淇河鯽c型和g型溶菌酶基因克隆及表達(dá)分析.pdf

1、G王NECLONEANDEXPRESSIONANAI，YSIS0FCTYPEA全羽DTTYPELYSOZYMEINQIHECRUCIANCARPCARAsSIUSAURAn7SADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanNormalUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceBy

2、WangMeiju口咒Supervisor：ProfZhangHongxuProfKongXianghuiMay2015肝臟的1886倍和3167倍，但是g型溶菌酶在各組織的表達(dá)量無較大差異。淇河鯽不同組織溶茵酶活性檢測顯示，各組織均有溶菌酶活性，體表粘液中溶菌酶活性最高，且與其它組織呈極顯著性差異(p001)。淇河鯽腹腔注射嗜水氣單胞菌和LPS后，對兩種溶菌酶基因在不同組織的表達(dá)測定發(fā)現(xiàn)，C型和g型溶菌酶在肝臟中表達(dá)量增加明顯，且與對

3、照組呈極顯著性差異釁O01)；在鰓中兩種溶菌酶表達(dá)量呈先升高后降低。脾臟中C型溶菌酶基因表達(dá)量升高，g型溶菌酶無明顯變化。但在腎臟和頭腎中g(shù)型溶菌酶表達(dá)量升高，C型溶菌酶變化甚微。對刺激后不同組織溶菌酶活性進(jìn)行測定，結(jié)果顯示溶菌酶活性與基因表達(dá)變化相似，均呈先上升后下降趨勢。這種受刺激后e型和g型溶菌酶在不同組織中的表達(dá)及酶活性的上調(diào)，說明二者對病原菌或類似物均有mRNA水平上及酶活性的表達(dá)響應(yīng)，在抵御細(xì)菌入侵上可能扮演重要角色。結(jié)論：

4、1克隆出淇河鯽e型和g型溶菌酶eDNA全長：c型溶菌酶eDNA全長679bp，編碼145個氨基酸；g型溶菌酶eDNA全長806bp，編碼187個氨基酸；它們具有酶的典型結(jié)構(gòu)特征。2淇河鯽C型和g型溶菌酶在機(jī)體不同組織具有廣泛的表達(dá)，e型溶菌酶腎臟和頭腎中高表達(dá)，g型溶菌酶表達(dá)量無較大差異；淇河鯽溶菌酶在不同組織中均有活性，在體表粘液中活性最高。3淇河鯽注射嗜水氣單胞菌和LPS后，不同組織e型和g型溶菌酶表達(dá)量及酶活性均上調(diào)，說明二者對病