簡介：鼠抗人CD28分子功能性單克隆抗體的研制及其生物學的特性的鑒定中文摘要鼠抗人CD28分子功能性單克隆抗體的研制及其生物學特性的研究中文摘要機體免疫應答過程的復雜性和嚴格的調控性，是由多種免疫細胞和免疫分子共同參與而完成的。而免疫應答的核心是T淋巴細胞的活化。研究表明，誘導T淋巴細胞活化、增殖及分化為效應細胞需要雙信號刺激第一信號來自抗原由TCR轉導并由粘附分子增強第二信號即協同刺激信號由APCS表面的協同刺激分子和T細胞的相應受體相互作用后產生。協同刺激分子主要分為免疫球蛋白超家族、TNFTNFR超家族及細胞因子超家族三種。B7CD28屬于免疫球蛋白超家族，其提供的第二信號，是迄今為止公認的最基本的協同刺激信號。B7家族分子屬于免疫球蛋白超家族，其成員主要有B71CD80B72CD86B7HLPDLIB7DCPDL2B7H2GL50和B7H3等，主要表達于樹突狀細胞、單核細胞、朗格漢斯細胞、巨噬細胞和B細胞等抗原遞呈細胞APC表面。但近年來的研究證實，部分B7家族分子還表達于關節(jié)炎病人的關節(jié)腔T細胞、系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的外周血T細胞、DC與T細胞共培養(yǎng)一段時間后的丁細胞表面。CD28分子為MR44KD的同源二聚體組成的I型跨膜糖蛋白。1980年首先由HANSEN等用單克隆抗體發(fā)現，隨后將人的CD28分子基因克隆并表達，主要表達于95的CD4’丁細胞和50的CD8T細胞、活化的T細胞、成熟胸腺細胞和部分NK細胞等。與其天然配體CD80CD86分子結合形成的協同刺激信號，在免疫應答的早期發(fā)揮重要作用。其在降低T細胞活化閡值、調節(jié)細胞遷移和THLTH2分化、誘導抗凋亡基因BCLXL表達、增加細胞因子工L2的分泌、促進免疫突觸形成及阻止T細胞失能等方面均具有重要作用。對該信號進行選擇性調控，可促使機體對腫瘤的排斥和腫瘤細胞的殺傷，有助于自身免疫性疾病或超敏反應及異體器官移植排斥的防治。另外，可溶性CD28分子在免疫應答和免疫調節(jié)中發(fā)揮何種作用，在腫瘤、免疫缺陷病、自身免疫性疾病和器官移植等疾病的發(fā)生、發(fā)展、轉歸中又鼠抗人CD28分子功能性單克隆抗體的研制及其生物學的特性的鑒定中文摘要余3株能部分阻斷對照單抗與U266的結合，提示該3株單抗與陽性對照單抗識別不同或不完全相同的抗原位點。將生長良好、高表達CD28分子的人多發(fā)性骨髓瘤細胞株U266和XG1、新鮮分離的外周血單個核細胞PBMCT惡性淋巴瘤細胞株JURKAT和轉基因細胞CD28T分別與抗體反應，通過間接免疫熒光法和流式細胞儀FCM分析，結果顯示，5株單抗均能良好地識別表達在不同細胞上的CD28分子。14單抗對PBTC的激發(fā)效應及活化T細胞的表型分析采用CD28單抗聯合激發(fā)型CD3單抗激發(fā)PBTC通過FICOLL密度梯度法和磁珠陰性選擇去除CD19CD56陽性細胞即B細胞和NK細胞后獲得。鼠抗人CD3單抗05U9ML包被96孔板，LOOP1孔，吸去包被液，PBS洗滌2遍。用含15?S的RPMI1640培養(yǎng)基將PBTC調整細胞濃度為6X105ML，接種于96孔板。3HTDR摻入法的實驗結果顯示，8G8聯合激發(fā)型CD3單抗能明顯促進PBTC的增殖，刺激指數為740直接免疫熒光法和流式細胞儀分析，CD4CD25ICOS和41BB的表達在培養(yǎng)至24H時即明顯上調，72H的陽性表達率可達90左右，表明上述分子均為誘導性表達分子。實驗結果同時顯示，直至培養(yǎng)96H時，活化T細胞CD8陽性細胞的百分率未見明顯改變，提示該株單抗〔8G8促進T細胞向CD4陽性T細胞極化。激發(fā)的T細胞中，CD4CD25T細胞陽性百分率可達60左右，而該亞群T細胞在正常人群體內，僅占外周血CD4T細胞510，且能夠抑制CD8T細胞的活化與增殖。但活化誘導的CD4CD25T細胞與天然CD4CD25T細胞其它表型及在免疫應答中的功能有何不同，尚需進一步探討。2可溶性CD28分子檢測試劑方法的初步建立215株單抗的BIOTIN標記按照上述方法進行單抗的制備和純化，用碳酸鹽緩沖液分別將2D52F53B63F8和8G8濃度調整為200AGML，透析過夜后，加入BNHSDMSO40P1LMGML震蕩4小時后對PBS透析72H，分裝后一20℃保存?zhèn)溆谩?25株單抗識別抗原位點的鑒定分別將5株單抗TUG加1，100111孔包被酶聯檢測板，4℃過夜后，4BSA封閉，PBS洗滌后，加入RHCD28FC標準品500NGML100U1孔，37C孵育1H

簡介：第一部分重慶地區(qū)家雞和家鴨博爾納病病毒自然感染狀況研究目的為了探討重慶地區(qū)家雞和家鴨博爾納病病毒BDV的自然感染狀況，分析重慶地區(qū)家雞和家鴨自然感染的BDVP24核苷酸序列與國外人和動物來源BDV分離株及其標準株STRAINV和HE／80的同源性。方法本研究采用熒光定量巢式逆轉錄酶聚合酶鏈反應FQNRTPCR檢測重慶地區(qū)120例家雞和120例家鴨外周血單個核細胞PBMCS中BDVP24基因片段，并對陽性樣本的熒光定量聚合酶鏈反應FQPCR產物進行基因序列測定，測序結果與國外人與動物來源的BDV分離株及其標準株STRAINV和HE／80進行序列比較。結果家雞PBMCS中BDVP24基因片段陽性率為167％2／120，家鴨PBMCS中BDVP24基因片段陽性率為0％O／120。重慶地區(qū)家雞感染的BDV的P24核苷酸序列與國外患病馬源BDV分離株H1766同源性最高，為9651％，與標準株STRAINV和HE／80同源性均為9535％。結論重慶地區(qū)家雞中存在動物源性BDV自然感染，其感染的BDVP24核苷酸序列與動物來源的BDVH1766株及其標準株STRAINV和HE／80存在高度的同源性。本研究不支持重慶地區(qū)家鴨中存在BDV自然感染。第二部分重慶地區(qū)山羊博爾納病病毒自然感染狀況研究目的探討中國重慶地區(qū)山羊BDV的自然感染狀況，比較分析中國重慶地區(qū)山羊自然感染BDVP24基因序列與國外人和動物來源BDV分離株及其標準株STRAINV和HE／80的同源性。方法采用FQNRTPCR檢測了中國重慶地區(qū)60例山羊PBMCS中和大腦組織左側海馬BDVP24基因片段，對陽性標本FQPCR產物進行基因序列測定，測序結果與國外人與動物來源的BDV分離株以及標準株STRAINV和HE／80進行序列比較。結果山羊外周血組BDVP24基因片段陽性率為83％5／60，腦組織組BDVP24基因片段陽性率為LO％6／60。山羊外周血組陽性率高于腦組織組，但兩組之間差異無顯著性意義PO05。測序分析結果表明，重慶地區(qū)山羊感染的BDVP24的核苷酸序列與國外患病馬源BDV分離株H1766同源性最高，為9651％，與標準株STRAINV和HE／80同源性為9535％。結論重慶地區(qū)山羊中存在動物源性BDV自然感染，該地區(qū)感染的BDVP24核苷酸序列與標準株STRAINV和HE／80存在高度的同源性。外周血組和腦組織組的檢出結果高度吻合，在運用FQNRTPCR檢測山羊的BDV感染時可以用外周血標本代替腦組織標本。第三部分博爾納病病毒感染與精神病發(fā)病的關系研究目的探討重慶地區(qū)精神分裂癥SCHIZOPHRENIA，SCH患者和抑郁癥DEPRESSIVEDISDER，DD患者BDV自然感染狀況及BDV感染與SCH發(fā)病和DD發(fā)病之間的關系。方法采用FQNRTPCR檢測了60例SCH患者、60例DD患者和120例健康人PBMCS中BDVP24基因片段，對陽性標本的FQPCR產物進行克隆和基因序列測定，測序結果同國外人和動物來源的BDV分離株以及其標準株STRAINV和HE／80進行序列比較。結果SCH組BDVP24基因片段陽性率為667％4／60；DD組BDVP24基因片段陽性率為5％3／60；健康組陽性率為O％O／120。SCH組陽性率高于健康組，差異有顯著性意義PO05。DD組陽性率高于健康組，差異有顯著性意義PO05。測序結果顯示SCH患者和DD患者的BDVP24核苷酸序列均與馬源的BDV病毒株H1766親緣關系最近，同源性均為9768％。與國際公認的標準病毒株STRAINV和HE／80比較，同源性均分別為965L％和9535％。結論重慶地區(qū)SCH患者和DD患者中存在BDV自然感染，其來源可能為動物源性，BDV感染與SCH和DD的發(fā)病均可能相關。

簡介：通過檢測COX2及相關指標在人類肺癌組織中的表達及其與臨床病理學參數間的關系COX2在影響肺癌組織細胞凋亡、腫瘤血管形成、侵襲及轉移性等方面的作用及其分子機制擬為臨床病理診斷和針對肺癌的新藥開發(fā)與治療提供一定的理論依據1肺癌中COX2蛋白表達升高且在各組織學類型肺癌中的表達不同腺癌鱗癌大細胞癌小細胞癌未見表達提示COX2參與了人類肺癌的形成并在不同組織學類型肺癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮不同作用不同組織學類型的肺癌的形成機制有所區(qū)別因此它們會具有不同的生物學行為需要制定有針對性的治療方案2肺癌中COX2蛋白在不同肉眼類型組的表達有差異周圍型肺癌中COX2的表達水平高于中央型肺癌組由于中央型肺癌多為鱗癌周圍型肺癌多為腺癌而我們的結果也證實肺腺癌中COX2的表達高于鱗癌兩結果彼此相符因此從肉眼類型角度也反映了不同類型肺癌中COX2的作用不同為不同類型肺癌的臨床診斷和將COX2選擇性抑制劑應用于臨床治療提供理論依據3將Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ、Ⅳ分別合并為新的兩組它們之間COX2的表達有顯著性差異晚期肺癌中COX2的表達升高更明顯說明它在肺癌進展過程中發(fā)揮重要作用4KRAS在肺癌中的表達活性明顯升高與COX2的表達具有顯著正相關關系且在不同組織學類型肺癌中表達水平不同5肺癌中COX2與凋亡抑制因子MCL1的表達呈顯著正相關關系7CD44陽性組中MVD值高于CD44陰性組KRAS陽性組中MVD值高于KRAS陰性組統(tǒng)計學上差異有顯著性且MVD值與KRAS蛋白的表達水平具有正相關關系8腫瘤MVD是一種與分期、分級以及病人預后相關的指標肺癌中COX2陽性組中MVD值高于COX2陰性組且MVD值與COX2的表達水平具有正相關關系9肺癌中COX2與KRAS的表達呈明顯正相關關系10采用北京航空航天大學CMIAS2000型多功能真彩病理圖象分析系統(tǒng)進行體視學分析和MVD檢測獲取定量資料用于分析所得的結果和文獻報道基本一致是病理學定量研究中的一種可行、可信的方法

簡介：在本系列研究的第一部分，首先分析內分泌疾病致低血鉀、血鉀濃度與臨床表現、心電圖變化的相關性，并觀察補鉀治療后血鉀和心電圖恢復情況。本研究入選42例各種內分泌疾患所致低血鉀的患者，觀察臨床表現、血鉀濃度與心電圖變化的關系，其中24例全程跟蹤補鉀治療中及治療后的臨床表現、血清鉀濃度和心電圖變化。42例低血鉀患者臨床表現為乏力以雙下肢為重、心悸、胸悶，嚴重低血鉀者表現為四肢軟癱以及肌肉酸痛。血鉀濃度為260±055MMOL1，心電圖低血鉀改變與血清鉀生化測定符合率為882％。血清鉀25MMOL1時，兩者符合率為100％。1L例原發(fā)性醛固酮增多癥患者入院時血鉀為254±060MMOL1；補鉀治療40小時后血鉀335±044MMOL1，血鉀濃度、臨床表現及心電圖恢復正常時間較長。8例糖尿病酮癥酸中毒或糖尿病合并高血壓患者入院時血鉀258±042MMOL1；補鉀治療40小時后血鉀372±017MMOL1；血清鉀濃度、臨床表現及心電圖恢復正常所需時間也較長。5例甲亢周期性麻痹患者入院時血鉀最低為175±060MMOL1，補鉀治療15小時后血鉀355±053MMOL1；血清鉀濃度臨床表現及心電圖恢復正常需要的時間較原發(fā)性醛固酮增多癥組或糖尿病酮癥酸中毒組短。結論低血鉀的臨床表現除與低鉀血癥的嚴重程度有關外，還與低鉀血癥發(fā)生的急緩有關。心電圖能較好地反映低血鉀的嚴重程度。內分泌疾病所致低血鉀由于病因不同而出現不同程度的臨床表現及心電圖變化，且經補鉀治療后恢復正常所需時間也不同。補鉀需補至血清鉀濃度和心電圖恢復正常為止。在本系列研究的第二部分，我們對低血鉀周期性麻痹的分子機制進行探討。低血鉀周期性麻痹可分為特發(fā)性低鉀周期性麻痹、甲亢伴低鉀麻痹和家族性低鉀周期性麻痹，三類皆有遺傳因素參與，但家族性低血鉀性周期性麻痹HYPOKALEMICPERIODICPARALYSIS，HOKPP，低鉀周麻更加確切，是一種與遺傳有關的離子通道疾病，為常染色體顯性遺傳。目前已證實與家族低鉀周麻發(fā)病相關的突變類型約有十種，涉及三個基因CACNALS、SCN4A和KCNE3，分別編碼人骨骼肌CA通道、NA通道和K通道。不同突變類型所致低鉀周麻的臨床表現各異，而明確低鉀周麻的原因有利臨床治療。我們運用PCR擴增及反應產物直接測序的方法，對一個中國人低鉀周麻家系進行基因篩查，并運用亞克隆方法進行證實。結果發(fā)現在編碼NA通道的基因SCN4A上第2014位核苷酸存在一個新點突變CGTLTGT，為雜合突變，并引起相應編碼氨基酸的改變，由原來的精氨酸ARGINE變?yōu)榘腚装彼酑YSTINE，SCN4AARG672CYS此突變?yōu)镠OKPP一個新的突變類型，并且經亞克隆的方法進一步證實了此雜合突變。這是國內第一次報道的中國人低鉀周麻家系，且證實一新的雜合突變發(fā)生在SCN4A12號外顯子，此點突變只在HOKPP患者中存在。而且，家系中各攜帶有此突變的患者的表現并不相同，提示了R672C突變型可能具有不完全外顯的特性。在本系列研究的第三部分，我們分析LIDDLE綜合征家系臨床資料及進行分子生物學研究，探討其發(fā)病機制。詳細采集先證者及其家庭成員共16人的病史并行各項相關生化檢查，明確LIDDLE綜合征的診斷。采集外周血抽提DNA，運甩PCR直接擴增測序方法，尋找上皮細胞鈉通道Β及Γ亞單位ΒENAC，ΓENAC的編碼基因SCNNLB、SCNNLG可能存在的遺傳學改變。先證者為23歲男性，高血壓史一年余，多次低血鉀發(fā)作，血鉀最低達18MM0110血管腎素活性基礎和激發(fā)值均降低，血醛固酮和尿醛固酮在正常低限。予口服氨苯喋啶每日400RAG，治療一月后血壓下降至13075MMHG，血鉀升至366MMO11。臨床確診為LIDDLE綜合征。先證者二舅有高血壓低血鉀肌麻痹發(fā)作史，曾測血鉀為21MMO1L。先證者三姐有低血鉀肌麻痹發(fā)作史2次，血鉀最低達25MMOL1。編碼ΒENAC基因SCNNLB第13號外顯子的DNA測序結果顯示，先證者Ⅲ8、大姐Ⅲ5、三姐Ⅲ7、母親Ⅱ5和二舅Ⅱ3第616位密碼子存在CCC→CAC錯義突變，引起相應脯氨酸到組氨酸的改變。對100例無關個體進行直接測序未發(fā)現相應變異，證明此為一新突變類型。其他家系成員均未發(fā)現這一基因突變。YENAC基因測序未發(fā)現突變。本家系中發(fā)現的SCNNLB基因第616位密碼子CCCCAC錯義突變?yōu)長IDDLE綜合征又一新致病基因類型。對家系成員進行基因檢測有助于早期篩選突變攜帶者，以便早期干預治療。在本系列研究的第四部分，我們對一少見的CUSHING綜合征類型即異位ACTH分泌綜合征的臨床特征進行分析，而其較為突出的特征既是6例患者皆有嚴重低血鉀癥及堿中毒傾向。總結胸腺類癌一異位ACTH綜合征以低血鉀為首發(fā)臨床癥狀，分析六例病人的臨床表現，尤其是非典型胸腺類癌一異位ACTH綜合征的癥狀和體征、實驗室相關測定值、以及影像學表現。6例患者年齡在2240歲，4男、2女，所有患者均在典型柯興綜合癥表現基礎上，具異位ACTH分泌綜合征特征，皆有面部皮膚色素沉著、低血鉀堿中毒的傾向，平均血鉀為229±002MMOL1、血PH值為744±002；2MG地塞米松和8MG地塞米松抑制試驗均不被抑制；4例患者以浮腫、蛋白尿就診。6例皆行垂體MRI，診為垂體微腺瘤者3例占50％，僅2例腎上腺CT掃描示雙側腎上腺增生，6例皆常規(guī)胸片，3例發(fā)現縱膈增寬，但胸部CT全部顯示“前縱膈占”。6例病人均行胸腺腫瘤切除術并病理證實為胸腺類癌一異位ACTH綜合征。本項臨床觀察說明如果有明確CUSHING綜合征臨床表現，而未發(fā)現垂體瘤或。腎上腺腺瘤，或即便有垂體微腺以及腎上腺增生，但伴有低血鉀、浮腫、蛋白尿且出現不能解釋的大劑量地賽米松抑制試驗結果，均應考慮異位ACTH分泌綜合征，且最可能的原因是胸腺類癌。

簡介：分類號蘭鯊三UDC碩士學位論文密級編號豬星狀病毒分離鑒定和分子流行病學調查及生物學特性研究蘭家暖學科專業(yè)亟隨獸醫(yī)堂指導教師黃焦堅數援一論文答辯日期2Q生旦曼Q旦學位授予日期2Q生魚且答辯委員會主席矍廷苤教攫論文評閱人隆淫搓嬰究員趙武巫究員豬星狀病毒分離鑒定和分子流行病學調查及生物學特性研究摘要星狀病毒ASTROVIRUS，ASTV屬于人獸共患病病原，與多種動物的腹瀉性疾病有關，目前廣泛分布于世界各地。星狀病毒常同冠狀病毒、輪狀病毒、嵌杯狀病毒及其它腸道病毒混合感染造成急性胃腸炎，尤其對小孩及幼畜危害最大。本研究對豬星狀病毒進行分離鑒定和分子流行病學調查及生物學特性研究，將為今后預防豬星狀病毒感染和傳播提供實驗方法和手段。通過對廣西某豬場經RTNPCR檢測呈豬星狀病毒陽性的糞樣進行病毒分離，獲得兩株能在PK15細胞上增殖，并能使該細胞變大、胞漿內出現顆粒，最后細胞破碎、脫落等細胞病變的病毒；在電鏡下觀察，該病毒呈典型的星狀結構，直徑約28一35NM；動物實驗顯示，攻毒豬出現溫和性腹瀉，體重減輕，腸系膜淋巴結腫大和腸絨毛變短等臨床癥狀和在絨毛上皮細胞層及絨毛腔有大量淋巴細胞及少量巨噬細胞浸潤等病理變化。病毒的成功分離，為豬星狀病毒分子生物學以及致病機制的研究提供材料。應用RTNPCR方法，對采自廣西7個市縣27個不同規(guī)?；i場和廣東湛江2個不同規(guī)?；i場共315份豬腹瀉樣品進行檢測，結果顯示豬場陽性率達828％24／29；樣品陽性率達403％127／315；030日齡的小豬感染率最高，達449％53／118；春季24月感染率最高，為543％38／70。調查結果表明，豬群中普遍存在豬星狀病毒感染。另外，L

簡介：廈門大學博士學位論文AXIN復合體調控P53活性的分子機制及其生物學功能姓名林舒勇申請學位級別博士專業(yè)生物化學與分子生物學指導教師林圣彩20090401ABSTRACTABSTRACTCELLSCANUNDERGOCELLCYCLEAFFESTTOREPAIRDAMAGEDDNAORAPOPTOSISTOELIMINATEPERMANENTLYDAMAGEDCELLSTHATCARRYINACCURATEGENETICINFORMATIONFOLLOWINGGENOTOXICSTRESSESTHETWOCELLFATESALEDETERMINEDBYSIGNALINGCASCADESTHATSEEMTOCONVERGEONP53SIGNALINGHOWEVERHOWTHRESHOLDSOFP53ACTIVATIONAREINTRICATELYCONTROLLEDBYORCHESTRATIONOFINCREASINGLYMANYFACTORSREMAINSUNCLEARHEREWESHOWTHATAXIN，ACENTRALREGULATOROFWNTSIGNALING，FORMSDISTINCTCOMPLEXESWITHPIRH2ANDTIP60ASWELLASHIPK2ANDP53ATTHEIRENDOGENOUSLEVELS，DURINGDIFFERENTCELLULARCOMMITMENTSINCELLSTREATEDWITHSUBLETHALDOSESOFUVORDOXORUBICIN，PIRH2ABROGATESAXININDUCEDP53PHOSPHORYLATIONATSER46CATALYZEDBYHIPK2，THROUGHCOMPETINGAGAINSTHIPK2BINDINGTOAXINHOWEVERINRESPONSETOLETHALTREATMENTS，TIP60INTERACTIONWITHAXINISINCREASEDBYATM／ATRKINASESANDPUSHESOFFPITH2，FORMINGAXINTIP60一HIPK2P53COMPLEXTHATALLOWSFORMAXIMALP53ACTIVATIONTOTRIGGERAPOPTOSISP53TRANSACTIVATIONISGREATLYCOMPROMISEDUPONLETHALDOXTREATMENTINTHESKINFIBROBLASTSDERIVEDFROMAXINF。HMICECOINCIDINGWITHAX／NMUTATIONPROMOTESCARCINOGENESISINAXI矗U7MICEANDTHEDOMINANTNEGATIVEROLEOFAXIN盹PROTEINONP53ACTIVATIONTHUS，AXINISACRITICALDETERMINANTFORP53DEPENDENTTUMORSUPPRESSION，INWHICHPIRH2ANDTIP60PLAYSWITCHINGROLESTOTRIGGERCELLCYCLEARRESTORAPOPTOSISUPONDIFFERENTSEVERITYOFGENOTOXICSTRESSKEYWORDSAXIN；P53APOPTOSISDNADAMAGE

簡介：中山大學碩士學位論文人免疫缺陷病毒調升基因AEG1促腫瘤細胞增殖的生物學作用與分子機制研究姓名楊樂申請學位級別碩士專業(yè)微生物學指導教師黎孟楓20090525中I山大學碩士論文人免疫缺陷病毒調升基因AEG1促腫瘤細胞增羅II的生物學作用與分子機制研究腺癌的關鍵。目前的研究表明乳腺癌的發(fā)生受基因與環(huán)境兩大因素的影響，但對其發(fā)病的具體的分子機制卻知之甚少，乳腺癌的預后的判斷仍然依賴于一些常規(guī)的臨床與影像學指標，例如，腫瘤的大小，病理分級，有無淋巴結轉移等。至今為止，已有許多基因被認為足與乳腺癌轉移和或預后有關的標記物，但仍缺乏獨立、有效的乳腺癌診斷指標和與預后相關的分子標記物。因此，闡述乳腺癌發(fā)牛、發(fā)展的分子機制，尋找特異性診斷和治療靶標是目前乳腺癌基礎研究的重點。本文旨在研究AEGL基因對乳腺癌細胞增殖的影響，并探討其在入乳腺癌細胞中的作用機理。首先，本文做免疫組化檢測乳腺癌組織中AEG一1與KI67的臨床相關性。隨后建立了兩株穩(wěn)定外源性高表達AEGL和兩株下調細胞內源性AEG一1表達的乳腺癌細胞系，用于檢測AEG1與乳腺癌細胞增殖的相關性。本文的數據顯示，上調AEG1的表達能夠明顯促進乳腺癌細胞的增殖和其非錨定依賴性牛長的能力，反之下調內源性AEG1的表達則可明顯抑制乳腺癌細胞的生長。因此，AEG1可能足促進乳腺癌細胞異常增生的重要分子。通過對AEG1促增殖機制的研究，本文發(fā)現乳腺癌細胞增殖加快與細胞周期抑制物P27KIPL5陽P21CI01P有關，進而證明了AEG1是通過P13K／AKT信號轉導通路下調FOXOL的表達促進乳腺癌細胞增殖的。本文的發(fā)現首次闡述了AEGL促進乳腺癌細胞增殖的分子機制，提示AEGL基因在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)腱過程中起重要作用，可能成為有價值的腫瘤分子治療的潛在靶點。關鍵詞AEG1乳腺癌增殖

簡介：天津醫(yī)科大學碩士學位論文組織芯片的研制及應用該技術研究肺癌中EPHB4表達的生物學意義和相關分子機制姓名朱叢中申請學位級別碩士專業(yè)病理學與病理生理學指導教師王新允20040501天津匿辯夾攀壤±磅究壘拳鏈論文鬻一幫靜串寞桷娶第一部分組織芯片的研制摘要目的遂行縫絞芯冀聯饞胃牙箍援討及鍘幸擎方法酌磷究，為莰遮、糕范、麓裂、經濟她進行器項科研工作鞴臨床病瑗診斷褳供一耱新酶技術方法。方法螯誶蛾塊包挺秘蛾臃癌彝{0翻歪零虢篷緞揀本。籍這些蠟塊均露5P彈切肆常規(guī)HE染色，鏡下確定贖型的腫瘤及正常組織，并在蠟塊上的相應部位作好標記每個腫瘤瘸例取4個點，正常肺則每例取2個點，按預先設計好的排布順序用我們摸索靜方法餓茂2402012≥纛簿魏綴織芯片螻塊；蔣霓蟮浹饞3墊Ⅸ韜片及隧染色后，轆下觀察結暴；褥EPHB4多克隧抗體對綴織芯片藉芯片上籀應瘸鍘黥常怒切片進行純疫組化染色，對組織芯片上54例肺癌隨機取四個點、三個點、兩個點、一個點，將這幾組結果與普通免疫縫他的結果進行比較，并討‘籜其褥合棗。結果1．組織芯片的制作曩我們瓣方法鍘囂融靜芯片翡塊媾袋翅戴均勻，強弱無開裂邋囊。}L耋爨蠡終采燕組踉芯均勻讒布予裁鍍片上，沒有脫冀一，也無嚼顯移位愛翹曲，完全符合浚察的需要。

簡介：該研究試圖通過體內和體外實驗提高或者降低RESISTIN蛋白的表達觀察此變化是否會導致參與胰島素信號轉導的信號分子表達的變化并通過分析它們之間的關系來了解RESISTIN在促進胰島素抗性方面可能的分子機制為2型糖尿病的發(fā)病機制及臨床治療提供資料為此實驗從以下四個部分進行研究第一部分RETN基因全長CDNA的克隆、表達及高表達小鼠RETN基因細胞系的建立第二部分RETN基因的SIRNA表達載體的構建和小鼠RETN基因被KNOCKDOWN3T3L1細胞系的建立第三部分小鼠RETN基因表達的變化對3T3L1細胞葡萄糖攝取及胰島素信號蛋白表達的影響第四部分膳食誘導的肥胖小鼠體內RETN基因的表達極其對肌肉組織葡萄糖攝取的影響結論基于上述的研究結果我們認為1該論文已完成高表達和低表達小鼠RETN基因的3T3L1細胞系的建立該模型的完成為進一步研究RESISTIN蛋白引發(fā)胰島素抗性的分子生物學機制奠定了基礎2該研究已經證明小鼠RESISTIN蛋白有導致3T3L1脂肪細胞胰島素抵抗的作用這種作用的產生與胰島素信號通路中PI3K和RAS途徑信號蛋白的表達的改變相關3肥胖伴胰島素抵抗小鼠脂肪組織中RETN基因的表達高于正常小鼠的脂肪組織RESISTIN蛋白的表達能夠降低小鼠肌肉組織葡萄糖的攝取提示RESISTIN蛋白的表達在胰島素抗性的形成中發(fā)揮作用

簡介：絕經后骨質疏松癥（POSTMENOPAUSALOSTEOPOSIS，PMO）及骨質疏松性骨折是中老年婦女常見的代謝性骨病之一，其發(fā)病主要是由于雌激素缺乏導致的骨代謝異常。以往主要采用雌激素替代療法（ESTROGENREPLACEMENTTHERAPY，ERT）來防治PMO但ERT可導致陰道不規(guī)則出血、體重增加、乳房痛、子宮內膜增生等副作用，長期應用會增加患乳腺癌和子宮內膜癌的危險性。骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）具有誘導成骨作用在局部應用BMP治療骨不連、骨缺損已取得肯定療效，能否將其應用于骨質疏松癥的治療，尚缺乏系統(tǒng)基礎研究。為了解局部應用外源性BMP對于絕經后骨質疏松癥的影響及其作用機制，我們主要進行了以下研究工作⑴建立骨質疏松山羊模型，于骨質疏松山羊橈骨遠端注射生理鹽水、纖維蛋白膠及纖維蛋白膠復合BMP。⑵通過應用MICROCT檢測松質骨骨密度。通過免疫組化和原位雜交法檢測去勢山羊松質骨中胰島素樣生長因子1（IGFI）、骨保護素（OPG）和腫瘤壞死因子（TNF?。┑谋磉_。主要得出的結果有⑴外源性BMP注射5周后的去勢山羊，MICROCT檢查橈骨遠端松質骨BMD明顯大于NS組和FS組（P005）。⑵外源性BMP注射5周后，FSBMP組去勢山羊松質骨IGFI表達陽性灰度值較NS組和FS組明顯降低（P005），表明局部應用外源性BMP后，去勢山羊橈骨遠端IGFI表達量明顯增加；另一方面，外源性BMP注射5周后，OPG表達陽性灰度值較NS組和FS組明顯降低（P005）；FSBMP組去勢山羊松質骨TNFΑ表達灰度值較NS組和FS組明顯增高（P005），表明骨質疏松山羊橈骨遠端OPG表達量增加，TNFΑ表達量明顯減少。結論⑴局部應用外源性BMP，對維護低雌激素水平情況下局部骨密度具有顯著效果。⑵外源性BMP通過上調IGFI和OPG的表達及下調TNF－Α的表達，促進骨質疏松形成過程中的成骨過程及抑制破骨過程，可能是其防治絕經后骨質疏松癥的機制之一。

簡介：第一部分人類腸道病毒分子生物學分型鑒定方法的建立及應用。人類腸道病毒HEV是小核糖核酸病毒科的一個屬，文獻報道的HEV已有91個型，分為脊髓灰質炎病毒、柯薩奇A組、B組病毒、?？刹《竞托滦湍c道病毒5個組。人類腸道病毒感染大多表現為隱性感染或癥狀輕微，但也可以引起無菌性腦膜炎、弛緩性麻痹、急性心肌炎、手足口病等嚴重疾病。常規(guī)的HEV鑒定多采用病毒分離結合中和試驗等血清學方法，由于HEV血清型繁多，血清學分型鑒定費時費力。本研究的目的在于建立人類腸道病毒分子生物學分型鑒定方法，用于臨床分離腸道病毒的分型鑒定。根據已知各型別人類腸道病毒基因的核苷酸序列和文獻資料，分別合成1對HEV種屬特異性引物“EV1EV2”和5對分型鑒定引物“P1P2”、“P1P3”、“P4P7”、“P5P7”和“P6P7”，提取病毒RNA，采用逆轉錄聚合酶鏈式反應RTPCR擴增病毒CDNA，通過瓊脂糖凝膠電泳和核苷酸序列分析，建立了人類腸道病毒的分子生物學分型鑒定方法。采用該方法鑒定了18株疑似HEV毒株，并與血清中和試驗相互驗證。結果表明，經種屬特異性引物鑒定，其中17株為人類腸道病毒；采用型特異性引物進行分型鑒定，其中4株為科薩奇病毒A24型，3株為科薩奇病毒B3型；科薩奇病毒B2、A9、A15型、?？刹《?、6、7、9、11、14、33型和鼻病毒9型各1株，微量中和試驗結果與分子生物學方法分型結果完全符合。本實驗組合運用了上述6對HEV鑒定和分型引物，對全部引物的PCR擴增體系和擴增條件進行了統(tǒng)一，可以顯著節(jié)約病原學檢出時間，同時可以確定流行株可能發(fā)生的基因變異情況，與傳統(tǒng)的病毒分離和血清學鑒定分型方法相比具有特異性強、敏感性高、快速簡便等優(yōu)點，可以直接鑒定并分型診斷人類腸道病毒感染，適用于人類腸道病毒感染的實驗室診斷和流行病學研究。第二部分乙型肝炎病毒多表位抗原酵母表達質粒的構建。慢性乙型肝炎是一種嚴重的病毒性疾病，雖然近年來抗HBV治療有了很大進展，但由于治療性藥物難以徹底清除乙型肝炎病毒HEPATITISBVIRUSHBV，而且具有停藥易復發(fā)，易引起病毒變異等缺點，所以打破慢性乙肝患者對HBV的免疫耐受，提高特異性免疫功能目前被認為是有望徹底治愈HBV慢性感染的根本措施。本實驗以HBVHBC作為免疫呈現載體，選取畢赤巴斯德酵母PICHIAPASTIS外源基因表達系統(tǒng)表達乙型肝炎病毒不同免疫表位嵌合抗原，以期用于治療慢性乙肝患者，增強乙肝病毒各抗原表位的免疫原性和抗原性，打破耐受、重建免疫應答，激發(fā)慢性乙肝患者體內產生中和抗體和以細胞毒性T細胞CYTOTOXICTLYMPHOCYTECTL應答為主的細胞免疫應答，以達到清除肝細胞內病毒的目的。本實驗選取ADR亞型乙肝病毒DNA作為擴增模板，擴增獲得編碼HBV核心抗原HBVCEANTIGENHBC178AA、HBC79149AA、PRES1抗原1050AA、PRES2抗原110154AA及S抗原101157AA的五個基因片段。通過將HBC178AA和HBC79149AA兩個基因片段酶切連接并插入質粒PPIC35K構建了以HBC為呈現載體的酵母表達質粒PPIC35KHBC。將擴增獲得的PRES1、PRES2和S三個基因片段插入質粒PGEMTHBC2獲得融合基因片段S1C、S2C和SC，之后將融合基因片段插入質粒PPIC35K，構建了酵母表達質粒PPIC35KHBCS1、PPIC35KHBCS2和PPIC35KHBCS。將表達質粒PPIC35KHBCA、PPIC35KHBCS1和PPIC35KHBCS2以SALI核酸內切酶線形化，電穿孔轉化GS115酵母細胞，利用無氨基酸的酵母含氮堿基作為唯一氮源篩選獲得陽性轉化子。通過G418加壓篩選，獲取了可以高效表達融合蛋白的多拷貝整合菌株。對篩選出的多拷貝整合菌株進行甲醇利用表型鑒定，全部菌株均為甲醇利用正常型MUT。對所選菌株提取酵母基因組DNA，以PCR方法鑒定轉化子，確定全部菌株均整合了酵母表達質粒。本研究構建了PPIC35KHBCA、PPIC35KHBCS1和PPIC35KHBCS2三個酵母表達質粒，并將其以高拷貝整合于PICHIAPASTIS酵母表達系統(tǒng)，為下一步的誘導表達及融合蛋白的免疫原性研究奠定了基礎。

簡介：點擊查看更多一種新的抗病毒分子HIRRP的相互作用蛋白篩選、驗證及生物學功能分析.pdf精彩內容。

簡介：分類號密級國際十進分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學學位論文外源性脆性三聯組氨酸蛋白FHIT對結腸癌和肝癌細胞增殖和凋亡生物學功能的影響及分子機制研究（題名和副題名）余桂戎（作者姓名）指導教師姓名楊安鋼教授指導教師單位第四軍醫(yī)大學基礎部生物化學與分子生物學教研室申請學位級別碩士專業(yè)名稱生物化學與分子生物學論文提交日期201004答辯日期201005論文起止時間2007年9月至2010年5月學位授予單位第四軍醫(yī)大學外源性脆性三聯組氨酸蛋白外源性脆性三聯組氨酸蛋白FHIT對結腸癌和肝癌細胞增殖和凋亡生物學功能的影響及分子機制研究對結腸癌和肝癌細胞增殖和凋亡生物學功能的影響及分子機制研究研究生余桂戎生余桂戎學科專業(yè)生物化學與分子生物學學科專業(yè)生物化學與分子生物學所在單位第四軍醫(yī)大學生物化學與分子生物學所在單位第四軍醫(yī)大學生物化學與分子生物學教研室教研室導師楊安鋼師楊安鋼教授教授輔導教師張輔導教師張瑞講師講師基金資助項目國家自然科學基金資助項目（30873006，30901771）；關鍵詞FHIT；重組腺病毒；TAT轉位肽；融合蛋白；結腸癌；肝癌；蛋白純化中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學2010年05月

簡介：近幾年來，主要組織相容性復合體I類相關鏈AMAJHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEXCLASSIRELATEDCHAINA，MICA抗體與實體器官移植特別是腎移植的排斥反應和移植腎長期存活率之間的關系成了移植免疫學基礎和臨床研究的熱點。在等待腎移植的患者體內檢測到了預存的MICA抗體，說明在移植前患者就接觸到了MICA抗原而產生了特異性的抗體；移植后MICA抗體與免疫排斥反應和慢性移植腎失功之間均存在著密切的關系。由于MICA蛋白可以表達在血管內皮細胞表面，但不表達在T淋巴細胞，因而MICA分子可能直接引起移植腎血管的損傷，進而導致移植腎功能損害。有學者研究了MICA抗原對淋巴細胞生物學特性的影響，發(fā)現MICA抗原對T細胞和B細胞有促進其增殖的作用。最近對心臟移植的研究中發(fā)現，血清中的可溶性MICASMICA分子可以減輕移植物的免疫損傷，對移植物起到保護作用。MICA分子和NKG2D是互為配受體的關系，且NKG2D是NK細胞表面的一種激活性受體。但是MICA抗原對內皮細胞的生物學特性的影響，SMICA在腎移植中的是否有保護作用，以及NK細胞能否被激活而對內皮細胞產生殺傷作用，均未見報道。因此，本課題將分三個部分進行研究1應用MICA重組蛋白對血管內皮細胞進行刺激，觀察它對內皮細胞的生物學特性及其分泌功能的影響2外源性抗原對內皮細胞MICA基因表達的調節(jié)作用，以及對細胞上清中SMICA的水平的影響；3表達MICA分子的內皮細胞與NK細胞共同培養(yǎng)，觀察NK細胞對內皮細胞的殺傷作用，并探討其可能的作用機制。第一部分MICA抗原對內皮細胞生物學功能的影響目的觀察主要組織相容性復合體I類相關鏈AMICA抗原對血管內皮細胞生物學功能的影響。方法將外源性重組MICA蛋白分A55NGML，A1010NGML，A2525NGML三個劑量加入培養(yǎng)基中作為實驗組，A0組加入等體積的磷酸鹽緩沖液PBS作為對照組，對人臍靜脈內皮細胞HUVEC予以培養(yǎng)。用流式細胞儀檢測其細胞周期和凋亡情況，采用噻唑藍MTT比色法檢測細胞增殖情況，并測定各組細胞上清液中前列環(huán)素代謝產物6酮前列腺素F1Α6KETOPGFLΑ、內皮素ET1、組織型纖溶酶原激活物TPA及其抑制物PAI的水平。結果各實驗組A5，A10，A25內皮細胞A570值均高于對照組A0。以A5組增殖最為明顯，A10組比A5組稍下降，兩組之間差異統(tǒng)計學意義（P005），但明顯高于A25組差異有統(tǒng)計學意義P005）。各實驗組A5，A10，A25TPA、PAI分別為1612，1542，1578NGML2216，2485，2524NGML而對照組（A0分別為2335NGML、1378NGML。實驗組和對照組之間比較，差異均有統(tǒng)計學意義P005）。各實驗組細胞無明顯凋亡，細胞周期也無明顯改變。結論MICA抗原對內皮細胞的生長周期無明顯影響，也不引起其凋亡，但能刺激內皮細胞增殖，以小劑量誘導增殖明顯，并呈持續(xù)緩慢增殖。同時能夠引起內皮細胞功能受損，凝血功能增強，而纖溶功能下降，有助于血栓形成。第二部分外源性抗原對內皮細胞MICA基因表達的影響目的探討外源性抗原對內皮細胞MICA基因表達的影響。方法將MICA重組蛋白分A55NGML，A1010NGML，A2525NGML和熱休克蛋白HSP70分B55NGML，B1010NGML，B2S25NGML各三個劑量的實驗組，對內皮細胞HUVEC予以誘導培養(yǎng)，對照組A0、B0組分別加等量的磷酸鹽緩沖液PBS。采用實時熒光定量PCR方法檢測內皮細胞MICAMRNA表達、WESTERNBLOT法檢測MICA蛋白和流式細胞儀檢測MICA蛋白在細胞膜表面的表達，用ELISA法測定細胞上清液中可溶性MICASMICA的水平。結果用三個劑量MICA重組蛋白誘導48H后，各實驗組A5，A10，A25內皮細胞MICAMRNA和MICA蛋白的表達量與對照組比較均有顯著增加，差異均有統(tǒng)計學意義（P005）。MICA膜蛋白表達以A10組326％最高，并與A5組282％、A25組234％之間有顯著性差異P005）。而HSP蛋白組內皮細胞MICA基因的表達和SMICA水平無明顯改變。結論外源性MICA抗原能夠誘導內皮細胞自身MICAMRNA、總蛋白和膜蛋白表達上調，尤其是細胞膜蛋白增加明顯，但SMICA水平顯著下降，而HSP蛋白組無顯著變化。第三部分MICA分子介導NK細胞對內皮細胞的殺傷作用目的觀察MICA分子在NK細胞殺傷內皮細胞過程中的作用，探討其可能的機制。方法使用免疫磁珠方法及CD56陽性分選試劑盒分選NK細胞，并將NK細胞與表達MICA膜蛋白的活化內皮細胞，共同培養(yǎng)10H。NK細胞與A0組HUVEC（同第二部分）共培養(yǎng)為A組，與A10組為B組。用熒光素進行染色，在熒光顯微鏡下觀察死亡和存活細胞數量，計算NK細胞對內皮細胞殺傷效率，用ELISA法測定細胞上清中的干擾素ΓIFNΓ）和穿孔素水平。結果免疫磁珠法可以分選NK細胞，純度為885％。NK細胞對B組內皮細胞的殺傷效率為355％，明顯高于A組L26％；B組IFNΓ和穿孔素水平顯著高于A組，兩組差異均有統(tǒng)計學意義P結論經過外源性MICA重組蛋白刺激的內皮細胞表面MICA分子表達增高，能夠提高NK細胞對內皮細胞的殺傷效率；IFNΓ和穿孔素可能是發(fā)揮細胞毒作用的活性物質。

簡介：孢子絲菌病是流行于熱帶及亞熱帶地區(qū)由申克孢子絲菌引起的皮膚、皮下組織及其附近淋巴系統(tǒng)的亞急性和慢性感染可累及臟器具有一定致殘、致死率。根據美國傳染病協會2007版申克孢子絲菌病臨床治療指南推薦伊曲康唑為非系統(tǒng)性孢子絲菌病的首選單獨治療藥物。我們在臨床上發(fā)現3例對伊曲康唑治療不敏感的皮膚型孢子絲菌病患者從中首次分離出4株申克孢子絲菌臨床耐藥株但申克孢子絲菌的耐藥研究還是空白。本研究通過對這4株耐藥株進行形態(tài)學、雙相型轉化試驗、掃描電鏡、ITS序列、體外單藥藥敏和聯合藥敏試驗研究同時采用RAPD技術進行臨床耐藥株和敏感株的基因型差異分析探討申克孢子絲菌耐藥株和敏感株在表型、基因型和藥物敏感性等方面的差異；同時獲取了其編碼細胞色素P450羊毛固醇14Α脫甲基酶的耐唑類抗真菌藥物相關基因的表達序列片段為分子耐藥機制研究打下基礎。目的1明確耐伊曲康唑申克孢子絲菌臨床株的形態(tài)學表型、基因型和體外藥敏的特性2探討申克孢子絲菌臨床耐藥株和敏感株的基因型差異獲取其耐唑類抗真菌藥物相關基因的表達序列片段為分子耐藥機制研究打下基礎。方法1通過真菌鏡檢、培養(yǎng)、小培養(yǎng)、雙相轉化試驗和掃描電鏡技術對所分離臨床耐藥株進行形態(tài)學鑒定；2采用真菌通用引物ITS4、ITS5進行PCR擴增申克孢子絲菌臨床耐藥株的RDNAITS區(qū)序列產物經純化、測序后進行分子生物學鑒定；3應用M38A方案和改良M27A2藥敏試驗方案對申克孢子絲菌臨床耐藥株進行菌絲相和酵母相的體外藥敏試驗?；罨攴謩e制備菌絲相和酵母相菌懸液菌絲相濃度調整至5104CFUML2倍終濃度酵母相調整至25103CFUML2倍終濃度；采用微量液基稀釋法加樣制板后菌絲相置26℃酵母相置35℃孵育第5D觀察結果。結果判斷標準為各藥的MIC終點為100％生長抑制聯合用藥效果評價采用分數抑菌濃度指數評價；4采用OPBG14和OPBG19兩條引物進行RAPDPCR擴增4株臨床耐藥株及46株臨床非耐藥株及1株標準株。對擴增的RAPD帶型進行分析采用BIONUMERICSV461軟件統(tǒng)計出各菌株的歐式遺傳距離并按照WARDSALGITHMWITHJACCADSCOEFFICIENT法進行聚類分析繪出親緣關系樹狀圖。5提取申克孢子絲菌總RNA逆轉錄后采用針對耐唑類抗真菌藥物相關基因編碼細胞色素P450羊毛固醇14Α脫甲基酶基因片段的引物進行PCR擴增。結果14株耐伊曲康唑申克孢子絲菌臨床株經真菌培養(yǎng)、小培養(yǎng)、雙相轉化試驗和掃描電鏡技術鑒定符合申克孢子絲菌的真菌學特征；2臨床耐藥株均能擴增出400～600BP左右的RDNAITS區(qū)域片段所有片段的測序結果經序列比對與申克孢子絲菌的模式菌株具有99％～100％同源性；3臨床耐藥株在酵母相的伊曲康唑單藥藥敏結果顯示較高的MIC值均達到2ΜGML。臨床耐藥株與敏感株兩組在酵母相的伊曲康唑單藥藥敏MIC值比較有統(tǒng)計學差異P002而菌絲相則無差異P0119005；兩組的特比萘芬單藥藥敏結果無論酵母相和菌絲相均無差異；4聯合藥敏MIC值均明顯低于單藥藥敏MIC值。兩藥聯合藥敏結果顯示在菌絲相耐藥株和非耐藥株均無相關作用在酵母相中有2株菌的FICI結果顯示聯合用藥具有協同作用其余則表現為無相關作用和拮抗作用。其中臨床耐藥株SUMS0382在酵母相的伊曲康唑和特比萘芬聯合藥敏FICI為0375顯示了兩種藥物的協同作用并與臨床療效一致。5采用BIONUMERICSV461軟件應用JACCARD和DICE方法對OPBG14和OPBG19引物擴增的所有申克孢子絲菌菌株的RAPD帶型進行聚類分析結果顯示國內不同地區(qū)來源的申克孢子絲菌基因帶型呈現多樣性臨床耐藥株與敏感株在RAPD帶型及分組上未發(fā)現明顯聚類現象；不同臨床類型及不同部位分離的申克孢子絲菌其帶型及分組無明顯的聚類現象；6通過PCR方法采用所設計的引物擴增獲得與耐唑類藥物基因相關的申克孢子絲菌編碼細胞色素P450羊毛固醇14Α脫甲基酶的基因序列片段與白念珠菌ERG11基因的序列片段比對結果顯示具有高度一致的同源性。結論1從伊曲康唑治療失敗的孢子絲菌病患者皮損中分離的4株臨床耐藥株經真菌形態(tài)學特征、轉化實驗、電鏡和RDNAITS序列分析鑒定為申克孢子絲菌；2采用M38A方案和改良M27A2藥敏試驗方案進行的申克孢子絲菌菌絲相和酵母相體外單藥藥敏和聯合藥敏試驗中臨床耐藥株在致病相酵母相對伊曲康唑高MIC結果證明其耐藥性；3申克孢子絲菌耐藥株的伊曲康唑和特比萘芬體外藥敏試驗的聯合藥敏結果顯示具有協同作用且與相對應的臨床療效一致體外聯合藥敏試驗結果對指導聯合治療具有一定臨床意義；4國內不同地區(qū)來源的申克孢子絲菌基因的RAPD帶型呈現多樣性未發(fā)現地區(qū)集中現象同時臨床耐藥株與非耐藥株在帶型及分組上未發(fā)現明顯聚類現象；不同臨床類型及不同部位分離的申克孢子絲菌在其帶型及分組不存在明顯聚類；5通過所得的申克孢子絲菌編碼細胞色素P450羊毛固醇14Α去甲基化酶的基因序列片段可進一步獲得該基因的全長序列為該相關基因的耐藥機制研究提供基礎。