簡介：研究背景海蛇中富含具有藥用價(jià)值的抗炎活性分子，其作用機(jī)理和作用靶點(diǎn)尚不明晰。青環(huán)海蛇（HYHISCYANOCINCTUS）是分布于中國東南沿海的一種優(yōu)勢蛇種，自古以來就在中國被用作食材和藥材，也是被收錄入本草綱目的17種蛇中的其中一種，其蛇毒毒素中含有許多生物活性蛋白質(zhì)和多肽，在緩解類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、關(guān)節(jié)痹痛和自身免疫性炎癥疾病中有著良好的功效。由于蛇毒中抗炎活性組分的理化性質(zhì)比較接近，且有些成分豐度很低，通過傳統(tǒng)的色譜技術(shù)難以分離獲得單一組分的蛇毒來進(jìn)行結(jié)構(gòu)、功能和機(jī)制方面的研究。本課題組前期利用噬菌體展示文庫技術(shù)，建立了以人腫瘤壞死因子Ⅰ型受體TNFR1為靶點(diǎn)淘選海蛇蛇毒抗炎活性成分的方法，獲得了22氨基酸的抗炎活性肽HYDROSTATINSN1，通過同源建模、肽鏈截短并利用細(xì)胞模型及LPS誘導(dǎo)的小鼠急性休克模型篩選截短肽，得到了靶點(diǎn)特異性更強(qiáng)的十肽HYDROSTATINSN10。在膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎CIA動物模型和炎癥性腸病IBD動物模型中，HYDROSTATINSN10都具有顯著的抗炎效應(yīng)，有望研發(fā)成為治療TNFΑ受體TNFRS相關(guān)炎癥性疾病的新型靶向特異性海洋多肽類藥物。TNFΑ與兩型TNF受體（TNFR1和TNFR2）的相互作用及下游信號通路的異常激活是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、潰瘍性結(jié)腸炎等自身免疫性疾病發(fā)生發(fā)展的重要因素。先導(dǎo)肽HYDROSTATINSN1與TNFR1、TNFR2均有一定的結(jié)合能力，并能拮抗TNFΑ與TNFR1TNFR2的相互作用，而HYDROSTATINSN10與TNFR1的親和力更強(qiáng)，且在細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)中能夠在一定濃度范圍內(nèi)抑制TNFR1介導(dǎo)的下游NFΚB及MAPKS信號通路。但HYDROSTATINSN10的靶點(diǎn)專一選擇性尚無明確驗(yàn)證，即是否與TNFR2結(jié)合、能否競爭性抑制TNFΑ與TNFRS的相互作用尚沒有進(jìn)行驗(yàn)證。同時，TNFR1與HYDROSTATINSN10的結(jié)合部位、結(jié)合模式和相互作用氨基酸亦不明確。因此，驗(yàn)證HYDROSTATINSN10的受體選擇性，并探究HYDROSTATINSN1SN10同TNFR1結(jié)合的復(fù)合物構(gòu)象，將為闡明HYDROSTATINSN10特異性拮抗TNFR1發(fā)揮抗炎作用的分子機(jī)制打下重要的基礎(chǔ)。研究目的確證HYDROSTATINSN10對靶點(diǎn)TNFR1拮抗作用的專一性，利用結(jié)構(gòu)生物學(xué)的方法測定TNFR1SN10復(fù)合物的三維結(jié)構(gòu)，找到多肽與受體的結(jié)合位點(diǎn)和關(guān)鍵作用氨基酸，進(jìn)一步揭示HYDROSTATINSN10選擇性拮抗TNFR1的分子機(jī)制，為多肽的結(jié)構(gòu)改造以及新型TNFR1選擇性抑制劑的研發(fā)奠定生物學(xué)基礎(chǔ)。研究方法1、利用多種生物分子相互作用測定技術(shù)檢測HYDROSTATINSN10分別與TNFR1、TNFR2和TNFΑ的相互作用，獲得親和力常數(shù)、結(jié)合動力學(xué)參數(shù)和熱動力學(xué)參數(shù)等數(shù)據(jù)，分析結(jié)合方式與性質(zhì)，并以競爭性結(jié)合的方法觀察HYDROSTATINSN10是否可以阻斷或抑制TNFΑ與TNFR1TNFR2的相互作用。2、通過不依賴連接酶的克隆LIGATIONINDEPENDENTCLONINGLIC構(gòu)建人TNFR1胞外區(qū)STNFR1蛋白的原核表達(dá)載體，在大腸桿菌中表達(dá)STNFR1，摸索合適的誘導(dǎo)表達(dá)條件經(jīng)過親和層析、離子交換層析和分子篩層析對目的蛋白進(jìn)行精細(xì)純化，獲得高純度的STNFR1蛋白。3、等溫滴定量熱法ITC鑒定體外表達(dá)的STNFR1與TNFΑ結(jié)合的生物學(xué)活性微量差示掃描熒光技術(shù)NANODSF篩選目的蛋白穩(wěn)定性最高的緩沖液條件。4、將STNFR1與多肽HYDROSTATINSN1SN10共孵育，采用懸滴法進(jìn)行STNFR1SN10復(fù)合物共結(jié)晶和STNFR1單晶生長的大規(guī)模條件初篩，對部分較好的結(jié)晶條件進(jìn)行優(yōu)化，培養(yǎng)高質(zhì)量的蛋白晶體。5、使用同位素標(biāo)記的氮源和碳源在M9培養(yǎng)基中表達(dá)和純化15N、13C標(biāo)記的STNFR1蛋白構(gòu)建麥芽糖結(jié)合蛋白MBP和HYDROSTATINSN10的融合表達(dá)載體，表達(dá)純化15N、13C標(biāo)記的重組多肽HYDROSTATINSN10。6、運(yùn)用核磁共振技術(shù)NMR分別測定15NSTNFR1和15NSN10的2D1H15NHSQC波譜，然后加入相應(yīng)的未標(biāo)記配體進(jìn)行二維滴定，分析化學(xué)位移情況，驗(yàn)證STNFR1與HYDROSTATINSN10結(jié)合的熱點(diǎn)區(qū)域HOTSPOTS氨基酸將15N、13C雙標(biāo)記的蛋白和多肽孵育，收集NMR波譜數(shù)據(jù)，解析復(fù)合物的溶液三維結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果1、利用表面等離子共振SPR、微量熱泳動MST、和等溫滴定量熱法ITC驗(yàn)證HYDROSTATINSN10的靶點(diǎn)專一性。SPR實(shí)驗(yàn)表明，HYDROSTATINSN10能特異性結(jié)合TNFR1，而和TNFR2、TNFΑ沒有特異性結(jié)合HYDROSTATINSN10能夠競爭性抑制TNFΑ與TNFR1的相互作用，而對TNFΑ與TNFR2的結(jié)合沒有影響。MST結(jié)果顯示，HYDROSTATINSN10與TNFR1有特異性結(jié)合，親和力KD值（平衡解離常數(shù)）為283ΜMHYDROSTATINSN10與TNFR2和TNFΑ沒有相互作用。ITC結(jié)果表明，HYDROSTATINSN10與TNFR1存在相互作用，親和力約為229ΜM，與TNFR2、TNFΑ沒有結(jié)合。2、成功構(gòu)建人TNFR1胞外區(qū)蛋白的原核表達(dá)載體PMCSG7STNFR1161、PMCSG7STNFR1190、PMCSG7SUMOSTNFR1161和PMCSG7SUMOSTNFR1190。使用LB培養(yǎng)基在大腸桿菌BL21中表達(dá)，優(yōu)化了誘導(dǎo)表達(dá)溫度、誘導(dǎo)時間和誘導(dǎo)劑濃度。確立了目的蛋白的變性、復(fù)性緩沖液體系，通過鎳柱親和層析、陽離子交換層析和凝膠過濾層析分離純化獲得了高純度＞97％的STNFR1蛋白，其產(chǎn)量約為73MG每升菌液。3、ITC驗(yàn)證結(jié)果表明，體外表達(dá)的重組STNFR1161、STNFR1190蛋白與TNFΑ有良好的結(jié)合能力，KD值分別為1548NM和1901NM，與文獻(xiàn)報(bào)道水平數(shù)量級一致。4、NANODSF確定了目的蛋白用于結(jié)晶實(shí)驗(yàn)的緩沖液條件20MMTRISHCLPH75，150MMNACL，在這個溶液中STNFR1的TM值為7767±005℃。使用96孔懸滴板進(jìn)行結(jié)晶條件初步篩選，找到了STNFR1和TNFR1SN10復(fù)合物的多個結(jié)晶條件，對生長較好的條件進(jìn)行優(yōu)化，獲得了STNFR1蛋白的高質(zhì)量晶體02MM02MM01MM。目前TNFR1SN10復(fù)合物的晶體正在繼續(xù)優(yōu)化中。5、收集STNFR1晶體的X射線衍射數(shù)據(jù)，通過分子置換法解析數(shù)據(jù)，得到STNFR1的高分辨率169A三維結(jié)構(gòu)，與已報(bào)道的TNFR1胞外區(qū)晶體結(jié)構(gòu)PDB編號1NCF進(jìn)行疊合比對后顯示二者構(gòu)象基本一致。6、使用M9培養(yǎng)基和15NNH4CL、13C葡萄糖對STNFR1進(jìn)行同位素標(biāo)記并成功表達(dá)純化出了15N13CSTNFR1蛋白（純度＞98％）構(gòu)建了MBP多肽的融合表達(dá)載體PMCSG9SN10，體外表達(dá)純化得到了15N、13C標(biāo)記的重組多肽SN10，用于NMR實(shí)驗(yàn)。研究結(jié)論本研究一方面證明了青環(huán)海蛇蛇毒多肽HYDROSTATINSN10能夠?qū)Ｒ恍越Y(jié)合TNFR1，不與TNFR2或TNFΑ結(jié)合，并且SN10能夠選擇性地阻礙TNFΑ與TNFR1的相互作用另一方面獲得了多肽SN10與TNFR1復(fù)合物的初篩晶體，以及同位素標(biāo)記的重組蛋白STNFR1和重組多肽SN10，為進(jìn)一步的結(jié)構(gòu)生物學(xué)探索和SN10抗炎機(jī)理的揭示奠定了基礎(chǔ)。

簡介：分類號R7379UDC密級重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目PHF2在乳腺癌中的表達(dá)及生物學(xué)功能研究在乳腺癌中的表達(dá)及生物學(xué)功能研究作者姓名張露張露申請學(xué)位級別碩士學(xué)科、專業(yè)名稱腫瘤學(xué)腫瘤學(xué)論文答辯年月2016年5月2016年4月指導(dǎo)教師姓名（職稱、單位名稱）任國勝任國勝教授教授重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院醫(yī)院目錄符號說明符號說明1中文中文摘要摘要3英文摘要英文摘要5論文正文論文正文PHF2在乳腺癌中的表達(dá)及生物學(xué)功能研究在乳腺癌中的表達(dá)及生物學(xué)功能研究7前言前言7參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)9第一部分第一部分PHF2在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義在乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義111實(shí)驗(yàn)材料與方法實(shí)驗(yàn)材料與方法1111材料材料1112方法方法152統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)分析183結(jié)果結(jié)果19第二部分第二部分PHF2對乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能研究對乳腺癌細(xì)胞生物學(xué)功能研究261材料與方法材料與方法2611材料材料2612方法方法262統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)分析293結(jié)果結(jié)果29第三部分三部分PHF2對乳腺癌細(xì)對乳腺癌細(xì)胞裸鼠成瘤的影響胞裸鼠成瘤的影響371材料與方法材料與方法3711材料材料3712方法方法372統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)分析383結(jié)果結(jié)果38第四部分四部分討論討論40全文總結(jié)全文總結(jié)43參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)44

簡介：分類號華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文密級鴨疫里氏桿菌DPPⅣ缺失株的生物學(xué)特性研究和繃殖缺失株的構(gòu)建CHARACTERIZATIONOF尼切眥鋤翮蛹兆啊徹DPPIVDELETION、STRAININDCONSTRUCTIONOFNROADELETIONSTRA“STRAMUDCONSTRUCLLIOIL‘ZROADELEL3011TSTRAM～研究生學(xué)號指導(dǎo)教師指導(dǎo)小組劉寧2010302110178李自力副教授畢丁仁教授李自力副教授栗紹文副教授石德時副教授劉梅副教授肖運(yùn)才副教授金卉副教授王喜亮副教授專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向獸醫(yī)微生物與免疫學(xué)獲得學(xué)位名稱農(nóng)學(xué)碩士獲得學(xué)位時間2013年6月華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院二O一三年六月鴨疫里氏桿菌DPPIV缺失株的生物學(xué)特性研究和AROA缺失株的構(gòu)建目錄摘要IABS瞰CTII縮略詞表IV第一章文獻(xiàn)綜述11RA病原學(xué)研究進(jìn)展111分類地位112生物學(xué)特性及血清型213分子生物學(xué)研究進(jìn)展32RA流行病學(xué)研究進(jìn)展43RA臨床癥狀及診斷方法531臨床癥狀532診斷方法54RA的防治研究進(jìn)展741藥物防治842疫苗防治851自然突變1052人工誘導(dǎo)1153分子生物學(xué)方法11第二章鴨疫里氏桿菌DPPIV缺失株生物學(xué)特性的研究131目的和意義132材料1321菌株與細(xì)胞1322主要試劑1323實(shí)驗(yàn)動物1324主要溶液的配制1325主要儀器143生物學(xué)特性的研究1431鴨疫里氏桿菌DPPIV基因缺失株生化特性鑒定1432鴨疫里氏桿菌DPPIV基因缺失株生長曲線的測定1433鴨疫里氏桿菌DPP1V基因缺失株LD50的測定1434鴨疫里氏桿菌DPPIV基因缺失株的粘附入侵試驗(yàn)144結(jié)果分析1541鴨疫里氏桿菌DPPIV基因缺失株的生化鑒定15

簡介：分類號S壘3211中文論文題目單位代碼學(xué)號洳≥J～嘻博士學(xué)位論文⑧1033511216009英文論文題目IDENTINCATIONANDFUNCTIO曲LANALVSISOF抑OCKS1試M口GN印ORMEO唧蕊E研究方向金壬撞麴痘堡堂所在學(xué)院盛些生生塹技盎堂暄⑧論文作者簽名名錢敘指導(dǎo)教師簽名J么。邊遍論文評閱人1巫自隆名評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5答辯委員會主席委員1委員2委員3委員4委員5委員6答辯日期201564

簡介：碩士學(xué)位論文MASTERSDISSERTATION論文題目論文題目基于伐普肽自組裝納米貴金屬材料及其生物學(xué)性能的研究作者姓名作者姓名李彥集學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)生物化工指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師高大威教授2017年5月中圖分類號TQ469學(xué)校代碼10216UDC6154密級公開工學(xué)碩士學(xué)位論文工學(xué)碩士學(xué)位論文基于伐普肽自組裝納米貴金屬材料及其生物學(xué)性能的研究碩士研究生李彥集導(dǎo)師高大威教授申請學(xué)位工學(xué)碩士學(xué)科專業(yè)生物化工所屬學(xué)院環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院答辯日期2017年5月授予學(xué)位單位燕山大學(xué)

簡介：STUDEFFECYOFSELENIUMASTONBIOLOGICALTOFFORCEFEEDINGFATTYLIVERGEESETHESISSUBMITTEDTOQINGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFAGRONOMYSUNPENGCOLLEGEOFANIMALSCIENCEANDTECHNOLOGYSUPERVISORPROFESSORWANGBAOWEIQINGDAO‘CHINAJUNE，2010青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄第三章酵母硒對肥肝鵝肝臟細(xì)胞凋亡的影響3L1材料與方法312結(jié)果與分析333討侖354結(jié)論一35第四章酵母硒對肥肝鵝肝臟SOD基因表達(dá)量的影響36L材料與方法362結(jié)果與分析423討論464結(jié)論46全文結(jié)論47參考文獻(xiàn)48碩士期間發(fā)表的論文54附錄55

簡介：點(diǎn)擊查看更多腸道病毒71型結(jié)構(gòu)蛋白VP1及其肽段的生物學(xué)活性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：本研究旨在將抗B7H4單鏈抗體與人IGG1CH3進(jìn)行連接，對抗B7H4單鏈抗體進(jìn)行人源化改造，希望得到對腫瘤生長有抑制作用的融合蛋白。本實(shí)驗(yàn)室的先前研究中，已構(gòu)建出抗B7H4單鏈抗體庫，并且利用核糖體展示技術(shù)篩選出一株鼠源性抗B7H4的特異性單鏈抗體?？墒?，因?yàn)樵撝陠捂溈贵w缺少FC段，造成其在體內(nèi)的半衰期短、在血液中容易被清除，且也造成了其在鑒定方面的繁雜。因此，我們將ANTIB7H4SCFV基因與人IGG1CH3基因相連，以此對單鏈抗體進(jìn)行人源化改造。具體結(jié)果如下1ANTIB7H4SCFVCH3基因的克隆從人外周血單個核細(xì)胞中提取總RNA，然后用RTPCR擴(kuò)增出人IGG1CH3基因利用SOEPCR技術(shù)將ANTIB7H4SCFV基因和人IGG1CH3基因進(jìn)行連接來獲得重組基因再通過瓊脂糖凝膠電泳和基因測序鑒定重組基因。結(jié)果表明重組的ANTIB7H4SCFVCH3基因序列和期望的一致。2ANTIB7H4SCFVCHI3蛋白的表達(dá)、純化及活性檢測將重組基因克隆到原核表達(dá)載體PET431A中，轉(zhuǎn)化至ECOLIBL21DE3，用IPTG誘導(dǎo)表達(dá)出抗體蛋白抗體蛋白再經(jīng)鎳柱親和層析NINTA純化，純化后的蛋白經(jīng)WESTERNBLOT鑒定用ELISA和WESTERNBLOT鑒定抗體蛋白和B7H4抗原結(jié)合的特異性和親和性。結(jié)果表明成功構(gòu)建了抗B7H4人源化單鏈抗體的表達(dá)體系，獲得與B7H4抗原親和性和特異性高的可溶性蛋白。3ANTIB7H4SCFVCH3蛋白的生物學(xué)功能檢測為了檢測抗體蛋白的生物學(xué)功能，用C57BL6小鼠建立了LEWIS肺癌皮下移植瘤模型將荷瘤鼠隨機(jī)分成兩組，注射生理鹽水的為模型組，注射ANTIB7H4SCFVCH3蛋白的為受試藥組，并從此刻開始記錄兩組小鼠腫瘤體積和小鼠體重的變化，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時處死小鼠剝離瘤塊進(jìn)行稱重，并對腫瘤組織進(jìn)行蘇木精伊紅染色觀察組織病理學(xué)形態(tài)。結(jié)果表明對照組的腫瘤體積和瘤重普遍大于實(shí)驗(yàn)組光鏡下觀察，實(shí)驗(yàn)組腫瘤細(xì)胞排列密度較對照組低且見病灶性壞死抗體蛋白可以抑制LEWIS荷瘤小鼠腫瘤的生長，顯示出良好的生物學(xué)功能活性。ANTIB7H4SCFVCH3這一功能蛋白為腫瘤的靶向治療等方面的研究提供了基礎(chǔ)。

簡介：西花薊馬FRANKLINIELLAOCCIDENTALISPERGE是世界性分布的重要農(nóng)業(yè)害蟲，球孢白僵菌（BEAUVERIABASSIANA）是防治西花薊馬的重要生物因子之一。昆蟲在感染了病原物（或寄生物）后，能通過移動到更高或更低的環(huán)境溫度下，實(shí)現(xiàn)體溫的改變，即，行為性體溫調(diào)節(jié)。行為性體溫調(diào)節(jié)對昆蟲病原物互作體系有著顯著影響。本文以健康個體為對照，檢測了被球孢白僵菌侵染的西花薊馬行為性體溫調(diào)節(jié)，及其對存活、繁殖、性比和基因表達(dá)的影響。探討了溫度對球孢白僵菌侵染西花薊馬后的生長動力學(xué)及毒力的影響。為提高球孢白僵菌對西花薊馬的防治效率提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下1西花薊馬被球孢白僵菌侵染后的行為性冷趨溫度選擇性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，健康的西花薊馬偏好選擇24℃的溫度環(huán)境，而被球孢白僵菌侵染的薊馬趨向于選擇更低的溫度，12℃，即，發(fā)生了行為性冷趨。低溫改變了染菌西花薊馬的存活和繁殖。與24℃相比，染菌薊馬在12℃下的存活率顯著提高，但產(chǎn)卵總量顯著下降。在24℃下，與健康薊馬相比，染菌薊馬繁殖前期產(chǎn)卵能力上調(diào)但后期產(chǎn)卵能力下降，而在12℃下，與健康薊馬相比，染菌薊馬繁殖后期產(chǎn)卵能力上調(diào)。低溫改變了染菌西花薊馬的性比。對于當(dāng)代染菌西花薊馬，在12℃和24℃下，染菌薊馬的性別比例（♂∶♀）都隨時間推移而下降，且在12℃下，染菌薊馬的性比（♂∶♀）始終高于24℃下。對于染菌薊馬的后代，其種群雌性比例在12℃370％下要高于24℃285％下。在12℃下，卵發(fā)育為成蟲的存活率84％要高于24℃下染菌薊馬后代的存活率80％。低溫延緩了染菌薊馬體內(nèi)真菌的生長。從西花薊馬被球孢白僵菌侵染第2D起，12℃下薊馬體內(nèi)真菌拷貝數(shù)開始顯著低于24℃下。2西花薊馬被球孢白僵菌侵染后行為性冷趨下的轉(zhuǎn)錄組分析通過二代轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)比較了健康薊馬和染菌薊馬在12℃和24℃下體內(nèi)基因差異表達(dá)情況。總共拼接獲得77155條UNIGENE，得到了34515條有注釋的基因。對染菌薊馬在12℃和24℃下的表達(dá)基因做對比，總共獲得521條差異表達(dá)基因，其中有225條基因與健康薊馬對低溫響應(yīng)的差異表達(dá)基因相重合，稱為第一類DEGFTODEG，其余的296條基因?yàn)槿揪E馬對低溫響應(yīng)的特有基因，稱為第二類DEGSTODEG。FTODEG中有74條基因被GO注釋，富集到29條PATHWAY中。STODEG中有97條基因被GO注釋，富集到48條PATHWAY中。結(jié)果顯示12℃低溫引起了染菌薊馬體內(nèi)一系列的免疫相關(guān)應(yīng)答和應(yīng)激相關(guān)應(yīng)答，提高了染菌薊馬對抗真菌侵染的能力。3西花薊馬行為性冷趨相關(guān)基因的鑒定及表達(dá)分析低溫12℃誘導(dǎo)了染菌薊馬體內(nèi)免疫相關(guān)基因的大量表達(dá)。本文檢測了免疫過程中信號轉(zhuǎn)導(dǎo)基因TOLL、與T細(xì)胞抗性相關(guān)基因ANT、免疫過程中信號調(diào)節(jié)和放大基因SER，免疫過程中免疫誘導(dǎo)效應(yīng)因子基因PER在12℃和24℃環(huán)境下的表達(dá)情況。結(jié)果顯示，除ANT基因表達(dá)量在第3D開始下降，TOLL、SER和PER3個基因表達(dá)量均隨侵染時間的增加而增多。而且，12℃下免疫相關(guān)基因的表達(dá)量均高于24℃下。低溫12℃改變了應(yīng)激相關(guān)基因的反應(yīng)模式。本文檢測了應(yīng)激過程中編碼海藻糖TRE、脯氨酸PRO和熱激蛋白HSP合成的3個基因的表達(dá)情況。無論染菌與否，在12℃下，TRE、PRO和HSP3個基因隨著時間的增加，其表達(dá)均呈現(xiàn)出先升高再降低或者再升高的模式而在24℃下，TRE、PRO和HSP3個基因的表達(dá)量隨時間推移緩慢增加，除染菌薊馬體內(nèi)TRE在第2D和3D表達(dá)量沒有明顯變化外，其他基因均在第3D有明顯增加。4兩株球孢白僵菌在三個溫度下侵染西花薊馬的比較生長動力學(xué)及其毒力生測結(jié)果顯示，30℃下菌株SCWJ2毒力顯著高于GZGY13，25℃和20℃下兩菌株毒力無顯著差異。平板培養(yǎng)的試驗(yàn)表明，菌株SCWJ2在三個溫度下的菌落直徑均顯著大于菌株GZGY13。實(shí)時熒光定量結(jié)果顯示，在30℃下SCWJ2真菌拷貝數(shù)大于GZGY13，25℃和20℃下兩菌株基因拷貝數(shù)無顯著差異。可見真菌在被侵染蟲體內(nèi)的基因拷貝數(shù)受到菌株和溫度的影響，其與生物測定結(jié)果相一致，與離體培養(yǎng)的平板菌落直徑測定結(jié)果不一致。兩菌株均對西花薊馬具有較高的毒力，但與菌株GZGY13相比，SCWJ2更適合高溫條件下對西花薊馬的防治。

簡介：福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文龍眼果實(shí)采后病害之病原及其生物學(xué)特性姓名張居念申請學(xué)位級別碩士專業(yè)農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程指導(dǎo)教師林河通王宗華20060501塑壟壅簽盔堂堡主堂堡笙蘭一中文摘要龍眼DIMDCD，御“SLONGANLOUT是我國南方亞熱帶的名優(yōu)水果，其果實(shí)成熟于高溫季節(jié)，采后生理代謝H土盛鮮果易失水、褐變和腐爛，隨著人們對農(nóng)殘的抵制，無公害貯運(yùn)技術(shù)顯得尤為重要。本項(xiàng)目通過對不同產(chǎn)地、不同生長發(fā)育階段和不同貯藏條件的龍眼果實(shí)進(jìn)行病原真菌的分離鑒定，闡明了龍眼貯藏期的腐爛主要是由采前真菌的潛伏侵染引起，并認(rèn)為采前真菌病害的防治是龍眼無公害保鮮的關(guān)鍵。本文還對主要病原菌的生物學(xué)特性以及采前病害控制技術(shù)進(jìn)行了研究。結(jié)果如下1龍眼果實(shí)病原的分離鑒定從龍眼果實(shí)表面可分離到多種真菌，有青霉菌PENICILLIUMSP、根霉菌RHIZOPUSSP、曲霉菌ASPERGILLUSSP、假鏈格孢NIMBYASP、交鏈孢ALTERNARIASP、擬盤多毛孢PESTALOTIOPSISSP、枝孢霉CLADOSPORIUMSP、鐮刀菌FUSARIUMSP、炭疽菌COLLETOTRICHUMSP、粉紅聚端孢THICHOTHECIUMSP、霜疫霉PERONOPHLHOFTLSP、地霉菌GEOTRICHUMSP以及擬莖點(diǎn)霉PHOMOPSISSP和酵母菌等。不同產(chǎn)地所分離到的真菌種類大至相同，各類的分離頻率有差異，但沒有規(guī)律性。采用果肉分離法，只分離到鐮刀菌FSP、粉紅聚端孢RSP、擬盤多毛孢妒SP、毛色二孢LASIODIPLODIASP和擬莖點(diǎn)霉PSP5種真菌，其中分離頻率最高的是擬莖點(diǎn)霉尸SP和毛色U孢LASIODIPLODIASP兩個屬，兩者之和超過90％。經(jīng)過致病性和形態(tài)學(xué)鑒定，這兩種真菌為龍眼擬莖點(diǎn)霉PHOMOPSISLONGANAECHI和龍眼焦腐病菌LASIODIPLODIATHEOBROMAEPATGRIFF＆MAUBL。這兩種病原也是冷藏龍眼的主要病原。不同發(fā)育階段的龍眼果實(shí)分離結(jié)果表明，龍眼擬莖點(diǎn)霉在花期即可侵染，而龍眼焦腐病菌主要是在龍眼膨大期侵染為主。2采前套袋對潛伏侵染病原菌的防治效果，經(jīng)套袋處理的龍跟果實(shí)平均發(fā)病率為20％，未套袋的對照發(fā)病率達(dá)98％。并且在套袋龍眼病果中只分離到TROSEUM和工THEOBROMAE兩種病原菌，說明龍眼果實(shí)采前套袋對于病原的侵染有很好的防效，并可減少潛伏性病原的種類和侵染機(jī)率。3龍眼焦腐病菌的生物學(xué)特性龍眼焦腐病菌菌絲生長的最適溫度為

簡介：分類號墨墨墨壘2密級洳≥J～涪博士學(xué)位論文⑧單位代碼幽學(xué)號LLQL2Q32提交日期2Q蘭生壘目壟蘭旦MOLECULARBIOLOGYOFD批P25OF彳掰而哦聊廳口C口西紗掃，萬記口NUCLEOPOLYHEDROVIRUSIVAUTHOR’SSIGNATUREN●■●JSUPERVLS0R7SSLGNATUREEXTEMALREVIEWERSEX鋤ININGCONML№ECHAI印ERSONGH曼塾GI魚旦GQQ塾G里墅Q魚墨墨Q￡SQQ魚HQ塑墮墜IY曼囟蟻EXAMIILINGCO舢ILITTEEMEMBERS基I墜GM曼塾GL旦里Q魚墨墨Q蘭H自I壘壘G墮塾＆曼墨鰱YY塑G塑叢I壘Q￡￡Q墼墨Q圣蜮I墊G墮塾IY曼堡I鯉至墜I壘塾GH墜里￡Q魚墨墨Q圣魚自I壘墜G也IY星墨量YXI墊魚墜G迎￡煦魚墨墨Q丕H自I塹G坐撾?yún)材珨?shù)DATEOFORALDEFENCE6．7．2013

簡介：分類號單位代碼10364密級學(xué)號13720066安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文紫藤葉斑病的病原鑒定及生物學(xué)特性研究IDENTIFICATIONBIOLOGICALACTERISTICSOFTHEPATHOGENOFWISTERIALEAFSPOTDISEASE研究生李凱旋指導(dǎo)教師檀根甲教授申請學(xué)位門類級別農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)名稱植物病理學(xué)研究方向植物病害生態(tài)與綠色防控所在學(xué)院植物保護(hù)學(xué)院答辯委員會主席二零一六年六月摘要紫藤〔WISTERIASINENSISSIMSSWEET〕為豆科紫藤屬落葉木質(zhì)大藤本是著名的園林環(huán)保觀賞花卉。紫藤集觀賞、醫(yī)療、環(huán)保價(jià)值于一身，具有極高的潛在研究價(jià)值。隨著紫藤種植面積的增長，自然生境下紫藤真菌性病害多有發(fā)生。尤以紫藤葉斑病發(fā)生較為普遍，嚴(yán)重影響紫藤的美觀，發(fā)病嚴(yán)重時可至全株葉片枯死，對紫藤可造成毀滅性危害。但是目前國內(nèi)外對紫藤葉斑病的研究鮮有報(bào)道。為了有效防控該病害的擴(kuò)展和蔓延，保證觀賞植物及園林產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，迫切需要對紫藤葉斑病進(jìn)行全面的調(diào)查和鑒定。本研究在安徽省霍邱縣和池州市采集有典型葉斑病的病葉，進(jìn)行病原菌的分離純化和致病性測定，對病原菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)以及分子生物學(xué)鑒定，進(jìn)而研究病原物的生物學(xué)特性和藥劑毒力，以期待為病害的防治奠定理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下1、病原菌的分離與致病性測定于2014年8月在安徽省霍邱縣和池州市采集有典型葉斑病的病葉，按常規(guī)的組織分離法進(jìn)行分離。得到2株相同的病菌，將兩株菌分別編號為ZT1和ZT2，選取菌株ZT1進(jìn)行致病性測定，結(jié)果表明無論是菌絲塊接種還是孢子懸浮液接種葉片（對葉片造成傷口前提下）均可以產(chǎn)生典型癥狀，并可以再分離得到與之相同的菌株由此可知ZT1菌株為該病害的病原菌。2、病原菌的鑒定以對病原菌產(chǎn)孢表型與孢子及菌落形態(tài)的觀察為基礎(chǔ)，對ZT1菌株的3個基因位點(diǎn)序列ITS與GPD和TEF進(jìn)行分析，經(jīng)PCR擴(kuò)增并測序并在GENBANK中BLAST后，利用DNAMAN軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果顯示與ZT1同源性最高的種中有且僅有ALTERNARIAALTERNATA在三個系統(tǒng)發(fā)育樹中同時出現(xiàn)。根據(jù)形態(tài)學(xué)的觀察結(jié)果在PCA濾紙上，25℃，12H光照和12H黑暗交替條件下，培養(yǎng)5D，產(chǎn)孢表型呈矮樹狀，在分生孢子的側(cè)面和基部產(chǎn)生15個孢子的孢子鏈；分生孢子倒棒狀、倒梨形、卵形、廣橢圓形，孢身2251813M，具有15個橫膈膜和03個縱、斜隔膜。與ALTERNARIAALTERNATA小孢子種形態(tài)一致。由此可知引起該病害的病原菌為鏈格孢菌ALTERNARIAALTERNATA（FRFR）KEISSLER，將該病害定名為紫藤葉斑病。3、病原菌的生物學(xué)特性病原菌ZT1菌絲在1035℃溫度范圍內(nèi)均能生長，最適生長溫度為28℃，致死溫度為55℃，10MIN。菌絲在PH410的條件下均可生長，菌絲生長的最適PH為6。光照利用病原菌菌絲生長，在無碳或氮源條件下均可以生長，但是在以葡萄糖和淀粉為碳源，以蛋白棟和牛肉膏為氮源時生長最好。其中氨態(tài)鹽對菌絲生長有抑制作用。分生孢子在1035℃溫度范圍內(nèi)均能夠萌發(fā)。在529℃隨著溫度的升高，孢子萌

簡介：ZHEJIANGAFUNIVERSITYDISSERTATIONFORTHEDEGREEOFMASTERSTUDIESONBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFPLNNOCOCCUSMINORMASKEHCANDIDATESHAOWEIDONGADVISERXUZHIHONG，PROFESSORSPECIALTYPLANTPROTECTIONDATEOFSUBMISSIONDECEMBER19，2015ZHEJIANGAFUNIVERSITYLIN’AN，ZHEJIANGPROVINCE，PRCHINADECEMBER19，2015摘要摘要大洋臀紋粉蚧PLANOCOCCUSMINORMASKELL是一種能夠危害多種作物的害蟲，是我國重要檢疫意義的有害生物。本文通過室內(nèi)實(shí)驗(yàn)對大洋臀紋粉蚧的形態(tài)特征、習(xí)性行為、發(fā)育起點(diǎn)溫度、有效積溫、發(fā)育歷期進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，建立了以土豆為寄主的不同溫度條件下20，23，26，29，32℃實(shí)驗(yàn)種群生命表；測定了5種常見的藥劑對大洋臀紋粉蚧的室內(nèi)毒力；此外，運(yùn)用CLIMEX軟件對大洋臀紋粉蚧開展適生性風(fēng)險(xiǎn)評估。主要結(jié)果如下1通過室內(nèi)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)得出在20～32℃溫度范圍內(nèi)，大洋臀紋粉蚧雌雄世代發(fā)育歷期最短是在29℃條件下3034D，2880D，最長是在20℃條件下5435D，5197D，且溫度與其世代發(fā)育速率的關(guān)系符合LOGISTIC模型。2通過大洋臀紋粉蚧飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)得出雌蟲世代發(fā)育起點(diǎn)溫度為1074。C，有效積溫為61015日度雄蟲世代發(fā)育起點(diǎn)溫度為852℃，有效積溫為65548日度29。C條件下，大洋臀紋粉蚧的世代存活率7733％和種群趨勢指數(shù)∽13431最高，但在17℃和35℃下，大洋臀紋粉蚧1齡若蟲生長停滯。因此，低溫和高溫均不利于大洋臀紋粉蚧種群增長。3通過室內(nèi)毒力實(shí)驗(yàn)得出10％吡蟲啉可濕性粉劑對大洋臀紋粉蚧雌成蟲防治效果最好LC50123397MG／L，毒力大小依次順序?yàn)檫料x啉啶蟲脒阿維菌素毒死蜱高效氯氰菊酯。4利用CLIMEX軟件對大洋臀紋粉蚧在我國的潛在適生區(qū)進(jìn)行分析預(yù)測，結(jié)果表明中國南方大部分省份和地區(qū)為高度適生區(qū)。關(guān)鍵詞大洋臀紋粉蚧，生物學(xué)特性，實(shí)驗(yàn)種群生命表，毒力測定，適生區(qū)。

簡介：目的檢測膜性腎病患者與健康人尿液外泌體差異蛋白，初步探索尿液外泌體蛋白質(zhì)是否存在膜性腎病的生物學(xué)標(biāo)志物。方法選取2017年10月2018年1月就診于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腎內(nèi)科，經(jīng)腎活檢確診為特發(fā)性膜性腎病患者6名，男女各3例，24H尿蛋白波動于51512896MG，EGFR波動于10771817MLMIN173M2。正常對照組9例。入選標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)組結(jié)合臨床及腎組織病理檢查，確診為特發(fā)性膜性腎病，并除外繼發(fā)性因素。正常對照組選取年齡、性別匹配的健康志愿者。排除標(biāo)準(zhǔn)年齡＜18歲或＞70歲、乙型肝炎病毒相關(guān)性腎炎、狼瘡性腎炎、藥物或毒物相關(guān)性等繼發(fā)性腎病、泌尿系統(tǒng)先天發(fā)育異常、懷孕或哺乳患者、感染患者、腫瘤、器官移植。留取24H尿標(biāo)本，低溫高速離心機(jī)離心去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)后，放于80℃冰箱冷藏，利用BCA試劑盒從人體的尿液中分離出外泌體，并通過質(zhì)譜分析法提取出能夠穩(wěn)定表達(dá)的尿外泌體。利用SPSS220軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。連續(xù)型變量均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，服從正態(tài)分布的連續(xù)性變量用（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，不服從正態(tài)分布的連續(xù)性變量采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，組間相關(guān)性比較采用回歸分析，P＜005差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果膜性腎病患者尿外泌體中纖維蛋白溶酶原PLASMINOGEN、免疫球蛋白Γ2重鏈（IMMUNOGLOBULINHEAVYCONSTANTGAMMA2）、抗凝血酶ⅢANTITHROMBINⅢ、免疫球蛋白Γ1重鏈IMMUNOGLOBULINGAMMA1HEAVYCHAIN的表達(dá)量分別是正常對照組的89倍P0013、39倍P0026、31倍P0012、20倍P0026。采用回歸分析尿外體水平與腎功能參數(shù)的相關(guān)性進(jìn)行評價(jià)。我們發(fā)現(xiàn)，外泌體纖維蛋白溶酶原的水平與24H尿蛋白、甘油三酯、白蛋白和同型半胱氨酸有顯著的相關(guān)性。ROC分析表明纖維蛋白溶酶原、免疫球蛋白Γ2重鏈、抗凝血酶Ⅲ、免疫球蛋白Γ1重鏈對IMN具有潛在的診斷價(jià)值。IMN尿外泌體中谷氨酰氨基肽酶GLUTAMYLAMINOPEPTIDASE、免疫球蛋白J鏈（IMMUNOGLOBULINJCHAIN）、Γ谷氨酰胺水解酶（GAMMAGLUTAMYLHYDROLASE）、熱休克蛋白Β1（HEATSHOCKPROTEINBETA1）、尿調(diào)節(jié)素UROMODULIN、角蛋白KERATIN的表達(dá)量分別比正常對照組降低451倍P0039、337倍P0026、283倍P0050、242倍P0026、203倍P0036、176倍P0050。ROC分析表明谷氨酰氨基肽酶、免疫球蛋白J鏈、Γ谷氨酰胺水解酶、熱休克蛋白Β1、尿調(diào)節(jié)素、角蛋白對IMN具有潛在的診斷價(jià)值。結(jié)論IMN患者尿外泌體纖維蛋白溶酶原、免疫球蛋白Γ2重鏈、抗凝血酶Ⅲ、免疫球蛋白Γ1重鏈表達(dá)明顯高于正常對照組，尿外泌體谷氨酰氨基肽酶、免疫球蛋白J鏈、Γ谷氨酰胺水解酶、熱休克蛋白Β1、尿調(diào)節(jié)素、角蛋白表達(dá)明顯低于正常對照組，對特發(fā)性膜性腎病的診斷有一定的意義。

簡介：點(diǎn)擊查看更多DOC2β與Munc13-1在神經(jīng)突觸分泌過程中相互作用的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。