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    • 簡(jiǎn)介:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩L學(xué)位論文小麥特殊材料R149的細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)研究王翔指導(dǎo)教師廷止瞳越擐學(xué)科專業(yè)J目墅剛勤野生_一研兜方向鹽王細(xì)胞生塑生2005年5月ABSTRACTSTUDYONTHESPECIALWHEATMATIERIALR149BASEDONCYTOBIOLOGYANDMOLECULARBIOLOGYWANGXIANGPLANTGENETICSANDBREEDINGDIRECTEDBYPROF.RENZHENGLONGADVANCEDWHEATCULTIVARR149WHOSEPARENTSARECOPMONWHEAT伢ITICUMAESTLVUMANDRYESECALECEREALSISBREDBYNEWCHROMOSOMEENGINEERINGWAYS“THEUSEOFMONOSOMICRYEADDITION1INESFORTRANSFERRINGRYECHROMATININTOWHEAT”.USINGTHECBANDINGTECHNIQUE,GENOMEINSITUHYBRIDIZATION,ANDPROTEINSEPERATIONTECHNIQUEANDPCRSTUDIEDR149CULTIVARSYSTEMATICALLY.INORDERTOVERIFYTHETHEORY“INDUCTIONOFSMALL一SEGMENTTRANSLOCATION”.THESTUDIESSUBSTANTI8TEDFEASIBILITYOFTHETHEORY.1.THESTUDYRESULTSSUGGESTEDTHATTHEMONOSOMICADDEDRYECHROMOSOMESINWHEATCOULDINDUCETRANSLOCATIONBETWEENWHEATANDRYECHROMOSOMESEFFECTIVELYANDTHATTHEADDEDMONOSOMICCOULDINDUCESMAL1SEGMENTTRANSLOCATIONSSTRANSLOCATIONWITHHIGHFREQUENCY.THETHEORY“INDUCTIONOFSSTRANSLOCATION”ISSIGNIFICANTINPLANTBREEDINGCOMPAREWITHOTHERWAYSOFINDUCTIONOFTRANSLOCATION.2.THERESULTSOFTRADITIONALCYTOLOGYTECHNIQUESSHOWEDTHATR149HASANORMALCYTOLOGYBEHAVIORANDSTABLEGENETICSYSTEM.WHEREAS,THEPLANTSEXHIBITEDPHENOTYPICALTERATIONCOMPAREDWITHITSWHEATPARENT.3.THERESULTSOFTHEGISHINDICATEDTHATTHECONTROLMATERIALSSHOWEDALIENCHROMOSOMECLEARLYANDR149HADARELATIVEREGULARHYBRIDIZATIONSITEALONGTHESPECIALCHROMOSOMES.THEREFORE,WECOULDCONCLUDETHATITISPOSSIBLETHATR149HADSOMESEGMENTSOFTHERYECHROMOSOME.4.USINGTHEPRIMERSOFSPECIFICREPEATEDSEQUENCEFROMS.CEREALEAMPLIFIEDTHER149,THERESULTSSHOWEDTHATPSCLT9.1、PSCH20COULDAMPLIFIEDTHEPRODUCTSCORRECTLY.5.BASEDONSDSPAGEANALYSIS,R149SHOWEDNORYESPECIALGLUTENINPROTEIN.Ⅱ
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    • 簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文草莓果實(shí)磷脂酶D生理生化及分子生物學(xué)特性研究姓名袁海英申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)果樹學(xué)指導(dǎo)教師陳力耕20050501分類號(hào)UDC密級(jí)單位代碼編號(hào)研究生學(xué)號(hào)草莓果實(shí)磷脂酶D生理生化及分子生物學(xué)特性研究論文答辯日期圣QQ量生魚目壘旦答辯委員會(huì)主席銎旦苤?jǐn)?shù)攮墮昱蜇塹盤堂盔生瞳薟堂丕答辯委員會(huì)成員苤盈至數(shù)握擅昱逝塹太堂壅生院藍(lán)苤壓進(jìn)墮鯉窺雖逝塹省壅科院園苧壓塍五塞麴援墟昱逝江態(tài)堂盛生瞳墨撾逝睦左塹麴攫擅昱浙江塞堂壅生瞳墨撾壓論文評(píng)閱人撻題拯數(shù)援擅昱垡直壅業(yè)盍堂園苧堂院奎道壺塾援蠖昱酉直壅、業(yè)太堂圄苧丕重焦熬援盟昱直立盤些盤堂國(guó)苧堂瞳彭扛顯熬援熊昱坐主盤塞園苧撻堂堂院萱窒撾麴攫擅昱逝江太堂壅生隧園苧丕
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      上傳時(shí)間:2024-03-03
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    • 簡(jiǎn)介:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文象耳豆根結(jié)線蟲生物學(xué)和分子生物學(xué)特征的研究姓名劉昊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)植物病理學(xué)指導(dǎo)教師徐建華20050601關(guān)鍵詞象耳豆根結(jié)線蟲;寄主范圍;MTDNA;RDNAITS;RDNAIGS2;序列比較PCR檢測(cè)法
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      上傳時(shí)間:2024-03-03
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    • 簡(jiǎn)介:中山大學(xué)博士學(xué)位論文R768138水稻第6染色體S5區(qū)基因克隆及分子生物學(xué)研究專業(yè)遺傳學(xué)博士生仲健導(dǎo)師王金發(fā)教授主席力膨≥委員釤7彩犯≠掀式釤澎吾五1皴力廣州中山大掌生命科掌掌院二00五年五月十八日仲健中山大學(xué)博士學(xué)位論文水稻第6染色體SS區(qū)基因克隆及分子生物學(xué)研究過(guò)RTPCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)這些轉(zhuǎn)基因株的OS6AP1基因的轉(zhuǎn)錄本在體內(nèi)的水平大大降低。RTPCR分析表明以硎尸』基因在野生型植株的多個(gè)組織中表達(dá),但在花粉中未能檢測(cè)到其表達(dá)。這些結(jié)果表明OS6AP1基因的功能是調(diào)節(jié)水稻根系的發(fā)育,并影響株高和開花期。OSDUFL296基因由10個(gè)內(nèi)含子與11個(gè)外顯子組成,推算的編碼蛋白由854個(gè)氨基酸殘基組成,并預(yù)測(cè)在蛋白質(zhì)N一端含有一長(zhǎng)約60個(gè)氨基酸的名為DUFL296的保守結(jié)構(gòu)域,RTPCR分析表明該基因在所有檢測(cè)的組織中都有表達(dá),包括花、葉、莖、根、幼穗等,而且表達(dá)量較為均勻。通過(guò)RNA沉默,發(fā)現(xiàn)經(jīng)RNA沉默的轉(zhuǎn)基因水稻表現(xiàn)出較慢的生長(zhǎng)速率,目前轉(zhuǎn)化小苗表型變化仍在進(jìn)一步觀察中。OSDSP基因序列分析表明OSDSPL基因克隆全長(zhǎng)1119BP,推測(cè)的OSDSPL基因產(chǎn)物由225個(gè)氨基酸組成。EDNA序列與基因組序列分析表明該基因由5個(gè)外顯子及4個(gè)內(nèi)含子構(gòu)成,多個(gè)在線分析工具表明該蛋白質(zhì)屬于雙特異蛋白磷酸酶家族。我們將該基因序列提交NCBI數(shù)據(jù)庫(kù),得到接受并獲得序列號(hào)AY669072。關(guān)鍵詞水稻ORYZASATIVAL;廣親和品種WCVRNA沉默;OSGAP1GPI一錨定蛋白;LYSM結(jié)構(gòu)域;OSDSP;OSDUFL296
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      上傳時(shí)間:2024-03-02
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    • 簡(jiǎn)介:委糾犬學(xué)碩士學(xué)位論文2005屆家蠶成品卵微粒子病分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)的研究STUDYONTHEMETHODOFMOLECULARBIOLOGICALDETECTIONOFPEBLINCOFBOMBYXMORIEGGS研究生姓名指導(dǎo)教ⅡⅡ姓名專業(yè)名稱研究方向論史提交H期潘中華責(zé)成良教授特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)家蠶病理學(xué)廈病毒分子生物學(xué)2005年5月蘭塑堂竺坐竺些型墮嬰型竺皇塑型塑塑墮£竺垡皇竺皇堅(jiān)竺竺璺璺苧一竺坐型一STUDYONTHEMETHODOFMOLECULARBIOLOGICALDETECTIONOFPEBRINEOFBOMBYXMORIEGGSABSTRACTTHESTUDYFOCUSEDONSEQUENCEFEATURE,MOLECULAREVOLUTIONOF16SRRNAGENEOFNOSEMABOMBYCTS,ANDTHEREFORETHEPCRMETHODTODETECTPEBRINEOFBOMBYXMORLEGGSWASCREATEDTHE16SRRNAGENEWASCLONEDTHROUGHPERWITHNOSEMABOMBYCTSDNATEMPLATEANDASPECIALPAIROFPRIMERSFOR16SRPDQAGENEOFNOSEMABOMBYCTSSEQUENCEANALYSFSSHOWSTHATTHENUCLEOTLDECONSISTSOF1235BPLACKINGOFSEVERALREGIONSWHICHA∞CONSIDERED∞EUKARYOTICSEQUENCES。ANDITSSEQUENCESTRUCTUREFEATUREISMORESIMILARTOTHATOFPROKARYOTICITWASPRESUMEDTHATINVERYEARLYSTAGENOSEMABOMBYCIADIVERGEDFROMPROKARYOTESMOLECULAREVOLUTIONANALYSISSHOWSTHATMLCROSPORESBELONGSTOTHESAMEGENUSMAYLOCATEDIFFERENTBRANCHESONPHYLOGENTICTREETHERESULTSOFDNAEXTRACTIONSFROMPUREMLCROSPORESOFNOSEMABOMBYETSDEMONSTRATETHAT13XLO~PGDNACALLHEEXTRACTEDFROMONEMTCROSPORE。AND325XI釅PGDNA,SCILICET4MLCROSPURES,M25PLPCRSYSTEMISTHETHRESHOLDFORSUCCESSFULDETECTIONOFPCRTHERESULTSOFDNAEXTRACTIONFROMSILKWORMEGGSWITHPEBNNESHOWTHATTOTALDNANORMALLYEXTRACTEDFROMSILKWORMEGGSWLTHPEBNNECANHEUSEDTODETECTPEBNNEAMONGSDKWORMEGGSWHENINCUBATIONEGGSWEREPREPAREDWITH30%KOHPRACTICALEXAMINATIONRESEARCHILLUSTRATESTHATPCRCARLSENSITIVELYDETECTIⅪBRMEFROMONESILKWORMEGGANDTHEMOSTSENSITIVEFORPEBNNEDETECTMNISONEPEBRMEEGGMIXEDWITH300NORMALEGGSTHEPROBABILITYOFIDENTIFYINGONEPEBRMEEGGAMONG100NORMALEGGSISABOUT80%THEMANIPULATEREGULATIONANDEVALUATIONSTANDARDOFPCREXAMINATIONFORTHEPEBRLNERATIOAMONGSILKWORMEGGSWERECREATEDBASEDONALLOFTHEEXPERIMENTALDATAKEYWORDSSILKWORMBOMBYXMOLLNOSEMABOMBYCLS,THEPRODUCTEGG,RATEOFDISEASEEGG,16SRRNA,PCRDETECTIONUWRITTENBYPANZHONGHUASUPERVISEDBYGONGCHENGHANGAJ~,,、J一;;~。,孓,,L
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      上傳時(shí)間:2024-03-03
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    • 簡(jiǎn)介:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文斑痣盤菌目莖生種的分類及針葉樹生散斑殼屬分子生物學(xué)研究姓名韓加軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師林英任20080601ABSTRACTRHYTISMATALSISANIMPORTANTPARTINFUNGIRESOURCESOFTHEWORLDSYSTEMATICSOFCAULINESPECIESOFRHYTISMATALSWASSTUDIEDFROMMORPHOLOGYDEVELOPMENTBIOLOGYECOLOGYDISTRIBUTIONETCTWENTYTWOLOPHODERMIUMSTRAINSONCONIFIERSWERECHARATERIZEDBYISSRPCRREACTIONWITH10RANDOMPRIMERSWHOSEGELELECTROERSISDIAGRAMSCANBEAMPLIFIEDREPEATEDLYANDCLEARLYBYTHECOMPARISONOFISSRANALYTICRESULTSANDTHEPHENOTYPICCHARACTERS,INDICATEDRELATIONSHIPSOFSOMEINTRASPECIFICANDINTERSPECIFICSTRAINSOFLOPHODERMUIMONCONIFIERSWEREAFFIRMEDTHEMAINRESULTISASFOLLOWS1SPECIMENSFROMTHESOUTHANDWESTMOUNTAINSOFANHUIPROVINCEANDANHUIAGRICULTURALUNIVERSITYFORESTPROTECTIONAUUFPWEREIDENTIFIEDACCORDINGTOTHETAXONOICPRINCIPLESOFDARKER1967,CANNONMINTER1986ANDKIRKETA120018SPECIESOFRHYTISMATALESWERESTUDIED,INCLUDINGARUGOSAOFASCODICHAENA,厶PUERARIAESPNOV,厶CAULINUMSPNOV,LCAMELLIICOLAAND厶CEPHALOTAXIOFLOPHODERMIUM,CLEPTIDEUSANDCTAIWANENSISOFCOCCOMYCESHSTEPHANANDRAEOFHYPODERMAARUGOSAISANEWRECORDSPECIESINCHINA,LPUERARIAESPNOVANDLCAULINUMSPNOVARENEWSPECIESAMONGTHEMDICHOTOMOUSKEYTOTHESESPECIESWERECOMPLIEDMORPHOLOGICALCHARACTERISTICSWEREDESCRIBEDANDILLUSTEATED,ANDHABITS,HOSTSANDDISTRIBUTIONSWRERECORDEDFORTHESPECIES2TEMPLATEDNAOF22LOPHODERMIUMSTRAINSANDONCONIFERSWEREEXTRACTEDBYBENZYLCHLORIDETHEISSRPCRAMPLIFIEDSYSTEMWASOPTIMIZEDFROMASPECTSOFTHECONCENTRATIONSOFDNATEMPLATES,PRIMERS,MG擴(kuò),DNTPSANDTAQDNAPOLYMERASE,ANDANNEALINGTEMPERATURETHERESULTSSHOWEDTHATTHEOPTIMALISSRPCRSYSTEMWERESUITABLEFORLOPHODERMIUMASFOLLOWSTEMPLATEDNA45NG’PL叫21AL,PRIMER10UMOLL。O6PL,M9225MMOLLT15PL,DNTPS10RAMOLLO3,TAQDNAPOLYMERASE5UPL。1O31AL,LOXBUFFER151AL,DDH2088TXLIN151XLREACTIONSYSTEM22LOPHODERMIUMSTRAINSONCONIFIERSWEREAMPLIFIEDUSINGINTERSIMPLESEQUENCEREPERTISSRMARKERSWHICHAMPLIFIED167SITESINCLUDING160POLYMORPHICSITES,ACCOUNTINGFOR958%ITSGENETICDISTANCECLUSTERFIGUREWASCONSTRACTEDUSINGUPGMAMETHODFROMTHECLUSTERINGFIGUREWECANFINDTHATTHEDISTANCEOFGENETICRANGEDFROM593TO74122STRAINSOFLOPHODERMIUMONEONIFIERSWERECLASSIFIEDTO5GROUPSBYTHECOMPARISONOFISSRANALYTICRESULTSANDTHEPHENOTYPICCHARACTERTHESTRAINSOFINTRASPECIESANDSIMILARINTERSPECIESCANCLUSTERVERYWELL,ANDTHESTRAINSOFDIFFERENTSPECIESALSOCANDISTINCTQUITEWELLFROMTHERESULTSWECANCONCLUDETHATISSRTECHNIQUEHASGOODAPPLICABILITYINTHE
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      上傳時(shí)間:2024-03-03
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    • 簡(jiǎn)介:分類號(hào)S667;Q785;Q812密級(jí)Y775044單位代碼10389學(xué)號(hào)1021620福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文龍眼體胚發(fā)生過(guò)程中APX的生理學(xué)與分子生物學(xué)研究學(xué)科專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方囪檀物生能與分子生將學(xué)研究生李惠華指導(dǎo)教師賴鐘雄研究員完成時(shí)閩二OO五年四月汞經(jīng)伴鲞、導(dǎo)篩同意爨壘又公瘩早期的正常發(fā)育過(guò)程中有APX的主動(dòng)表達(dá),在一些生物和非生物的脅迫條件下可以不同程度地誘導(dǎo)APX的淡達(dá).此時(shí)APX的表達(dá)處于~個(gè)撥動(dòng)的過(guò)穩(wěn)。3舷眼體胚發(fā)繳過(guò)程中脆漿濺PX基因3’末端序列的間源克隆采用3’RACE的方法,首先在靠近基因的5。的保守區(qū)設(shè)計(jì)了簡(jiǎn)并引物,并結(jié)臺(tái)通用GL物進(jìn)行巢式PCR,結(jié)果得到了L條長(zhǎng)為868BP的特異性穰強(qiáng)豹龍L羹疆譙2敷傷疆緩克隆豹鶼漿塑APX戇部分亭歹LGENBANK主登錄號(hào)為AY831398。結(jié)果表明這個(gè)克隧與GENBANK數(shù)據(jù)庫(kù)中已經(jīng)報(bào)道過(guò)的APX的MRNA序列脊商度的同源性。將克隆片段所編碼的氨基酸序列與NCBI上綴盤質(zhì)保守區(qū)數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì),發(fā)耀克隆片段所編碼的氮基酸序列與APX的縑守區(qū)育攝高酌黼澈{生,磊置每忍種植勃弱APX氨釜酸序剜魄較氌其畜較高的同源性,從而可以確認(rèn)克隆片段為龍眼APX的部分序列,并且包含了保鐸區(qū)的序列。胞漿型APX的EDNA全長(zhǎng)為L(zhǎng)KB多.離基因的CDNA全長(zhǎng)述露200BP,可玨避過(guò)5’RACE避一步獲得該纂因雛EDNA念長(zhǎng)。關(guān)鍵詞;龍眼;體細(xì)胞胚胎;抗壞血酸過(guò)氧化物酶;活性;胞漿型抗壞血酸過(guò)氧化物酶基因;同源克隆
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      上傳時(shí)間:2024-03-03
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    • 簡(jiǎn)介:博士學(xué)位論文驢4783472葡萄品種遺傳多樣性和霜霉病抗性鑒定的生化與分子生物學(xué)研究STUDIESONBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYOFGENETICDIVERSITYOFGRAPECULTIVARANDRESISTANTAPPRAISALOFDOWNYMILDEW專業(yè)名稱森林培育研究方向經(jīng)濟(jì)林培育博士生呂秀蘭指導(dǎo)教師張蕪倫教授抗霜霉病,其中京秀、信濃笑遺傳關(guān)系很近;第三類為克瑞森無(wú)核等9個(gè)品種,除8612、紅寶石無(wú)核表現(xiàn)中感霜霉病外,其余均感霜霉病。RAPD標(biāo)記能將全部品種分開,且與盆栽接種鑒定分析結(jié)果基本一致,是葡萄品種鑒定和葡萄品種對(duì)霜霉病抗性鑒定的有效方法。4。在國(guó)內(nèi)首次用RAMP分子標(biāo)記對(duì)18個(gè)葡萄品種進(jìn)行了分析,結(jié)果表明,80個(gè)引物組合中有33個(gè)能產(chǎn)生152條DNA擴(kuò)增片段,124條具有多態(tài)性,每個(gè)引物組合可擴(kuò)增L~8條多態(tài)性帶,平均46條。18個(gè)葡萄品秘可聚為4類超藤單獨(dú)聚為I類,表現(xiàn)抗霜霉??;峰后等9個(gè)品種等聚為II類,表現(xiàn)中抗霜霉病,其中京秀、信濃笑遺傳關(guān)系很近;克瑞森無(wú)核、無(wú)核8612聚為III類,表現(xiàn)中感霜霉??;超級(jí)無(wú)核等6個(gè)品種聚為IV類,表現(xiàn)感霜霉病。聚類分析顯示,RAMP標(biāo)記能將18個(gè)品種完全分開。RAMP與RAPD等分析一致,此方法可作為品種鑒定和品種抗感霜霉病鑒定的有效方法,且比RAPD重復(fù)性好,不需校正反應(yīng)體系。5同時(shí)系統(tǒng)地對(duì)18個(gè)葡萄品種在南方溫?zé)嵘诚碌闹参飳W(xué)及栽培學(xué)特性、結(jié)果習(xí)性進(jìn)行了調(diào)查研究,對(duì)漿果的內(nèi)外品質(zhì)進(jìn)行分析、鑒定和評(píng)價(jià)。結(jié)果表明有17個(gè)品種生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng),12個(gè)適應(yīng)性較強(qiáng),7個(gè)適應(yīng)性弱,主要表現(xiàn)在霜霉病發(fā)生嚴(yán)重。各個(gè)品種的花期均在5月上、中旬,成熟期7月上旬9月下旬;結(jié)果枝率為446V,89%結(jié)果系數(shù)為O62%189;果粒皆屬中到極大,果實(shí)顏色為紫紅、黃綠、藍(lán)黑色;SSC14。5T肛193%,總糖13,2%18,5%,總酸036%0∞%。多數(shù)品種具有結(jié)果枝率和結(jié)果系數(shù)商、橢圓或圓形、單粒重大、果穗大、顏色深艷、總糖含量高和總酸含量適度等優(yōu)良性狀。綜上所述,POD同工酶特征譜帶可作為葡萄品種抗、感霜霉病的輔助評(píng)價(jià),但不能作為品種鑒別的有效方法。PPO、PAL的酶活和CAT的比活可作為葡萄品種霜霉病抗性鑒定的輔助標(biāo)準(zhǔn)。SOD的酶活不能作為鑒定標(biāo)準(zhǔn)。RAPD和RAMP分子標(biāo)記均可作為葡萄品種和對(duì)霜霉病抗性鑒定的有效方法,此結(jié)果與田間鑒定結(jié)果基本一致。RAMP分子標(biāo)記比RAPD更能揭示品種的遺傳關(guān)系,標(biāo)記結(jié)果更準(zhǔn)確,適合遺傳背景不太清楚的遺傳多樣性研究。關(guān)鍵詞葡萄品種鑒定霜霉病抗性鑒定生物化學(xué)水平分子生物學(xué)水平2
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    • 簡(jiǎn)介:揚(yáng)州大學(xué)博士學(xué)位論文J亞群禽白血病病毒ENV蛋白分子生物學(xué)特性研究姓名葉建強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師秦愛建20050501LI揚(yáng)州大學(xué)睥士學(xué)位論文二、J亞群禽白血病病毒ENV蛋白功能與P13I相關(guān)穩(wěn)定表達(dá)ALVJ4817毒株ENV蛋白的PEDNA.EHV.DFI細(xì)胞的生長(zhǎng)形態(tài)特性研究表明,該細(xì)胞形態(tài)與正常細(xì)胞相比明顯變圓、變大,提出其可能是一種類轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。利用3DPSSM軟件以及TLVLPRED軟件分別對(duì)4817毒株ENV蛋白進(jìn)行了分析,結(jié)果表明4817毒株ENV蛋白具有信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。而且發(fā)現(xiàn)4817毒株ENV蛋白胞漿區(qū)存在P13K信號(hào)激活結(jié)構(gòu)域YXX/VL。用P13K特異性抑制劑對(duì)PCDNA.ENVDFL細(xì)胞處理后發(fā)現(xiàn),該細(xì)胞類轉(zhuǎn)化形態(tài)能被逆轉(zhuǎn),證明PCDNA.E/11I.DFL細(xì)胞類轉(zhuǎn)化現(xiàn)象直接與P13K信號(hào)有關(guān),提示4817毒株ENV蛋白具有潛在的致瘤性,其機(jī)理可能通過(guò)胞漿區(qū)YXXM結(jié)構(gòu)域激活P13K,引起PCDNAENVDFL細(xì)胞的類轉(zhuǎn)化,有關(guān)研究正在深入。三,J亞群禽白血病病毒BAY蛋白分類及其特性對(duì)不同ALVJENV蛋白胞漿區(qū)氨基酸序列進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn),ALVJ毒株ENV蛋白胞漿區(qū)除了YXXM結(jié)構(gòu)域外,還存在ITIM和類ITAM結(jié)構(gòu)域。根據(jù)YXXM、ITAM和ITI/VL作用和功能,作者提出將ALV.JENV蛋白分為抑制型、雙功能型以及激活型三類。根據(jù)這一分類原則,在檢索到的33個(gè)ALV.JENV蛋自中,有28個(gè)為雙功能型ENV蛋白,3個(gè)為抑制型ENV蛋白,只有4817和UD3毒株2個(gè)為激活型ENV蛋白;而檢索到的所有EAV.1IP均屬于抑制型ENV蛋白。ENV蛋白的抗原性分析發(fā)現(xiàn),抑制型、雙功能型以及激活型ENV蛋白的胞漿區(qū)抗原性依次降低,但致病、致瘤能力越來(lái)越強(qiáng),這種現(xiàn)象與其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基序直接相關(guān)。分析ITIM基序?qū)刂苹蛞种泼庖呒?xì)胞激活、增殖功能,提示抑制型、雙功能型ENV蛋白中ITIM基序與ALV_J免疫抑制相關(guān),抑制型ENV蛋自與EAVHP可能是ITIM受體,EAVHP可能為細(xì)胞內(nèi)原癌基因,ALVJ鯽R可能為病毒癌基因。四、J亞群禽白血病病毒雙功能型凹礦基因克隆及其表達(dá)通過(guò)組織病理檢查、組織切片特異性抗原檢測(cè)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)以及間接免疫熒光試驗(yàn)呼A從一疑似ALV.J感染的祖代肉用型種雞群中分離、鑒定到~株ALV.J病毒,命名為JSNT毒株。隨后對(duì)該毒株的ENV基因進(jìn)行了PCR擴(kuò)增、克隆、序列分析、轉(zhuǎn)移表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建以及表達(dá)。結(jié)果表明,該毒株ENV蛋白胞漿區(qū)存在YXXM和ITI/VL結(jié)構(gòu)域,屬于ALVJ雙功能型ENV蛋白;用該毒株P(guān)胛V基因以及PCDNA3.1載體成功構(gòu)建了轉(zhuǎn)移表達(dá)質(zhì)粒PCDNANTENV;通過(guò)PCDNA.NT,ER/V
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    • 簡(jiǎn)介:浙江大學(xué)博士學(xué)位論文赤霉素誘導(dǎo)無(wú)蔓南瓜蔓伸長(zhǎng)生理和分子生物學(xué)機(jī)制的研究姓名虞慧芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師曹家樹20050531摘要顯差異外,其它被檢測(cè)的酶活性均比長(zhǎng)蔓南瓜中的低長(zhǎng)蔓南瓜中除了N淀粉酶活性受多效唑的抑制作用比無(wú)蔓南瓜中的弱以外,其它%炙檢測(cè)的生理酶活性表現(xiàn)與無(wú)蔓南瓜中的基本致;GA3均能消除多效唑?qū)o(wú)蔓和長(zhǎng)蔓南瓜生長(zhǎng)和被檢測(cè)生理酶活性的抑制作用。4赤霉素誘導(dǎo)無(wú)蔓南瓜蔓伸長(zhǎng)基因表達(dá)的CDNAAFLP分析中,我LL、奠直過(guò)256對(duì)引物組合的選擇性擴(kuò)增,共得到了約26000條大小在50600印之間的1IFSTMMCFIPTDERIVEDFRAGMENTS。其中有141條差異條帶受GA3E游調(diào)控達(dá)的有84條,其中表達(dá)豐度高的有30條;受GA3下游調(diào)控的有57條,其中表達(dá)豐度高的有42條。我們回收并克隆了其中的53條差異條帶其中受GAT游調(diào)控的有32條,受GA3下游調(diào)控的有21條。JMJ袁53個(gè)TDFS進(jìn)行了BLAST分析,結(jié)果表明有31個(gè)TDFS序列和數(shù)據(jù)庫(kù)中已登入的基因或EST序列具有較高的相似性,其中20個(gè)TDFS分別和已知的基因序列相似,8個(gè)TDFS序列與數(shù)據(jù)庫(kù)中已登的未JMZJJ能基因相似。3個(gè)TDFS自鼬瞪9同源的FST序列;另有22個(gè)TDFS未嬲』墁藩同源的序列信息。我們對(duì)其中8個(gè)受GA3調(diào)節(jié)表達(dá)的TDFS表達(dá)模式進(jìn)行KTPCR驗(yàn)證,結(jié)果反映了CDNAAFLP的可靠性。對(duì)20個(gè)已知基因進(jìn)行功能分類,結(jié)果表明這些基因可能與細(xì)胞骨架、植物抗病、細(xì)胞壁組分代謝、細(xì)胞膜抗氧化、信號(hào)傳導(dǎo)、物質(zhì)和能量代謝等相關(guān)。以E研究結(jié)果表明,本實(shí)驗(yàn)材料無(wú)蔓南瓜可能與植株體內(nèi)GA缺陷有關(guān);外源GA3堪過(guò)調(diào)節(jié)可能與細(xì)胞骨架、細(xì)胞壁組分代謝、細(xì)胞膜抗氧化及信號(hào)傳導(dǎo)等相關(guān)基因的表達(dá),并影響植株體內(nèi)生理特性的,從而引起無(wú)蔓南瓜蔓晰申長(zhǎng)生長(zhǎng)。關(guān)鍵詞南瓜,矮化GA,O一淀粉酶,抗氧化酶,酸性磷酸酯酶,CDNAAFLP,基因表達(dá)
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    • 簡(jiǎn)介:分類號(hào)S85831密級(jí)碩士學(xué)位論文IBV分子流行病學(xué)及TWI型毒株的生物學(xué)特征與傳代致弱封柯宇指導(dǎo)教指導(dǎo)教師謝青梅教授學(xué)院名學(xué)院名稱動(dòng)物科學(xué)學(xué)院專業(yè)名專業(yè)名稱動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席教授中國(guó)廣州2016年6月I摘要禽傳染性支氣管炎(INFECTIOUSBRONCHITIS,IB)是由禽傳染性支氣管炎病毒(INFECTIOUSBRONCHITISVIRUS,IBV)引起的雞的一種急性、高度接觸傳染性疾病。20世紀(jì)90年代以來(lái),IB在國(guó)內(nèi)相繼爆發(fā),流行十分廣泛,給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失。IBV防控的難點(diǎn)在于血清型、基因型眾多,且不同血清型、基因型間沒有交叉保護(hù)或者交叉保護(hù)很弱,長(zhǎng)期的流行病學(xué)監(jiān)控及選擇針對(duì)本地區(qū)流行毒株的疫苗對(duì)IB的防控具有重要的意義。本實(shí)驗(yàn)室于20132015年期間從我國(guó)13個(gè)省市自治區(qū)發(fā)病雞場(chǎng)送檢病料中分離鑒定了290株IBV,并對(duì)分離株進(jìn)行S1基因測(cè)序與分析,結(jié)果表明290株中除2株為變異株外,288株聚類與7個(gè)進(jìn)化分支,即7個(gè)基因型。QX型和TWI型是我國(guó)目前主要的兩種IBV優(yōu)勢(shì)基因型,分別占分離毒株的44和264;其他五個(gè)基因型491型、CHIII型、CHIV型、CHVI型和MASS型分別占13、58、17、37和44?;蛳嗨菩苑治霭l(fā)現(xiàn),290株分離株之間核苷酸相似性在6310之間,氨基酸相似性在6020。TWI型分離株與國(guó)內(nèi)常用疫苗株(MASS型、LDT3A株、491株、YX10D90株)S1基因相似性較低。重組分析發(fā)現(xiàn),分離株中存在大量重組毒株,形成新的亞分支、亞型和變異株。TWI型IBV于20世紀(jì)90年代后首先出現(xiàn)在我國(guó)臺(tái)灣地區(qū),近幾年大陸地區(qū)TWI型分離株報(bào)道逐漸增多,但是對(duì)其生物學(xué)特征還不清楚。本研究選擇4株大陸TWI型分離株(ZS13、GZ14、ZZ15和LYG15株)進(jìn)行研究,進(jìn)行分離鑒定、全基因測(cè)序與分析、血清中和實(shí)驗(yàn)及商用疫苗免疫保護(hù)試驗(yàn),并建立了QPCR檢測(cè)方法。研究發(fā)現(xiàn)4株TWI型毒株僅在S1基因與臺(tái)灣TWI型參考毒株序列相似度高,其他各基因及全基因與國(guó)內(nèi)參考毒株相似度高,與臺(tái)灣地區(qū)、國(guó)外參考毒株基因相似度低。全基因重組分析表明GZ14株并不是完全來(lái)源于臺(tái)灣TWI型毒株,而是臺(tái)灣TWI型分離株與大陸毒株重組產(chǎn)生。血清中和試驗(yàn)表明ZS13株、GZ14株與國(guó)內(nèi)常用疫苗株血清型不同,ZS13株與GZ14株為同一血清型。商用疫苗免疫保護(hù)試驗(yàn)表明目前國(guó)內(nèi)商用疫苗毒株對(duì)TWI型毒株的保護(hù)效果不佳。本研究采用37℃SPF雞胚傳代的方法對(duì)GZ14株進(jìn)行致弱,以期獲得一株疫苗候選毒株。經(jīng)過(guò)一系列連續(xù)傳代,GZ14株傳代毒已適應(yīng)雞胚,造成明顯的雞胚病變,
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    • 簡(jiǎn)介:學(xué)校代碼10564學(xué)號(hào)2013101610分類號(hào)S6673密級(jí)博士學(xué)位論文枇杷花期調(diào)控的分子生物學(xué)研究張玲指導(dǎo)教指導(dǎo)教師林順權(quán)教授學(xué)院名學(xué)院名稱園藝學(xué)院專業(yè)名專業(yè)名稱果樹學(xué)答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席盧永根院士中國(guó)廣州2016年5月I摘要枇杷ERIOBOTRYALINDL為薔薇科枇杷屬植物,該屬包含二三十種,不同種間花期差異明顯,并且有一些枇杷種類的花期是可變的,或稱可塑的。例如,普通枇杷在秋冬季節(jié)開花;臺(tái)灣枇杷為春季開花;而臺(tái)灣枇杷恒春變型在原產(chǎn)地臺(tái)灣春季開花,引種到廣州華南農(nóng)業(yè)大學(xué)枇杷種質(zhì)資源圃以及廣州市果樹所后卻變?yōu)榍锒_花。然而,迄今為止,關(guān)于枇杷花期的分子生物學(xué)方面的研究甚少,并且未見涉及野生枇杷及花期差異的研究。本研究一方面從枇杷成花的基礎(chǔ)方面入手,進(jìn)行了枇杷花期相關(guān)基因的克隆、表達(dá)分析和功能驗(yàn)證的初步探索;另一方面對(duì)花期不同的枇杷屬材料花芽分化前及花芽分化期間的葉片進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,深入研究枇杷花芽分化起始過(guò)程中基因轉(zhuǎn)錄的動(dòng)態(tài)變化,為花期調(diào)控的分子生物學(xué)研究提供了大量信息,希望為揭示枇杷花期調(diào)控的分子機(jī)理奠定基礎(chǔ),為生產(chǎn)實(shí)踐中人工調(diào)控花果發(fā)育,以及培育不同成熟期新品種提供理論依據(jù),并為其它木本果樹的成花機(jī)理研究提供借鑒。主要結(jié)果如下1對(duì)兩種不同花期野生枇杷臺(tái)灣枇杷EDEFLEXANAKAI和臺(tái)灣枇杷恒春變型EDEFLEXAFKOSHUNENSISNAKAI的莖頂端進(jìn)行切片觀察,結(jié)果顯示臺(tái)灣枇杷恒春變型在9月底至10月初就已經(jīng)開始花芽分化,而臺(tái)灣枇杷11月才開始,表明不同枇杷種或變型之間花期不同是因?yàn)樗鼈兓ㄑ糠只_始的時(shí)間即已有不同。同時(shí)對(duì)普通枇杷開花時(shí)間不同的兩個(gè)品種‘早鐘6號(hào)’和‘解放鐘’的莖頂端在不同發(fā)育階段的觀察,發(fā)現(xiàn)‘早鐘6號(hào)’和‘解放鐘’開花時(shí)間差異則不是因?yàn)榛ㄑ糠只鹗紩r(shí)間的不同,而主要是因?yàn)樗鼈兓ㄐ虬l(fā)育快慢不同。2從臺(tái)灣枇杷恒春變型中成功得到FT、CO、GI、SOC1和PIF4同源基因各一個(gè),及FD和SVP同源基因各兩個(gè),分別命名為EDFT、EDCO、EDGI、EDSOC1、EDPIF4、EDFD1、EDFD2、EDSVP1和EDSVP2。對(duì)這些基因預(yù)測(cè)的氨基酸序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析,表明它們都具有各基因所特有的保守氨基酸殘基或結(jié)構(gòu)域。3亞細(xì)胞定位顯示EDFT、EDSVP1和EDSVP2在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中均有分布,而EDFD1、EDFD2、EDCO、EDGI、EDSOC1和EDPIF4只定位于細(xì)胞核。4在擬南芥中過(guò)表達(dá)EDFT、EDFD1、EDFD2、EDCO、EDGI和EDSOC1均表現(xiàn)出早花表型,說(shuō)明它們具有保守的促進(jìn)開花的功能。晝夜節(jié)律表達(dá)分析表明EDGI、EDCO和EDFT的表達(dá)均隨晝夜變化而變化,受光周期影響。BIFC實(shí)驗(yàn)證明EDFT可以和EDFD12在體內(nèi)發(fā)生蛋白水平上的互作。這些都進(jìn)一步證明這些基因是擬南芥相應(yīng)基因的同源基因,可能具有類似的功能。
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    • 簡(jiǎn)介:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)解析不同處理狀況下土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的變化姓名趙勇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師潘迎捷趙立平20050801應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)解析不同處理狀況下土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的變化術(shù),結(jié)合DNA產(chǎn)量、純度、片段大小以及所反映的微生物群落結(jié)構(gòu)特性等指標(biāo)評(píng)價(jià)了手提方法LABMETHOD得到的總DNA質(zhì)量,并將這些結(jié)果與兩種應(yīng)用較廣的商業(yè)試劑盒MOBIOULTRACLEANSOILDNAKIT和BI0101FASTDNASPINKITFORSOIL所得DNA的各種指標(biāo)進(jìn)行了比較。結(jié)果表明,手提方法LABMETHOD的粗DNA產(chǎn)量低于BIO101KIT的,但高于MOBIOKIT的。這些方法所得DNA的長(zhǎng)度都在21KB左右,LABMETHOD提取的DNA沒有嚴(yán)重被剪切現(xiàn)象,而兩種試劑盒提取的DNA都有不同程度的剪切。手提方法得到的DNA經(jīng)純化后,應(yīng)用細(xì)菌及真菌特異引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,均能獲得目的片段,表明該方法能從土壤中同時(shí)有效提取細(xì)菌和真菌總基因組DNA。并且,手提方法所得DNA的細(xì)菌16SRDNA和真菌18SRDNA的PCRRFLP圖譜與兩種商業(yè)試劑盒的圖譜基本相似,但三種方法提取的DNA在細(xì)菌16SRDNAV3區(qū)和真菌28SRDNA片段的PCRTGGE圖譜上都存在一定差異,主要表現(xiàn)在一些弱勢(shì)條帶的有無(wú)或強(qiáng)弱上。這說(shuō)明手提方法提取的總DNA與兩種商業(yè)試劑盒一樣,在一定程度上能反映土壤中微生物群落的多樣性和組成??傊?,手提DNA方法LABMETHOD所用試劑普通,價(jià)格便宜,能在4小時(shí)以內(nèi)獲得夠質(zhì)夠量的土壤DNA用于微生物分子生態(tài)學(xué)研究,較適合于廣大普通實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行土壤DNA提取工作。二、應(yīng)用PCRRFLP及PCRTGGE技術(shù)監(jiān)測(cè)農(nóng)田土壤微生物短期動(dòng)態(tài)變化在一塊農(nóng)田里于一個(gè)月內(nèi)連續(xù)采集5次土樣,提取土樣微生物總DNA,應(yīng)用PCRRFLP及PCRTGGE技術(shù)監(jiān)測(cè)土壤微生物在自然狀況下的短期動(dòng)態(tài)變化。初步結(jié)果表明,細(xì)菌16SRDNA和真菌18SRDNA的PCRRFLP圖譜在5個(gè)采樣時(shí)間點(diǎn)上基本一致;細(xì)菌的PCRTGGE圖譜平均有40條帶,其相似性在90%以上,真菌的平均有20條帶,其相似性在70%以上。這說(shuō)明被研究的這塊農(nóng)田土壤細(xì)菌區(qū)系短期內(nèi)變化不大,而真菌區(qū)系存在一定幅度的動(dòng)態(tài)變化,并且細(xì)菌多樣性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌多樣性。比較兩種分子方法的結(jié)果表明,PCRTGGE技術(shù)比PCRRFLP技術(shù)更能精確地反映土壤微生物的動(dòng)態(tài)變化,并且能同時(shí)陜速地對(duì)多個(gè)樣品進(jìn)行有效區(qū)分。三、兩種外源微生物制劑加入后農(nóng)田土壤中微生物群落結(jié)構(gòu)及纖維素水解活性動(dòng)態(tài)變化的研究土壤微生物群落結(jié)構(gòu)及纖維素水解活性的變化可以反映不同改良或管理措施對(duì)土壤的影響。在實(shí)驗(yàn)室條件下,應(yīng)用濾紙條埋片法和不依賴于培養(yǎng)的分子方法研究了Ⅱ
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    • 簡(jiǎn)介:Y959359分類號(hào)Q12Q墜UDC學(xué)位論文密級(jí)學(xué)號(hào)壁2QQ3虬I2小麥對(duì)條銹病、白粉病和衰老抗性的分子細(xì)胞生物學(xué)研究指導(dǎo)教師姓名申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別專業(yè)名稱論文提交日期論文答辯日期學(xué)位授予單位學(xué)位授予時(shí)間論文答辯委員會(huì)主席論文答辯委員會(huì)成員論文評(píng)閱人羅培高任正隆教授四川農(nóng)業(yè)大學(xué)博士生物化學(xué)與分予生物學(xué)2006年5月2006年6月19日刪川農(nóng)業(yè)大學(xué)2006年7月榮廷晤院士四川農(nóng)業(yè)大學(xué)余撼群研究員成都生物所趙云教授四川大學(xué)葉華智教授四川農(nóng)業(yè)大學(xué)黃玉碧教授凹JIL農(nóng)業(yè)大學(xué)賈繼增研究員中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究員廖玉才教授華中農(nóng)業(yè)大學(xué)吳為人教授浙江大學(xué)張義正教授四川1大學(xué)余懋群研究員成都生物所2006年6月個(gè)R單株構(gòu)成的F2群體進(jìn)行了連鎖分析,結(jié)果表明該基因位于2BS上,與GW耐LO標(biāo)記共分離,并繪制了該基因的連鎖圖從系譜、遺傳、分子標(biāo)記、和抗性鑒定等多方面分析,發(fā)現(xiàn)小麥品系種川農(nóng)17、愛民5號(hào)、愛民6號(hào)中的抗條銹病基因是一個(gè)新基因,暫命名為YRCNIG微衛(wèi)星標(biāo)記XGWM410就是YRCNL9的診斷標(biāo)記,它的發(fā)現(xiàn)必將加快小麥的分子標(biāo)記輔助選擇育種的進(jìn)程3、小麥抗條銹病基因YRCNL9的診斷檢測(cè)和遺傳分析用小麥條銹病抗性基因YRCNL9的診斷標(biāo)記XG礬N410對(duì)19個(gè)小麥品種或品系進(jìn)行PCR篩選,其中川農(nóng)19、新抗5號(hào)、愛民5號(hào)和愛民6號(hào)擴(kuò)增出與條銹病抗性基因YRCNL9共分離的特征片斷。其大小為391個(gè)堿基。而在其它的小麥品種或品系中未能檢測(cè)到該片斷。系譜分析和抗性鑒定結(jié)果表明川農(nóng)19、新抗5號(hào)、愛民5號(hào)和愛民6號(hào)含有小麥條銹病基因YRCNL9抗性遺傳分析發(fā)現(xiàn)小麥條銹病抗性在川農(nóng)19,新抗5號(hào)和愛民5號(hào)中的遺傳符合單個(gè)顯性基因的遺傳規(guī)律3抗I感;雜交組合煙輻188/愛民6號(hào)的抗性遺傳也符合單個(gè)顯性基因的遺傳規(guī)律,而另外一些雜交組合如R25/愛民6號(hào)。魯955159/愛民6號(hào)和蘇3110/愛民6號(hào)中的抗性分離則符合兩對(duì)基因互補(bǔ)的遺傳規(guī)律9抗7感本研究揭示了小麥條銹病抗性基因刪9在不同遺傳背景和雜交組合的抗性表達(dá)和分離有差異,從而加速YRCNL9在小麥抗條銹病育種中的開發(fā)與利用4、基因?qū)蚣僬f(shuō)分析和鑒定一個(gè)來(lái)自中問(wèn)偃麥草的小麥條銹病新抗源用當(dāng)前流行的小麥條銹菌生理小種CYR32對(duì)含廳基因和不確定是否含紛基因的小麥品系進(jìn)行接種鑒定,結(jié)果顯示在正式發(fā)表的條銹病抗性基因中只有很少數(shù)幾個(gè)對(duì)條銹菌生理小種CYR32是有效的。本研究用遠(yuǎn)源雜交的方法將中間偃麥草點(diǎn)1YTRIGINTERMEDIUM,中的抗小麥條銹病基因?qū)肫胀ㄐ←?。在中間偃麥草與普通小麥川麥107的雜交后代中選育的原24和原25對(duì)條銹病是近免疫的抗性鑒定表明原24和原25對(duì)小麥條銹菌生理小種CYR32的反應(yīng)型與其它所有報(bào)道的抗性基因的反應(yīng)型是不同的系譜分析表明該抗性基因是一個(gè)新的抗性基因,因此將其被命名為YRYE250小麥條銹病抗性基因仔,蝴成功鑒定和導(dǎo)入小麥遺傳背景將對(duì)小麥抗條銹病育種起到巨大的推動(dòng)作用5、鑒定一個(gè)來(lái)自黑麥的小麥抗條銹病新基因YRR212通過(guò)接種當(dāng)前流行的條銹菌生理小種CYR32,發(fā)現(xiàn)來(lái)自于中國(guó)西南地區(qū)的一個(gè)小麥品系R212對(duì)其具有高度的抗性將抗病的R212與感病的小麥品系雜交,并進(jìn)行了
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