簡(jiǎn)介：⑧論文作者簽名俑望指導(dǎo)教師簽名蘭薹邊論文評(píng)閱人L雙向匿名評(píng)閱人2丞囪匿名評(píng)閱人3丞囪匿名評(píng)閱人4叢自匿名評(píng)閱人5丞囪匿名評(píng)閱人6雙囪匿名答辯委員會(huì)主席鹽藎羞Z熬拯Z浙江太堂醫(yī)堂瞳附屬簋二醫(yī)睦委員L墓真』數(shù)拯Z逝江太堂醫(yī)堂瞳隘屬筮二醫(yī)暄委員2周墊鴻』熬拯Z浙江主醫(yī)藥太堂險(xiǎn)屬筮二醫(yī)瞳委員3盒鏖么數(shù)援Z塑J醫(yī)銎太堂隘屬箜二醫(yī)瞳委員4盆苤壅』熬拯』浙江太堂醫(yī)堂醫(yī)險(xiǎn)屬筮三醫(yī)睦委員5絲籩蝰Z熬拯』逝江太堂醫(yī)堂睦委員6魚益松』圭堡醫(yī)痖』浙江太堂醫(yī)堂暄隘屬筮二醫(yī)睦浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得逝鎏盤鱟或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名何望簽字日期加壓年6月Z同學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解逝姿盤堂有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)逝’江盤堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名／F弓至導(dǎo)師簽名簽字日期P／Y年，月乙同簽字同期P小年二月沙同

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多稻瘟病菌鳥苷酸激酶MoGuk1及肌苷--5’--磷酸乳酸脫氫酶MoImd4活性位點(diǎn)的生物學(xué)功能研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含獲得廣西醫(yī)科大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名諍一Y沁簽字日期跏薛夠月矽日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即在校期間論文的知識(shí)產(chǎn)權(quán)屬?gòu)V西醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存論文的電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本論文的部分或全部?jī)?nèi)容，可以采用影印、復(fù)印或其它手段保存、匯編本論文，學(xué)?？梢韵驀?guó)家有關(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。同意廣西醫(yī)科大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。保密論文在解密后遵守此規(guī)定。、／、，學(xué)位論文作者簽名毋一；主、導(dǎo)師簽字翻奄簽字日期H，S年。明矽日簽字日期新舜以月巧日目錄英文縮略詞1摘要5ABSTRACT9第一章SPARC慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定15前言151材料與方法1611材料1612方法232實(shí)驗(yàn)結(jié)果343討論38參考文獻(xiàn)40第二章SPARC基因?qū)β殉舶┝馨徒Y(jié)高轉(zhuǎn)移細(xì)胞SKOV3一PM4增殖、轉(zhuǎn)移的影響42前言421材料與方法4211材料4212方法一432實(shí)驗(yàn)結(jié)果483討論53參考文獻(xiàn)56

簡(jiǎn)介：目的考察薯蕷皂苷DIOSCIN抗肝腦缺血再灌注損傷的生物學(xué)活性并探討可能的分子作用機(jī)制。方法1在薯蕷皂苷抗肝缺血再灌注損傷HEPATICIRINJURE研究中，采用70％WISTAR大鼠肝缺血模型。預(yù)防組大鼠隨機(jī)分假手術(shù)組、模型組和高中低劑量給藥組薯蕷皂苷，60、40和20MGKG，每組10只，每天口服給予薯蕷皂苷1次，連續(xù)給藥7天治療組大鼠隨機(jī)分假手術(shù)組、模型組和給藥組薯蕷皂苷，60MGKG，每組20只，手術(shù)前2H口服給予薯蕷皂苷1次，術(shù)后每天給藥一次。檢測(cè)血清ALT、AST水平，結(jié)合組織病理學(xué)和生存率等指標(biāo)來(lái)評(píng)價(jià)薯蕷皂苷對(duì)肝缺血再灌注損傷的保護(hù)作用測(cè)定肝組織中SOD、MDA、CAT、GSHPX、GSH、NO、INOS和TNOS含量來(lái)考察薯蕷皂苷的抗氧化能力采用DAPI、TUNEL和DAB分析法考察薯蕷皂苷的抗凋亡作用采用免疫組織化學(xué)、WESTERNBLOTTING及REALTIMEPCR方法考察薯蕷皂苷對(duì)凋亡和炎癥信號(hào)通路相關(guān)蛋白和基因表達(dá)影響。2在薯蕷皂苷抗腦缺血再灌注損傷CEREBRALIRINJURE研究中，體外建立PC12細(xì)胞和原代神經(jīng)元細(xì)胞的OGDR模型，薯蕷皂苷200、100和50NGML預(yù)處理12H，用MTT法、LDH、NEUN的釋放測(cè)定來(lái)評(píng)價(jià)薯蕷皂苷對(duì)OGDR損傷細(xì)胞的保護(hù)作用體內(nèi)建立SD大鼠MCAO的腦缺血再灌注模型，預(yù)防組大鼠隨機(jī)分假手術(shù)組、模型組和薯蕷皂苷高中低劑量給藥組60、40和20MGKG，每組10只，每天口服給予薯蕷皂苷1次，連續(xù)給藥7天治療組大鼠隨機(jī)分假手術(shù)組、模型組和薯蕷皂苷高中低劑量給藥組60、40和20MGKG，每組10只，建立MCAO模型前2H口服給予薯蕷皂苷1次，術(shù)后每天給藥一次以預(yù)防組的神經(jīng)功能缺損評(píng)分、大腦TTC染色、大腦相關(guān)指數(shù)、大腦組織LDH釋放水平、組織病理學(xué)、大腦細(xì)胞標(biāo)志物NEUN、GFAP和KIR41測(cè)定和TUNEL檢測(cè)，以及治療組的神經(jīng)功能缺損評(píng)分和生存率來(lái)評(píng)價(jià)薯蕷皂苷對(duì)MCAO大鼠的腦保護(hù)作用采用WESTERNBLOTTING及REALTIMEPCR方法考察薯蕷皂苷對(duì)大腦中涉及HMGB1TLR4炎癥信號(hào)通路相關(guān)的蛋白和基因表達(dá)影響并采用HMBG1、TLR4SIRNA干擾和全基因過表達(dá)實(shí)驗(yàn)分別驗(yàn)證薯蕷皂苷是否是通過抑制HMGB1TLR4信號(hào)通路抗腦缺血再灌注損傷。結(jié)果1在抗肝缺血再灌注損傷實(shí)驗(yàn)中，預(yù)防組實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，薯蕷皂苷能顯著降低血清ALT和AST活性，減輕由肝缺血再灌注損傷導(dǎo)致的肝組織損傷治療組實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與模型組相比，薯蕷皂苷60MGKG能顯著降低不同時(shí)間點(diǎn)血清ALT和AST酶活性，提高大鼠生存率。同時(shí)，薯蕷皂苷可顯著降低MDA、INOS、TNOS、NO含量，升高GSH、GSHPX、SOD、CAT水平，改善氧化應(yīng)激，并能夠減少TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，減輕肝細(xì)胞的凋亡分子機(jī)制研究表明薯蕷皂苷能夠降低MAPKS磷酸化水平，下調(diào)CYP2E1、IL1Β、IL6、TNFΑ、ICAM1、MIP1Α、MIP2、NFΚB、AP1、COX2和HMGB1等炎癥因子的基因或蛋白表達(dá)水平，降低PARP、CASPASE9、CASPASE3、BAK、P53、FAS和FASL等凋亡蛋白或基因表達(dá)水平，上調(diào)BCL2和BCLX的蛋白表達(dá)水平。2在抗腦缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)中，體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與OGDR模型組相比，薯蕷皂苷能顯著升高PC12和原代神經(jīng)元的細(xì)胞活力，減少LDH釋放，增加原代神經(jīng)元的NEUN釋放體內(nèi)預(yù)防實(shí)驗(yàn)中，與模型組相比，薯蕷皂苷能顯著改善MCAO大鼠的大腦神經(jīng)功能缺損評(píng)分、減少TTC染色陽(yáng)性區(qū)域、大腦LDH釋放水平、大腦相關(guān)指數(shù)以及大腦組織的GFAP、KIR41和TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，增加腦組織NEUN陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)體內(nèi)治療實(shí)驗(yàn)中，與模型組相比，薯蕷皂苷可以改善MCAO大鼠的大腦神經(jīng)功能缺損評(píng)分，提高大鼠生存率。分子機(jī)制研究表明薯蕷皂苷抗腦缺血再灌注損傷是通過抑制HMGB1的核轉(zhuǎn)移，降低HMGB1蛋白表達(dá)水平，從而抑制TLR4炎癥信號(hào)通路的相關(guān)蛋白NFΚB、AP1、MAPKS、PSTAT3和炎癥因子進(jìn)一步的HMGB1、TLR4SIRNA和全基因過表達(dá)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明薯蕷皂苷抗腦缺血再灌注損傷的作用靶點(diǎn)是HMGB1TLR4信號(hào)通路。結(jié)論1薯蕷皂苷是通過調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激水平、抗炎和抗凋亡等途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)抗肝缺血再灌注損傷的生物學(xué)作用2薯蕷皂苷有較好的抗腦缺血再灌注損傷作用，這種作用是通過抑制HMGB1TLR4信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的?？傊硎氃碥赵诳垢文X缺血再灌注損傷方面具有較好的生物學(xué)活性，值得深入探索和研究。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R7352密級(jí)公開端粒酶及血清游離HER2在胃癌HER2靶向治療中的生物學(xué)意義BIOLOGICALSIGNIFICANCEOFTELOMERASEANDSERUMHER2INHER2TARGETEDTHERAPIESFORGASTRICCANCER作者姓名學(xué)科專業(yè)崔建新普通外科學(xué)導(dǎo)師陳凜答辯委員會(huì)主席論文答辯日期二。一六年五月二十四日院校地址北京市海淀區(qū)復(fù)興路28號(hào)郵政編碼100853解放軍醫(yī)學(xué)院博I‘學(xué)位論文目錄縮略詞表一1中文摘要一3英文摘要5前言8刖舌萏第一部分端粒酶活性影響拉帕替尼對(duì)HER2陽(yáng)性胃癌細(xì)胞的靶向抑制作用～14一引言14二材料和方法16三結(jié)果32四討論41五結(jié)論44參考文獻(xiàn)44第二部分端粒酶活性介導(dǎo)的細(xì)胞永生化對(duì)HER2蛋白表達(dá)的影響49一引言49二材料和方法50三結(jié)果52四討論57五結(jié)論59參考文獻(xiàn)59第三部分拉帕替尼聯(lián)合化療在胃癌中的應(yīng)用及耐藥機(jī)制探索62一引言62二材料和方法63三結(jié)果66四討論69五結(jié)論70參考文獻(xiàn)70第四部分血清游離HER2水平指示胃癌組織中HER2表達(dá)狀態(tài)可行性的系統(tǒng)綜述和META分析72一引言72

簡(jiǎn)介：大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中圖分類號(hào)密級(jí)基因X高表達(dá)對(duì)OLK細(xì)胞的生物學(xué)影響B(tài)IOLOGICALEFFECTSOFGENEXOVEREXPRESSINGONOLKCELL肖慶春計(jì)學(xué)位論文44頁(yè)表格0個(gè)插圖10幅指導(dǎo)教師董巖副教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士學(xué)位培養(yǎng)單位大連醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院學(xué)科專業(yè)口腔醫(yī)學(xué)完成時(shí)間二O一六年四月答辯委員會(huì)主席大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于請(qǐng)?jiān)谝韵孪鄳?yīng)方框內(nèi)打“√“1．保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。2．不保密時(shí)。作者簽名商京備日期Ⅵ．6年Y月百日導(dǎo)師簽名氣友日期伽L6年R月V3ET

簡(jiǎn)介：背景MICRNAS（小分子RNA，MIRNAS）是一類全長(zhǎng)約為2125個(gè)核苷酸的非編碼單鏈小RNA分子，MIRNA可以識(shí)別特定的靶MRNA，轉(zhuǎn)錄以后信使RNA可以調(diào)節(jié)基因的表達(dá)水平，從而參與調(diào)控細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化、凋亡等生命活動(dòng)。內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤為甲狀腺癌，其在惡性腫瘤中約占3％，已躍居頭頸部惡性腫瘤的首位，女性發(fā)病較多。近年來(lái)各國(guó)報(bào)道甲狀腺癌發(fā)病率的增長(zhǎng)多以PTC為主。由于PTC早期多無(wú)明顯癥狀，常常導(dǎo)致患者就診時(shí)已經(jīng)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或已侵犯周圍器官和組織。因此，探索PTC有效的治療靶點(diǎn)、尋找更安全有效的治療途徑一直是提高PTC生存率和生存質(zhì)量所亟待解決的難題。在本實(shí)驗(yàn)前期的研究中，應(yīng)用高通量的MICRNA微陣列篩選不同分期的PTC組織和癌旁正常組織中差異表達(dá)的MICRNA時(shí)發(fā)現(xiàn)，MIR146B5P在早期和中晚期PTC組織中均呈明顯高表達(dá)，同時(shí)隨著腫瘤分期的增加，其表達(dá)水平有升高的趨勢(shì)，提示其在PTC發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中起著重要作用。MIR146B位于10Q2432，與MIR146A具有高度的序列同源性。HE及SHEU等通過基因芯片技術(shù)及RTPCR方法研究發(fā)現(xiàn)MIR146B在PTC組織中過表達(dá)。KIM、XING及CHOU等發(fā)現(xiàn)MIR146B在BRAF基因突變組織中表達(dá)明顯升高，BRAF基因突變與PTC的侵襲性有關(guān)，這可能是MIR146B在PTC中過表達(dá)的一個(gè)分子機(jī)制。但目前尚未有關(guān)于MIRNA146B5P與PTC細(xì)胞生物學(xué)影響及相關(guān)機(jī)制的相關(guān)報(bào)道，通過本課題的研究，可望獲得MIR146B5P對(duì)PTC的生物學(xué)行為影響的可靠證據(jù)，為確立MIR146B5P作為PTC診斷和預(yù)后監(jiān)測(cè)的生物學(xué)指標(biāo)及治療靶點(diǎn)奠定理論基礎(chǔ)。本次實(shí)驗(yàn)通過對(duì)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC1細(xì)胞株穩(wěn)定轉(zhuǎn)染使MIR146B5P過表達(dá)，之后通過CCK8、劃痕實(shí)驗(yàn)、TRANSWELL小室侵襲實(shí)驗(yàn)以及流式細(xì)胞儀檢測(cè)對(duì)比轉(zhuǎn)染前后PTC的增殖、凋亡、周期以及遷移、侵襲能力的變化。從而探討MIR146B5P過表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌發(fā)展的關(guān)系及MIR146B5P在甲狀腺乳頭狀癌中的作用機(jī)制。目的本實(shí)驗(yàn)通過慢病毒載體構(gòu)建和慢病毒包裝并通過慢病毒侵染試驗(yàn)，使得HSAMIR146B5P在甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC1細(xì)胞株中得到穩(wěn)定高表達(dá)，這個(gè)試驗(yàn)為接下來(lái)進(jìn)一步研究MIR146B5P過表達(dá)對(duì)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC1增殖、凋亡、遷移、侵襲等生物學(xué)特性的影響打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。方法1慢性毒質(zhì)粒的構(gòu)建（1）構(gòu)建MIR146B5P過表達(dá)慢病毒質(zhì)粒（2）將過表達(dá)慢病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC1，獲取MIR146B5P穩(wěn)定過表達(dá)的細(xì)胞單克隆2MIR146B5P對(duì)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響（1）觀察MIR146B5P過表達(dá)對(duì)TPC1細(xì)胞增殖的影響CCK8法檢測(cè)MIR146B5P過表達(dá)后可以明顯促進(jìn)TPC1細(xì)胞的增殖，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的細(xì)胞數(shù)均有增加，但實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞增殖更加明顯（P（2）分析MIR146B5P過表達(dá)對(duì)TPC1細(xì)胞周期和凋亡的影響通過流式細(xì)胞儀分析技術(shù)，可以看到實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的細(xì)胞凋亡率之間有明顯差異，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率減少更為明顯。（3）研究MIR146B5P過表達(dá)對(duì)TPC1細(xì)胞遷移能力的影響劃痕實(shí)驗(yàn)觀察過表過MIR146B5P的細(xì)胞，細(xì)胞遷移能力明顯增強(qiáng)，TRANSWELL小室侵襲實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞的侵襲能力明顯增強(qiáng)。結(jié)果（1）經(jīng)慢病毒包裝侵染將MIR146B5P轉(zhuǎn)染至甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC1中，細(xì)胞數(shù)都有所增加，但轉(zhuǎn)染組的TPC1細(xì)胞增殖的更加明顯。（P（2）CCK8法和流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染MIR146B5P基因后可以明顯促進(jìn)甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞TPC1的增殖，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的TPC1細(xì)胞數(shù)都有所增加，但實(shí)驗(yàn)組的TPC1細(xì)胞數(shù)增加更加顯著。（P（3）流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率實(shí)驗(yàn)組和空載組、對(duì)照組相比較細(xì)胞凋亡減少明顯，差異顯著。（P（4）劃痕實(shí)驗(yàn)觀察轉(zhuǎn)染MIR146B5P后穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MIR146B5P中，24H、48H、72H遷移細(xì)胞數(shù)量均高于空載體組和對(duì)照組，轉(zhuǎn)染MIR146B5P后TPC1細(xì)胞的遷移細(xì)胞明顯增加（P結(jié)論經(jīng)過慢病毒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染MIR146B5P后，轉(zhuǎn)染后細(xì)胞經(jīng)過CCK8、劃痕實(shí)驗(yàn)、以及流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)TPC1細(xì)胞的增殖得到促進(jìn)，凋亡減少，遷移、侵襲能力明顯增強(qiáng)。提示在TPC1細(xì)胞中MIR146B5P與甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)展相關(guān)，MIR146B5P的過表達(dá)可以促進(jìn)TPC1細(xì)胞的異常增殖，這種作用可能是MIR146B5P通過調(diào)控某種抑制基因靶蛋白來(lái)實(shí)現(xiàn)的，抑制基因尚有待于進(jìn)一步分析和研究。

簡(jiǎn)介：流行性感冒是由甲、乙、丙3型流感病毒（INFLUENZAVIRUS，IAV）引起的急性呼吸道傳染病。由于該病經(jīng)呼吸道飛沫傳播，且流感病毒易發(fā)生抗原性變異，人群對(duì)變異株普遍易感，所以容易迅速導(dǎo)致世界性的流感大流行。加之目前禽流感在世界各國(guó)此起彼伏的暴發(fā)和流行，無(wú)疑將會(huì)增加禽流感與人流感病毒發(fā)生基因重組的機(jī)會(huì)，增加新流感病毒株出現(xiàn)的幾率由流感病毒引起下一次世界性的人類流感大流行似乎不可避免，只是時(shí)間的問題。利用動(dòng)物模型可以很好模擬IAV感染人體引發(fā)的呼吸系統(tǒng)疾病和機(jī)體免疫反應(yīng)。成功的IAV感染模型包括小鼠、大鼠、雪貂、豬和靈長(zhǎng)類猴等動(dòng)物。利用基因敲除小鼠模型可針對(duì)特定的免疫細(xì)胞因子進(jìn)行具體分析。鑒于CXCL4在炎癥、凝血等眾多生理及病理反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。機(jī)體多種免疫細(xì)胞功能的發(fā)揮，我們的工作建立CXCL4敲除小鼠感染IAV模型，對(duì)CXCL4在IAV感染過程中的生物學(xué)作用進(jìn)行探索。我們的研究發(fā)現(xiàn)CXCL4對(duì)小鼠抵抗致命H1N1病毒攻擊具有保護(hù)作用，CXCL4的缺失導(dǎo)致感染小鼠病毒清除能力減弱帶來(lái)感染后期嚴(yán)重的肺部炎癥損傷和肺水腫，造成感染后小鼠體重急劇下降和高死亡率。此外，缺失CXCL4導(dǎo)致感染初期小鼠肺灌洗液中天然免疫嗜中性粒細(xì)胞顯著減少，而單核巨噬細(xì)胞相對(duì)增加。缺失CXCL4沒有影響到感染后期小鼠T、B淋巴細(xì)胞獲得性免疫反應(yīng)。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，缺失CXCL4抑制了嗜中性粒細(xì)胞募集到感染小鼠肺組織而沒有影響骨髓內(nèi)嗜中性粒細(xì)胞的發(fā)生。綜合我們的研究結(jié)果CXCL4在流感病毒呼吸道感染中具有重要的保護(hù)性作用。CXCL4可通過促進(jìn)嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)入病毒感染肺組織來(lái)發(fā)揮抗病毒免疫效應(yīng)。

簡(jiǎn)介：河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。，，0，一_、、J研究生簽名互感導(dǎo)師簽章務(wù)蓬級(jí)鋤寒毫委葛一，’捷、隧。多，月；L目河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名互彪遢岫爭(zhēng)軍“章阿∞糾師尋中文摘要II_17F在胃癌組織中的表達(dá)及其對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響摘要目的檢測(cè)IL一17F在胃癌中的表達(dá)，探討IL一17F促進(jìn)胃癌進(jìn)展的作用機(jī)制。方法1采用RTPCR和WESTERNBLOT方法分別檢測(cè)IL一17FMRNA和蛋白在胃癌患者癌組織和癌旁對(duì)照組織中的表達(dá)，分析其與胃癌患者臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。2采用MTT法，檢測(cè)不同濃度外源性IL17F1NG／ML、10NG／ML、100NG／ML、200NG／M1對(duì)SGC7901細(xì)胞的增殖活性的影響。3用RTPCR和WESTERNBLOT方法檢測(cè)IL17FSIRNA基因沉默后SGC7901細(xì)胞中IL17F的MRNA和蛋白表達(dá)情況。4采用WESTERNBLOT分別檢測(cè)沉默IL17R基因后，IL17F作用SGC7901細(xì)胞后空載體轉(zhuǎn)染組、轉(zhuǎn)染組中細(xì)胞STAT3的表達(dá)情況；阻斷TPL2活性后，IL一17F作用SGC7901細(xì)胞后，細(xì)胞STAT3表達(dá)的情況。5采用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)和TRANSWELL侵襲實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)，IL一17R基因沉默前后和TPL2抑制劑TKI處理前后，IL17F對(duì)SGC7901細(xì)胞遷移能力和侵襲能力的影響。6采用ELISA法檢測(cè)，IL17R基因沉默前后和TPL2抑制劑TKI處理前后，IL17F對(duì)SGC7901細(xì)胞分泌IL6、IL8和VEGF的影響。結(jié)果LRTPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與癌旁對(duì)照組織相比，胃癌組織內(nèi)IL17F、VEGF和IL6MRNA表達(dá)顯著增高O628602448VS0155300286、02965O0527VS01438___00295、0455501897VS0235700695并且IL17FMRNA表達(dá)水平與VEGF和IL6MRNA表達(dá)水平明顯相關(guān)P001。2WESTERNBLOT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與癌旁對(duì)照組織相比，胃癌組織內(nèi)IL17F蛋白表達(dá)顯著增高03861士01978VSO1347圭00563P鋤05。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)號(hào)R81學(xué)校代碼學(xué)校代碼10062密級(jí)級(jí)學(xué)號(hào)號(hào)2013601087博士學(xué)位論文DOCTORALDISSERTATION論文題目論文題目篩查人群和乳腺癌患者乳腺纖維腺體類型篩查人群和乳腺癌患者乳腺纖維腺體類型分析及其與乳腺癌生物學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性分析及其與乳腺癌生物學(xué)標(biāo)志物的相關(guān)性研究研究TITLEANALYSISTHEBREASTDENSITYBETWEENSCREENINGWOMENANDBREASTCANCERPATIENTSANDANALYSISTHECORRELATIONBETWEENBREASTDENSITYANDBIOMARKERSINBREASTCANCER一級(jí)學(xué)科臨床醫(yī)學(xué)一級(jí)學(xué)科臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科影像醫(yī)學(xué)與核醫(yī)學(xué)論文作者劉靜論文作者劉靜指導(dǎo)教師張雪寧指導(dǎo)教師張雪寧教授教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二〇一五年五月學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名日期年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解天津醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，并采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學(xué)校向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文，并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)。保密，在年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密。（請(qǐng)?jiān)谙鄬?duì)應(yīng)的方框內(nèi)打“√”）學(xué)位論文作者簽名日期年月日導(dǎo)師簽名日期年月日

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R7379UDC密級(jí)重慶醫(yī)科大學(xué)重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文論文題目DAPT及阿霉素對(duì)人乳腺癌及阿霉素對(duì)人乳腺癌MDAMB231細(xì)胞生物學(xué)活性的影響細(xì)胞生物學(xué)活性的影響作者姓名李志路李志路申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士碩士學(xué)科、專業(yè)名稱外科學(xué)外科學(xué)論文答辯年月2015年5月2015年5月指導(dǎo)教師姓名（職稱、單位名稱）劉勝春劉勝春教授教授重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌乳腺外科重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌乳腺外科重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文1英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照英文縮寫英文縮寫英文全稱英文全稱中文全稱中文全稱ΜGMICROGRAM微克RPMREVOLUTIONSPERMINUTE每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)PRPROGESTERONERECEPT孕激素PBSPHOSPHATEBUFFEREDSOLUTION磷酸鹽緩沖液PAGEPOLYACRYLAEGELELECTROPHESIS聚丙烯酰胺凝膠電泳ODOPTICDENSITY光密度MMMILLIMETER毫米MLMILLILITER毫升MINMINUTE分鐘HRPHSERADISHPEROXIDASE辣根過氧化物酶HHOUR小時(shí)FCMFLOWCYTOMETRY流式細(xì)胞術(shù)FBSFETALBOVINESERUM胎牛血清EGFREPIDERMALGROWTHFACTRECEPT表皮生長(zhǎng)因子受體DNADEOXYRIBONUCLEICACID脫氧核糖核酸BCL2BCELLLYMPHOMAGENE2BCL2基因DOXDOXUBICIN阿霉素CCK8CELLCOUNTINGKIT8細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒HER2HUMANEPIDERMALGROWTHFACTRECEPT2表皮生長(zhǎng)因子受體2TNBCTRIPLENEGATIVEBREASTCANCER三陰性乳腺癌GSIGAMMASECRETASEINHIBITΓ分泌酶抑制劑DMSODIMETHYLSULPHOXIDE二甲基亞砜ECLENHANCEDCHEMILUMINESCENCE增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光PIPROPIDIUMIODIDE碘化丙啶FITCFLUESCEINISOTHIOCYANATEISOMER異硫氰酸熒光素

簡(jiǎn)介：學(xué)校代碼10459學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?01312443384密級(jí)公開碩士學(xué)位論文應(yīng)用CRISPRCAS9技術(shù)敲除食管鱗癌EC109細(xì)胞系DMRT2基因及其生物學(xué)功能的初步探究作者姓名王圓導(dǎo)師姓名秦艷茹教授學(xué)科門類醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱腫瘤學(xué)培養(yǎng)院系鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院完成時(shí)間2016年5月學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明的引用內(nèi)容外，本論文不包括其他任何個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的科研成果。對(duì)本論文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體均在文中以明確的方式表明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者日期年月日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵循此規(guī)定。學(xué)位論文作者日期年月

簡(jiǎn)介：授予單位代碼授予單位代碼10089學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)枌W(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)?0133227中國(guó)圖書分類號(hào)中國(guó)圖書分類號(hào)R7398碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文專業(yè)專業(yè)學(xué)位學(xué)位MIRNA222對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株OSCC15生物學(xué)功能影生物學(xué)功能影響的研究的研究研究生生趙江輝趙江輝導(dǎo)師師陳彥平陳彥平教授教授專業(yè)業(yè)口腔醫(yī)學(xué)口腔醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)院二級(jí)學(xué)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2012016年3月HEBEIMEDICALUNIVERSITY目錄中文摘要1英文摘要4英文縮寫8研究論文MIRNA222對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞株OSCC15生物學(xué)功能影響的研究前言9材料與方法10結(jié)果14附圖16附表19討論20結(jié)論24參考文獻(xiàn)25綜述口腔癌中MIRNA的研究進(jìn)展28致謝38個(gè)人簡(jiǎn)歷39

簡(jiǎn)介：第一章人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞的獲取、培養(yǎng)及鑒定目的建立一種簡(jiǎn)單可行的人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞的獲取、分離、培養(yǎng)方法。方法通過人嗅黏膜組織貼壁法體外分離、培養(yǎng)嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞，在倒插顯微鏡下，觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)及觀察其細(xì)胞表面標(biāo)記物再在體外誘導(dǎo)其向脂肪細(xì)胞和骨細(xì)胞，應(yīng)用油紅O染色、茜素紅染色分別鑒定脂肪組織脂滴和骨組織鈣鹽沉積。結(jié)果體外培養(yǎng)的人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞在形態(tài)上以梭形為主，細(xì)胞排列呈放射狀，細(xì)胞增殖迅速。間充質(zhì)干細(xì)胞陽(yáng)性標(biāo)記物CD73、CD90、CD105人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞高表達(dá)，造血干細(xì)胞標(biāo)記物CD34、CD45不表達(dá)。在特定條件下可定向誘導(dǎo)分化為脂肪組織、骨組織。免疫熒光染色提示，所培養(yǎng)的人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)NESTIN和STRO1。結(jié)論人嗅黏膜組織塊貼壁培養(yǎng)法是一種操作簡(jiǎn)便的有效的方法，通過此方法培養(yǎng)出的細(xì)胞符合間充質(zhì)干細(xì)胞的一般鑒定標(biāo)準(zhǔn)，表達(dá)嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)志物NESTIN、STRO1。第二章人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性研究目的全面了解人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性。方法1人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞，分離、純化、培養(yǎng)、傳代（方法同第一章）2透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡下觀察其超微結(jié)構(gòu)3加入神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基（DMEMF12培養(yǎng)基2％B2720ΜGL的表皮生長(zhǎng)因子20ΜGL的堿性成纖維生長(zhǎng)因子）觀察嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞成球特性4為進(jìn)一步了解其生長(zhǎng)特性，采用MTT法測(cè)定并繪制出嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線5流式細(xì)胞儀測(cè)定并分析其細(xì)胞周期6在體外誘導(dǎo)其向神經(jīng)元分化，應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)染色、WESTERNBLOT、電鏡及膜片鉗等方法鑒定誘導(dǎo)后的細(xì)胞神經(jīng)元Β微管蛋白ΒTUBULIN、膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP和神經(jīng)微管相關(guān)蛋白2MAP2的表達(dá)，觀察分化后的細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)及細(xì)胞電生理特性。結(jié)果嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)顯示細(xì)胞表面有許多的微絨毛，可有兩種不同的細(xì)胞形態(tài)具有成球特性且表達(dá)NESTIN，生長(zhǎng)曲線結(jié)果提示人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞符合干細(xì)胞正常生長(zhǎng)特征且細(xì)胞增殖較活躍流式細(xì)胞儀進(jìn)行細(xì)胞周期檢測(cè)表明，嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞有80％以上細(xì)胞處于GOG1期神經(jīng)元特定誘導(dǎo)后，嗅黏膜間充質(zhì)于細(xì)胞高表達(dá)神經(jīng)元標(biāo)記物MAP2、TUBULIN，具有尼氏小體和鉀離子通道。結(jié)論人嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞具有間充質(zhì)干細(xì)胞的一般生物學(xué)特性，在特定條件下嗅黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞還可誘導(dǎo)為有部分成熟神經(jīng)元結(jié)構(gòu)和電生理活性的神經(jīng)元，可作為神經(jīng)修復(fù)的理想種子細(xì)胞。

簡(jiǎn)介：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BONEMARROWDERIVEDMESENCHYMALSTEMCELLSBMSCS）是一類具有多向分化潛能（MULTIPLEDIFFERENTIATIONPOTENTIALITY）的成體干細(xì)胞，能向成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞以及肌細(xì)胞等方向進(jìn)行分化。因其具有取材方便、增殖快速、低免疫原反應(yīng)、能夠分化為多種細(xì)胞、分泌多種生物活性因子以及向損傷組織遷移等優(yōu)點(diǎn)，目前成為細(xì)胞、基因治療以及組織工程等領(lǐng)域方面的研究熱點(diǎn)。在細(xì)胞治療和組織修復(fù)的研究中，BMSCS的誘導(dǎo)分化顯得尤為重要。BMSCS處于復(fù)雜的流體微環(huán)境中，許多研究證明力學(xué)因素在BMSCS的分化過程中起著重要的作用。力生長(zhǎng)因子（MECHANOGROWTHFACTMGF）是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的組織受損或受力學(xué)刺激過程中表達(dá)的一種胰島素樣生長(zhǎng)因子（INSULINLIKEGROWTHFACTIGF1）選擇性剪接變體。實(shí)驗(yàn)證明MGF及MGFE結(jié)構(gòu)域24肽（羧基端24肽，MGFE）在保護(hù)受損組織和細(xì)胞、促進(jìn)損傷修復(fù)方面起重要的作用。目前，已有關(guān)于MGF在細(xì)胞分化方面的研究，但MGF在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（HBMSCS）的分化過程中起著怎樣的作用尚不清楚。本文首先研究了MGFE對(duì)HBMSCS增殖和遷移的影響，在此基礎(chǔ)上著重研究MGF及MGFE對(duì)HBMSCS分化的影響，繼而研究何種因素在MGFE誘導(dǎo)HBMSCS的分化過程中起主要調(diào)控作用。本文的主要工作和研究結(jié)果如下①M(fèi)GFE對(duì)HBMSCS增殖和遷移的影響首先，通過可控的FX4000T細(xì)胞應(yīng)力加載系統(tǒng)對(duì)HBMSCS施加12％，1HZ的等雙軸周期性力學(xué)刺激，利用REALTIMERTPCR（REALTIMEREVERSETRANION–POLYMERASECHAINREACTION）技術(shù)檢測(cè)MGFE的表達(dá)。結(jié)果顯示，力學(xué)加載并未對(duì)MGFE基因的表達(dá)產(chǎn)生影響。隨后，檢測(cè)外源性添加MGFE對(duì)HBMSCS細(xì)胞增殖和遷移的影響。結(jié)果顯示MGFE對(duì)細(xì)胞的增殖速率具有一定的延緩作用。TRANSWELL和創(chuàng)傷愈合實(shí)驗(yàn)檢測(cè)顯示25NGML和50NGML的MGFE能明顯促進(jìn)細(xì)胞的遷移，100NGML的MGFE與對(duì)照組相比細(xì)胞的遷移沒有明顯變化。RTPCR與WESTERNBLOT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示MGF能促進(jìn)環(huán)氧合酶2（CYCLOOXYGENASE2COX2）MRNA和蛋白的表達(dá)，COX2抑制劑NS398能延緩MGF誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移速率，說明MGF可能通過誘導(dǎo)COX2的表達(dá)促進(jìn)HBMSCS的遷移。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明力學(xué)加載并未對(duì)HBMSCS中MGF的表達(dá)產(chǎn)生影響；外源性添加MGFE能促進(jìn)細(xì)胞的遷移，延緩細(xì)胞的增殖速率。②MGFE對(duì)HBMSCS向成骨、成脂肪及成軟骨方向分化的影響為研究MGFE對(duì)HBMSCS分化的作用，分別配制成骨、成脂肪及成軟骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基并作為對(duì)照組，以加入20NGMLMGFE的誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基為實(shí)驗(yàn)組，分別進(jìn)行了成骨、成脂肪及成軟骨方向分化的檢測(cè)。培養(yǎng)過程中誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基每三天更換一次，MGFE每天添加一次。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下1）通過堿性磷酸酶（ALKALINEPHOSPHATASEALP）活性檢測(cè)，ALP染色和茜素紅染色（ALIZARINREDSSTAINING）研究了MGFE在HBMSCS向成骨分化中的作用。2）通過油紅O（OILREDO）染色以及RTPCR技術(shù)研究了MGFE在HBMSCS向成脂肪分化中的作用。3）通過免疫熒光染色及酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAY，ELISA）技術(shù)研究MGFE在HBMSCS向成軟骨方向分化中的作用。以上實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果表明分別向成骨、成脂肪、成軟骨分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基中添加MGFE能顯著促進(jìn)HBMSCS向成骨、成脂肪、成軟骨方向分化，這為后續(xù)的研究提供了基礎(chǔ)依據(jù)。③過表達(dá)MGF對(duì)HBMSCS向成骨及成脂肪方向分化的影響為進(jìn)一步研究MGF在HBMSCS分化中的作用，由INVITROGEN公司構(gòu)建含有MGF基因的質(zhì)粒，轉(zhuǎn)入大腸桿菌中擴(kuò)增，隨后轉(zhuǎn)染到HBMSCS中。將轉(zhuǎn)染MGF基因的HBMSCS分別在成骨分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基和成脂肪分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以空白質(zhì)粒為對(duì)照，分別進(jìn)行茜素紅和油紅O組織化學(xué)染色。RTPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后的HBMSCS中MGF的表達(dá)明顯升高。成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)7天后，茜素紅染色顯示誘導(dǎo)后的細(xì)胞產(chǎn)生大量鈣沉積；成脂肪誘導(dǎo)分化培養(yǎng)7天后，油紅O染色結(jié)果顯示誘導(dǎo)后的細(xì)胞含有較多的脂肪油滴。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明MGF轉(zhuǎn)染后的HBMSCS分別在成骨、成脂肪分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)后其向成骨、成脂肪細(xì)胞分化的能力明顯增強(qiáng)。④MGFE通過延遲細(xì)胞周期促進(jìn)HBMSCS的分化為研究MGFE誘導(dǎo)HBMSCS分化的調(diào)節(jié)機(jī)制，利用流式細(xì)胞技術(shù)（FLOWCYTOMETRYASSAY）檢測(cè)MGFE對(duì)細(xì)胞周期的影響，并通過RTPCR技術(shù)檢測(cè)相關(guān)周期蛋白CYCLINE和CYCLINDEPENDENTKINASE（CDK2）的表達(dá)情況。流式檢測(cè)結(jié)果顯示生長(zhǎng)培養(yǎng)基中添加MGFE24小時(shí)后，G1期細(xì)胞數(shù)量明顯增加，說明MGFE將細(xì)胞周期阻滯在G1期，G1期時(shí)間延長(zhǎng)。RTPCR結(jié)果顯示MGFE處理24小時(shí)后細(xì)胞周期蛋白CYCLINE、CDK2MRNA表達(dá)水平明顯下降。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明MGFE可能通過減少細(xì)胞周期蛋白CYCLINE、CDK2的表達(dá)，將細(xì)胞周期阻滯在G1期，從而向有利于細(xì)胞分化的方向發(fā)展。綜上所述，本文研究了周期性力刺激對(duì)HBMSCS中MGF表達(dá)的影響，MGFE對(duì)細(xì)胞增殖、遷移的影響，并著重研究了MGF在HBMSCS分化中的作用。結(jié)果表明MGF能促進(jìn)HBMSCS的遷移，并通過延遲細(xì)胞周期促進(jìn)HBMSCS的分化。這為MGF在細(xì)胞治療和組織工程中的應(yīng)用提供了一定的理論依據(jù)。