毛細(xì)管電泳進(jìn)行了比較。
　　本實(shí)驗(yàn)以苯磺酸氨氯地平(R:S=1:100)和鹽酸氧氟沙星(R:S=1:51)為例，證明了此方法的可行性，且測得兩樣品的對映體過量值為(98.13±0.18)％和(96.1

3、9±0.15)%實(shí)驗(yàn)中首先對待測樣品的分離條件進(jìn)行優(yōu)化，從而確定最優(yōu)分離條件，分離條件大致包括手性拆分劑類型及濃度，緩沖溶液離子強(qiáng)度及pH，分離電壓和有機(jī)溶劑類型和濃度。此外，我們通過加入內(nèi)標(biāo)物二苯胍，使所開發(fā)方法的操作更加精準(zhǔn)。為了確定此方法的重現(xiàn)性，我們以另外兩組苯磺酸氨氯地平（R:S=1:35,1:125)為例，平行測定三次，得其對映體過量值分別(94.33±0.16)%，(98.33±0.13)%，且測定結(jié)果的RSD均不大于0.