簡介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文MIR150在結(jié)直腸癌中的生物學(xué)作用及分子機制研究學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（普外科）作者姓名馮君蘭導(dǎo)師姓名汪昱教授研究方向結(jié)直腸腫瘤申請學(xué)位級別碩士研究生學(xué)號9117009061培養(yǎng)單位上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院關(guān)鍵詞大腸癌、MIR150、CMYB、分子資助基金項目國家科技重大新藥創(chuàng)制專項子課題2013ZX09103003016答辯日期2015年10月21日上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日

簡介：上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文人骨髓間充質(zhì)干細胞通過人骨髓間充質(zhì)干細胞通過SDF1ΑCXCR4軸調(diào)控胃癌軸調(diào)控胃癌KATOIII細胞生物學(xué)特性的研究細胞生物學(xué)特性的研究專業(yè)外科學(xué)（科學(xué)學(xué)位）碩士生王嘉研究方向胃腸腫瘤外科及基礎(chǔ)研究申請學(xué)位級別碩士導(dǎo)師姜波健教授培養(yǎng)單位上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院（北院）上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第三人民醫(yī)院學(xué)號1127269603基金資助項目上海市衛(wèi)生局科研課題基金20134393；上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院科技基金13XJ0282015年4月上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期2015年4月28日

簡介：博士學(xué)位論文APL新融合基因TBLRL．RARA的致白血病作用及其治療策略的研究西達本胺對急性早幼粒白血病細胞生物學(xué)功能的影響及機制研究所院血液學(xué)研究所姓名李壽蕓指導(dǎo)教師王建祥教授導(dǎo)師小組王敏教授、饒青教授學(xué)科專業(yè)內(nèi)科學(xué)研究方向白血病發(fā)病機制完成時間2016年5月中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院清華大學(xué)醫(yī)學(xué)部博士學(xué)位論文第一部分APL新融合基因TBLRL．RARA的致白血病作用及其治療策略的研究3

簡介：衣原體是一類嚴格真核細胞內(nèi)寄生、具有獨特發(fā)育周期的原核細胞型微生物，可引起人和動物多種疾病，疾病表現(xiàn)復(fù)雜。對人致病的衣原體有沙眼衣原體、肺炎衣原體和鸚鵡熱衣原體等。衣原體感染已成為當今世界具有挑戰(zhàn)性的重大公共衛(wèi)生問題和社會問題，對健康和經(jīng)濟有著巨大的影響。為有效應(yīng)對衣原體感染給公共衛(wèi)生所帶來的挑戰(zhàn)，加強衣原體基礎(chǔ)研究，深入研究其致病機制、研制衣原體疫苗成為世界范圍內(nèi)衣原體研究學(xué)者的重要研究課題。目前，鼠衣原體作為一種模式菌已廣泛應(yīng)用于人類病原性衣原體致病機制研究和衣原體疫苗研究中。一、鼠衣原體質(zhì)粒缺失株的構(gòu)建和鑒定背景與目的衣原體質(zhì)粒在衣原體致病中發(fā)揮重要作用，利用質(zhì)粒缺失菌株和質(zhì)粒攜帶菌株進行比較研究，可以觀察研究質(zhì)粒的遺傳學(xué)功能，此外質(zhì)粒缺失菌株還可以用作基因工程菌，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究；因此構(gòu)建和鑒定衣原體質(zhì)粒缺失株具有重要意義。方法采用新生霉素處理鼠衣原體、噬斑形成實驗結(jié)合以PGP3為檢測標志的間接免疫熒光分析方法篩選鼠衣原體質(zhì)粒缺失株，進一步采用PCR檢測質(zhì)?；?，碘染色觀察糖原聚集現(xiàn)象，動物試驗檢測其致病性。結(jié)果在96孔微孔板中進行的篩選試驗中，篩選到5個質(zhì)粒缺失菌株。通過PCR分析證實這些菌株缺乏質(zhì)粒基因，此外，在上述菌株感染的HELA細胞中沒有發(fā)現(xiàn)GLGA蛋白的分泌現(xiàn)象，也無糖原聚集。質(zhì)粒缺失菌株CMUT3經(jīng)陰道感染C3HHEJ小鼠未見誘導(dǎo)小鼠輸卵管積水。結(jié)論成功構(gòu)建了鼠衣原體質(zhì)粒缺失株。二、體外傳代對鼠衣原體生物學(xué)特性和致病性的影響背景與目的盡管鼠衣原體在實驗室已傳代數(shù)十年，有關(guān)傳代選擇作用于鼠衣原體的結(jié)局尚未見報道。最近，我們對鼠衣原體質(zhì)粒缺失株CMUT3和野生型菌株進行傳代培養(yǎng)，采用“無輔助感染和輔助感染”交替的方式進行體外傳代培養(yǎng)，然后觀察傳代的菌株感染細胞時對離心輔助感染因素的依賴性；傳代的CMG28和CMUT3G40在感染HELA細胞時對離心這種輔助感染因素的依賴性降低。C3HHEJ小鼠經(jīng)陰道感染鼠衣原體野生型菌株CMG0和傳代的CMG28，陰道感染CMG28后引起的輸卵管積水病理變化與CMG0感染組相比，明顯降低。因此，傳代的鼠衣原體在體內(nèi)的致病性與體外細胞感染特性之間存在一個較大的差異。本實驗的目的就是來探尋這種矛盾后面存在的可能機制。方法體外傳代培養(yǎng)鼠衣原體野生型菌株和質(zhì)粒缺失株至一定代數(shù)，提取基因組DNA，通過下一代測序技術(shù)對CMG0、CMG28、CMUT3G5和CMUT3G40進行全基因組測序，比較分析基因組數(shù)據(jù)；同時動物試驗檢測鼠衣原體的致病性。結(jié)果通過對CMG0和CMG28進行深度基因組分析，CMG28和CMG0的基因組在3個開放讀碼框中存在顯著差異TC0237（Q117E）替代突變（CMG28100％；CMG00），TC0668（G216）無義突變（64VS0）和TC0668（G322R）替代突變（26VS0），和多個的TC0412突變多態(tài)性。吸附試驗表明CMG28對細胞的吸附能力增強。CMG28和CMG0經(jīng)陰道感染C3HHEJ小鼠后，二者在小鼠體內(nèi)有著相似的上行感染能力，而CMG28感染組致輸卵管積水發(fā)生率明顯降低；BIOPLEX200系統(tǒng)檢測顯示感染CMG28后小鼠輸卵管組織中炎性細胞因子顯著減少，這與輸卵管炎癥細胞浸潤顯著減少相關(guān)。TC0237（Q117E）是CMG28和CMUT3G40共有的突變，提示TC0237（Q117E）與鼠衣原體體外吸附能力增強相關(guān)。結(jié)論鼠衣原體TC0237（Q117E）突變增強體外吸附能力。鼠衣原體TC0237（Q117E）TC0668（G322R）突變與鼠衣原體的致病性減弱相關(guān)聯(lián)。

簡介：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文博士學(xué)位論文專業(yè)學(xué)位學(xué)校代碼10023學(xué)號B2014001038窄帶成像聯(lián)合放大內(nèi)鏡對早期胃癌篩查的診斷價值和早期胃癌LNCRNA表達譜分析及其生物學(xué)功能探索所院姓名指導(dǎo)教師導(dǎo)師小組學(xué)科專業(yè)研究方向完成日期北京協(xié)和醫(yī)院于航陸星華程書鈞、楊愛明、費貴軍、馮林內(nèi)科學(xué)消化病學(xué)早期胃癌的診斷及癌變機制二零一六年四月中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文圖索引圖1納入表達譜芯片實驗的組織RNA樣品質(zhì)量33圖2火山圖篩選早期胃癌患者病變組織與癌旁慢性非萎縮性胃炎組織的差異基因34圖3基于差異表達的前100位基因?qū)υ缙谖赴┎∽兘M織和癌旁組織的非監(jiān)督聚類分析36圖4基于差異表達的前72位LNCRNA基因?qū)υ缙谖赴┎∽兘M織和癌旁組織的非監(jiān)督聚類分析41圖5獨立樣本組織中4種LNCRNA的相對含量43圖6不同細胞株中2種LNCRNA的相對含量S6圖7SIRNA干擾LOC389332、UCAL的干擾效率S7圖8LOC389332、UCAL沉默表達可抑制HGC27細胞的增殖一59圖9LOC389332、UCAL沉默表達可抑制HGC27細胞的遷移鏡下60圖10LOC389332、UCAL沉默表達可抑制HGC27細胞的遷移遷移指數(shù)。61圖11納入表達譜芯片試驗的細胞RNA樣品質(zhì)量62

簡介：骨科術(shù)后植入物部位感染是最常見的并發(fā)癥之一，文獻報道，骨折內(nèi)固定與人假體置換后的感染率分別為5％20％和05％2％1，植入物感染不僅導(dǎo)致患者術(shù)后功能恢復(fù)較差，而且延長了患者的住院時間，增加了住院花費及再入院率。雖然目前無菌操作及抗生素的應(yīng)用及不斷發(fā)展，植入物周圍感染仍然面臨著嚴峻的考驗。目前研究2表明內(nèi)固定物周圍一旦感染，細菌粘附在材料表面或骨與材料界面定植會引發(fā)感染的持續(xù)存在，一旦細菌定植之后，會在材料表面形成一層生物膜，這層生物膜可以防止細菌免于人類防御系統(tǒng)的攻擊，因此，傳統(tǒng)的全身抗生素應(yīng)用很難治愈這種植入物周圍的感染，唯一有效的治療方法是取出植入物徹底清創(chuàng)，最終導(dǎo)致內(nèi)固定穩(wěn)定喪失給患者造成更大的痛苦和經(jīng)濟負擔(dān)3。因此，研究和開發(fā)一種新型抗菌骨科植入材料已經(jīng)成為當務(wù)之急。鎂作為一種新型的生物可降解金屬材料，具有較高的比強度和比剛度，適宜的密度及力學(xué)性能，并且比傳統(tǒng)植入材料更加接近骨骼的彈性模量，能避免二次手術(shù)及有效緩解應(yīng)力遮擋效應(yīng)等優(yōu)點4，具有廣泛的醫(yī)用價值。但由于鎂在機體內(nèi)降解速率過快，難以維持穩(wěn)固效果，并在腐蝕過程中產(chǎn)生大量的氫氣，導(dǎo)致其臨床應(yīng)用受限5。合金化可顯著提高鎂合金的耐蝕性能，是目前醫(yī)用鎂合金應(yīng)用研究的重點6，但一些元素對人體是有害的7，如鋁對神經(jīng)元有害，與癡呆、阿爾茲海默病有關(guān)鐠、鈰、釔等稀土元素有肝毒性，鋯和鈰有細胞毒性，鋰有潛在的致畸作用?；诒本┐髮W(xué)工學(xué)院鄭玉峰教授前期大量的體內(nèi)、體外研究數(shù)據(jù)表明，鎂鈣合金MG10WT％CAALLOY具有良好的生物相容性和良好的抗腐蝕性能，是較為理想的鎂合金材料，但其動物實驗表明，由于其降解速率仍然較快，無法維持足夠時長的機械強度。鍶元素是人體必需的、無毒性的微量元素之一，可促進成骨細胞增殖、分化和抑制破骨細胞活性，并且可以明顯改善鎂的晶粒大小從而提高其耐腐蝕性能8，9。此外，有關(guān)文獻9表明適量比例的CA和SR元素加入純鎂中可以很好的改善鎂晶粒大小從而提高整體的機械性能，BERGLUND等10證實三元鎂合金中，MG10CA05SR顯示出最佳的抗腐蝕性能，與MG10CA相比，有著更加優(yōu)越的耐腐蝕性及機械性能，而且具有良好的生物相容性。目前鎂合金研究大都集中材料性能及生物成骨性上。然而，面對臨床上骨科內(nèi)固定植入物感染日趨嚴峻的形勢，研究和開發(fā)具有抗菌性能的可降解鎂合金植入材料具有很實際的意義。鋅是人體必需微量元素之一，在機體內(nèi)幾乎參與所有生理代謝過程，鋅除了在多種金屬酶、轉(zhuǎn)錄因子及其他蛋白中起著催化或構(gòu)建作用外，還以神經(jīng)遞質(zhì)或調(diào)質(zhì)樣的形式發(fā)揮其功能11，12。與此同時，有關(guān)研究12，13表明鋅具有良好的抗菌性能，而且同時能夠促進成骨和提高合金耐腐蝕性能和機械強度。因而，我們提出將微量的鋅元素添加到三元MG1CA05SR合金材料中，設(shè)計出四種新型的MG1CA05SRXWT％ZNX0，2，4，6四元合金材料，希望既能提高合金的耐腐蝕性能，又能發(fā)揮良好的抗菌性能。目的體外條件下觀察四種新型鎂合金材料對細胞生長、增殖及活力的影響，初步評價材料生物學(xué)性能，驗證其作為一種新型醫(yī)用可降解金屬材料的安全性及有效性，隨后通過直接和間接抗菌法探討四種鎂合金體外抗菌性能，為后期動物實驗及臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法1材料的表征通過電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀ICPAES分析不同鎂合金材料的化學(xué)組成，并測定浸提液中離子溶度通過掃描電鏡觀察材料的表面形貌能譜分析儀及X線衍射儀檢測材料晶界的組成及化學(xué)成分通過PHMETERSARTIUS，PB10和MICROSAMPLEOSMOMETERFISKE210分別測定HANKS液和PBS緩沖液材料浸提液的PH值及滲透壓通過自制設(shè)備測定HANKS液中四種鎂合金材料氫氣釋放率，綜合評價和比較四種鎂合金材料耐腐蝕性能及機械性能。2生物相容性試驗按照IS01099312標準試樣表面積浸體介質(zhì)125CM2ML分別制備四種鎂合金浸提液，空白對照組TI6AL4V采用含10％FBS的ΑMEM培養(yǎng)基浸提，進行培養(yǎng)細胞。倒置顯微鏡觀察各種浸提液培養(yǎng)的細胞形態(tài)采用LDH實驗評價四種鎂合金材料對細胞的毒性MTT法檢測四種材料對細胞相對增殖率的影響鈣黃綠素染色評價不同材料浸提液對活死細胞比例的影響，根據(jù)上述結(jié)果綜合評價四種鎂合金材料的生物細胞安全性，并進行對比分析。3抗菌性能采用間接接觸抗菌法法評價四種鎂合金材料浸提液對金黃色葡萄球菌的抗菌性能，并根據(jù)不同時段浸提液對細菌活性的影響繪制抗菌曲線直接接觸抗菌法直接評價材料對金黃色葡萄球菌的抗菌性能細菌鈣黃綠素PI染色法觀察不同鎂合金材料表面活死細菌數(shù)目DAPI染色法及電鏡評價不同材料表面細菌粘附性能及數(shù)目、形態(tài)的差異，綜合評估和對比四種鎂合金材料對金黃色葡萄球菌的抗菌性能。結(jié)果11材料的表征111通過ICPAES分析得出四種材料的成分和元素含量基本為MG10WT％05SRXWT％ZNX0，2，4，6四種合金材料，與我們理想設(shè)計時的基本一致相對于MG1CA05SR浸提液中，含ZN鎂合金組浸提液中鎂離子較高并且隨著ZN離子溶度呈正相關(guān)各組材料浸提液中鈣離子溶度基本相同MG1CA05SR4ZN中鍶離子溶度最高，其他幾組浸提液中鍶離子溶度基本相同鋅離子溶度與材料中鋅含量呈梯度增加。112電子掃描電鏡顯示隨著鎂合金中鋅元素含量的不斷增加，合金的晶粒不斷細化，合金的晶界不斷從斷續(xù)狀向連續(xù)的網(wǎng)狀變化，且合金的晶界同時會發(fā)生粗化形成片狀化現(xiàn)象。能譜分析儀可見鎂鈣鍶鋅合金的晶界內(nèi)由大量的CA和ZN組成，說明鈣鋅主要以以第二相的形式存在于晶界內(nèi)。113XRD分析儀得出四種鎂合金主要由MG2CA，CAZN3，CA2MG5ZN13，CA2MG6ZN3，CA2MG6ZN3，MG17SR2。隨著ZN含量的增加，第二相中CA2MG6ZN3的含量也隨之增多。114PH分析儀及MICROSAMPLEOSMOMETERFISKE210檢測其浸提液的PH值和滲透壓結(jié)果HANKS液中，隨著浸泡時間的延長，四組鎂鈣鍶鋅合金浸提液PH值隨著浸提時間的增加逐漸升高，含鋅的三種鎂合金浸提液PH最后趨于平衡（PH值均在8751075），而在整個浸泡實驗中MG1CA05SR合金材料浸提液組PH始終呈上升趨勢，未見明顯平穩(wěn)趨勢。四種材料PBS浸提液，稀釋后用于抗菌實驗的共培養(yǎng)液，除了MG1CA05SR組PH有統(tǒng)計學(xué)差異外，其他組PH和滲透壓沒有明顯的統(tǒng)計學(xué)差異，但各組數(shù)值均在維持細菌活性的理想范圍內(nèi)。115浸泡實驗和釋氫實驗表明添加鋅后的鎂合金材料的耐腐蝕性能和機械性能都有所提高。12材料的生物相容性121LDH細胞活力檢測結(jié)果顯示與對照組相比，不同含鋅量的鎂合金材料組浸提液與MC3T3E1細胞共培養(yǎng)24H后，細胞活力未見明顯差異。122MTT結(jié)果顯示，與對照組相比，四種鎂合金材料浸提液組與MC3T3E1細胞共同培養(yǎng)2、4天后，各組之間未見明顯差異，符合0級標準培養(yǎng)6天后，四種鎂合金材料組細胞增值率有所下降，MG1CA05SR6ZN、MG1CA05SR與對照組間顯示出統(tǒng)計學(xué)差異，但各組毒性都處于01級之間。123鈣黃率素染色后倒置熒光顯微鏡下觀察四種材料浸提液培養(yǎng)的細胞，貼壁良好，呈正常生長，細胞形態(tài)呈梭形，未見明顯細胞溶解及紅染死細胞等。13材料抗菌性能131不同時間點材料浸提液與細菌共培養(yǎng)24小時后涂板結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著浸提時間的增加，含ZN鎂合金材料的抗菌性能逐漸增強。72小時后共培養(yǎng)液中，含ZN的鎂合金材料的抗菌率基本接近100％，其中抗菌性能的強弱與鎂合金中ZN含量呈正相關(guān)。不含ZN鎂合金材料組也顯示出微弱的抗菌性能，但是整個過程中抗菌性能未見明顯變化。132材料與細菌共培養(yǎng)6小時后24小時涂板結(jié)果顯示四種鎂合金材料表面對細菌皆有很強的抗菌性能鈣黃綠素染色結(jié)果顯示共培養(yǎng)液中鎂合金材料表面的細菌幾乎死亡DAPI實驗表明材料表面對細菌的抗粘附性與時間和ZN含量呈正相關(guān)電鏡結(jié)果表明與材料共培養(yǎng)后細菌形態(tài)幾乎沒有改變，但數(shù)目相對于對照組明顯下降。結(jié)論1四種鎂合金材料均由MG2CA，CAZN3，CA2MG5ZN13，CA2MG6ZN3，CA2MG6ZN3，MG17SR這些化合物組成，但隨著材料中ZN含量的增加，其CA2MG6ZN3的含量逐漸增加，材料表面的晶粒大小明顯細化2與三元MG1CA05SR相比，含ZN鎂合金材料組抗腐蝕性能得到明顯提高3四種鎂合金材料皆可通過細胞毒性評價，具有良好的生物相容性4四種鎂合金材料皆具有明顯的抗菌性能，其中含鋅鎂合金顯示出更強的抗菌性能并且與鋅含量呈正相關(guān)。5該系類新型鎂鈣鍶鋅合金體內(nèi)試驗本課題尚未涉及，因而其能否成為一種新型可降解抗菌內(nèi)植入材料有待后期實驗進一步驗證。

簡介：目的1探討PRPS2表達與人睪丸組織學(xué)類型的關(guān)系及其意義。2探討PRPS2表達對生精細胞生物學(xué)功能的影響。3探討PRPS2表達對睪丸精子發(fā)生過程的影響。4探討PRPS2參與精子發(fā)生過程的機制。方法1免疫組化檢測PRPS2表達與睪丸生精功能的關(guān)系收集了163例穿刺活檢的睪丸組織標本，病理診斷包括生精功能正常60例，生精功能不良103例。生精功能不良包括輕度生精功能不良14例，中度生精功能不良33例，重度生精功能不良56例。采用免疫組化檢測PRPS2在不同組織學(xué)類型睪丸組織中的表達，以半定量方法分析其表達與睪丸生精功能的關(guān)系。2QRTPCR檢測PRPS2表達與睪丸生精功能的關(guān)系收集了生精功能正常、輕度生精功能不良、中度生精功能不良及重度生精功能不良新鮮睪丸組織標本各3例，經(jīng)組織研磨提取RNA，采用QRTPCR定量檢測PRPS2MRNA表達水平，探討其表達與睪丸生精功能的關(guān)系。3構(gòu)建PRPS2敲低及過表達的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株首先通過瞬時轉(zhuǎn)染篩選PRPS2敲低效果最佳的干擾片段，然后包裝成慢病毒載體。同時，合成外源性PRPS2過表達載體并包裝成慢病毒載體。分別將PRPS2敲低及過表達的慢病毒載體感染小鼠精原細胞GC1及小鼠精母細胞GC2，以空載包裝的慢病毒載體作為對照組。通過熒光強度判定轉(zhuǎn)染效率，并行基因序列檢測、QRTPCR及WESTERNBLOT實驗驗證。4體外實驗探討PRPS2敲低及過表達對生精細胞增殖及凋亡的影響PRPS2敲低及過表達的穩(wěn)轉(zhuǎn)生精細胞GC1及GC2成功構(gòu)建后，通過流式細胞儀檢測細胞的凋亡及細胞周期。同時，采用MTT實驗檢測細胞的增殖，并采用免疫組化檢測增殖指標KI67的表達，綜合評定PRPS2敲低及過表達對生精細胞增殖的影響。結(jié)果1PRPS2表達與人睪丸組織學(xué)類型的關(guān)系及其意義免疫組化結(jié)果顯示PRPS2陽性表達主要定位于精原細胞、精母細胞、支持細胞及間質(zhì)細胞的細胞核與細胞質(zhì)，而在精子細胞及成熟精子中未見明顯陽性表達。其中，PRPS2陽性表達主要見于生精功能正常及輕度生精功能不良的睪丸組織，而在中度及重度生精功能不良睪丸組織中的陽性表達較少，統(tǒng)計學(xué)分析顯示PRPS2在生精功能正常及生精功能不良睪丸組織中的陽性表達率分別為683％4160，35％36103，二者差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義P0000。PRPS2在輕度、中度及重度生精功能不良睪丸組織中的陽性表達率分別為50％714、485％1633、232％1356，組內(nèi)比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P002。采用QRTPCR定量檢測了PRPS2MRNA在生精功能正常、輕度生精功能不良、中度生精功能不良及重度生精功能不良新鮮睪丸組織標本中的表達。結(jié)果顯示PRPS2在生精功能正常及輕度生精功能不良睪丸組織中的表達均明顯高于其在中度生精功能不良及重度生精功能不良睪丸組織中的表達，差異具有明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P0000）。然而，PRPS2在生精功能正常睪丸組織中的表達與輕度生精功能不良睪丸組織中的表達無明顯差異（P＞005）。2PRPS2表達對生精細胞生物學(xué)功能的影響首先，我們通過SIRNA干擾片段，瞬時轉(zhuǎn)染了小鼠精原細胞株GG1及小鼠精母細胞株GC2，篩選出PRPS2敲低效果最佳的干擾片段構(gòu)建了慢病毒載體。隨后，我們克隆了外源性PRPS2質(zhì)粒，構(gòu)建了PRPS2過表達的慢病毒載體。以空載序列構(gòu)建的慢病毒載體作為對照，我們分別通過基因序列的檢測驗證了PRPS2干擾及過表達載體構(gòu)建序列的正確性。隨后，我們將PRPS2干擾、過表達及空載對照組慢病毒載體分別感染GC1及GC2細胞株。在熒光顯微鏡下觀察，我們發(fā)現(xiàn)細胞的感染效率較高＞90％。同時，QRTPCR及WSTERNBLOT檢測均表明經(jīng)慢病毒感染后，PRPS2在GC1及GC2細胞中的表達成功被敲低及過表達。隨后，我們通過流式細胞儀檢測了細胞的凋亡率，結(jié)果表明PRPS2表達敲低后，GC1細胞的凋亡率為161％±30％，與對照組相比（28％±02％），差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0000）。而PRPS2過表達后，GC1細胞的凋亡率為06％±03％，與對照組相比（28％±02％），差異也具有統(tǒng)計學(xué)意義（P0000）。同時，PRPS2表達敲低后，GC2細胞的凋亡率為187％±19％，與對照組相比（40％±02％），差異明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義P0000。而PRPS2過表達后，GC2細胞的凋亡率為19％±02％，與對照組相比（40％±02％），差異也具有統(tǒng)計學(xué)意義P0000。為了探討PRPS2表達對生精細胞增殖的影響，我們進行了MTT實驗，連續(xù)觀察5天，結(jié)果表明與對照組相比，PRPS2在GC1細胞中的表達敲低后，細胞的增殖能力明顯下降，而PRPS2過表達后，細胞的增殖能力明顯增強，（P0000）。同樣，在GC2細胞中，PRPS2表達下調(diào)后，細胞的增殖能力明顯低于對照組，而PRPS2過表達后，細胞的增殖能力明顯高于對照組（P0000）。同時，與對照組相比，PRPS2表達下調(diào)后，KI67在GC1及GC2細胞中的表達明顯減弱，而PRPS2表達上調(diào)后，KI67在GC1及GC2細胞中的表達明顯增強。3PRPS2表達對睪丸精子發(fā)生過程的影響首先，為了明確內(nèi)源性PRPS2是否表達于正常的睪丸組織，我們通過QRTPCR及WESTERNBLOT檢測了PRPS2在小鼠出生后4W、6W、8W及10W睪丸組織中的表達，結(jié)果顯示隨著小鼠周齡的增加，PRPS2表達逐漸增加，提示PRPS2參與睪丸的正常發(fā)育過程。隨后，我們將PRPS2干擾片段慢病毒載體行活體內(nèi)小鼠睪丸注射，觀察1周后小鼠睪丸組織的形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果表明PRPS2干擾片段慢病毒載體活體內(nèi)注射1周后，干擾組中PRPS2表達水平明顯低于空載對照組及空白對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義P0000。PRPS2表達下調(diào)后，睪丸組織內(nèi)多數(shù)生精小管被破壞，生精小管內(nèi)各級生精細胞明顯減少，精子發(fā)生過程發(fā)生明顯異常，表達為明顯的生精功能不良。而在空載對照組中，僅看到極少部分生精小管被破壞，大多數(shù)生精小管未受影響，精子發(fā)生大致正常。空白對照組未發(fā)現(xiàn)生精小管被破壞，精子發(fā)生正常。為了進一步探討PRPS2表達與睪丸生精功能的關(guān)系，我們通過白消安構(gòu)建了生精功能低下的小鼠動物模型。免疫組化檢測了PRPS2在小鼠睪丸組織中的表達，結(jié)果顯示PRPS2明顯高表達于精原細胞、精母細胞、支持細胞及間質(zhì)細胞，而成熟精子中未見明顯陽性表達，當睪丸發(fā)生明顯生精功能低下后，PRPS2在生精小管中的表達也明顯下降，而其在間質(zhì)細胞中的表達無明顯變化。WESTERNBLOT及QRTPCR檢測結(jié)果也均顯示PRPS2在生精功能不良睪丸組織中的表達明顯下降。最后，評估了PRPS2表達下調(diào)對生精細胞增殖能力的影響。結(jié)果顯示KI67在空白對照組及空載組睪丸組織中均陽性表達于精原細胞及間質(zhì)細胞，而在干擾組中KI67的表達明顯減弱，提示PRPS2表達下調(diào)后，生精細胞的增殖能力下降。4PRPS2參與精子發(fā)生過程的機制研究為了尋找PRPS2參與調(diào)控的信號通路，我們將PRPS2敲低、過表達及空載對照組的GC1細胞株進行高通量基因芯片分析，結(jié)果表明PRPS2敲低組與對照組相比，差異顯著（P＜005）的基因共有2543個，其中包括1571個基因出現(xiàn)明顯上調(diào)，972個基因出現(xiàn)明顯下調(diào)。PRPS2過表達組與對照組相比，差異顯著P＜005的基因共有3131個，其中包括1582個基因出現(xiàn)明顯上調(diào)，1549個基因出現(xiàn)明顯下調(diào)。PRPS2表達下調(diào)涉及的信號通路主要為細胞骨架、分化、細胞周期、細胞粘附、細胞連接及凋亡。PRPS2過表達所涉及的信號通路主要為細胞骨架、細胞周期、分化、凋亡、細胞粘附及細胞分裂。經(jīng)QRTPCR驗證，我們發(fā)現(xiàn)E2F1為PRPS2正向調(diào)控的下游潛在靶基因。PRPS2表達下調(diào)后E2F1MRNA表達明顯下降，而PRPS2過表達后E2F1MRNA表達明顯增加。為驗證PRPS2是否在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控E2F1，我們構(gòu)建了E2F1的熒光素酶載體，分別轉(zhuǎn)染PRPS2過表達及空載對照組的GC1及GC2細胞。結(jié)果顯示與對照組相比，PRPS2過表達的GC1（GC1PRPS2）及GC2GC2PRPS2細胞中E2F1的熒光素酶活性明顯增強P＜005，提示PRPS2在轉(zhuǎn)錄水平可以直接調(diào)控E2F1的表達，E2F1可能為PRPS2調(diào)控的靶基因。結(jié)論1PRPS2表達與人睪丸組織學(xué)類型相關(guān)，其表達的檢測有助于評估睪丸的生精功能。2PRPS2參與正常的精子發(fā)生及睪丸發(fā)育過程，其表達下調(diào)與睪丸生精功能不良相關(guān)。3PRPS2表達下調(diào)有助于生精細胞的凋亡，并抑制生精細胞的增殖，其作用機制與E2F1P53BCL2BCLXLCASPASE6CASPASE9CDKN2A信號通路相關(guān)。

簡介：先天性肌?。–ONGENITALMYOPATHIESCMS）是一組單基因遺傳性骨骼肌疾病，臨床多以新生兒幼年起病肌無力，伴不伴肌張力低下，病情穩(wěn)定或緩慢進展，骨骼肌活檢具有特征性病理改變。根據(jù)特征性病理表現(xiàn)分類1）軸空性肌?。ㄖ醒胼S空病多迷你軸空病，軸空結(jié)構(gòu)）；2）中心核肌病（中心核肌管肌?。?）桿狀體肌?。U狀體軸空桿體帽狀體）；4）肌球蛋白儲積?。ò麧{異常沉積）；5）肌纖維類型不均等癥（選擇性I型肌纖維萎縮）。先天性肌病共同病理變化為肌纖維直徑大小及類型分布異常，胞漿內(nèi)存在病理性特殊結(jié)構(gòu)；不同于肌營養(yǎng)不良及代謝性肌病的是少見變性、壞死及再生肌纖維，無糖原及脂肪成分蓄積。CMS遺傳方式復(fù)雜多樣，包括常染色體顯性遺傳（AUTOSOMALDOMINANTINHERITANCEAD）、常染色體隱性遺傳（AUTOSOMALRECESSIVEINHERITANCEAR）、X連鎖隱性遺傳（XLINKEDRECESSIVEINHERITANCEXR）及散發(fā)多種遺傳方式，迄今為止發(fā)現(xiàn)30余種致病基因。CMS具有豐富的臨床遺傳異質(zhì)性。每一類先天性肌病均具遺傳異質(zhì)性，如桿狀體肌病由NEB、TPM2、TPM3、ACTA1、TNNT1、CFL2、KBTBD13、KLHL40和KLHL41等基因變異致?。惠S空性肌病由RYR1、MYH7、SEPN1等基因變異致?。恢行暮思〔∮蒑TM1、BIN1、DNM2、TTN基因變異致?。患±w維類型不均由TPM2、TPM3、RYR1、ACTA1、MYH7基因變異致病。臨床異質(zhì)性表現(xiàn)為同一基因變異導(dǎo)致不同的病理現(xiàn)象，如RYR1變異可導(dǎo)致中央軸空病、迷你軸空病、中心核肌病、肌纖維類型不均；ACTA1變異可導(dǎo)致桿狀體肌?。ò睜铙w肌病）、肌動蛋白絲聚合病、肌纖維類型不均。CMS臨床診斷面臨的問題如下1）臨床表型相似，造成CMS診斷困難；2）相同病理特點可由不同致病基因?qū)е拢?）CMS與肌原纖維病致病基因重疊；4）某些致病基因外顯子數(shù)目巨大。復(fù)雜的臨床遺傳異質(zhì)性使CMS的診斷必須基于致病基因分析；傳統(tǒng)的基于CMS骨骼肌病理活檢特定的結(jié)構(gòu)改變，可提示基因測序方向，但CMS上述臨床及遺傳學(xué)特點，使用傳統(tǒng)SANGER法基因分析在診斷陽性率、鑒別診斷、分型診斷及診斷時效方面均存在局限性，桎梏了CMS的分子生物學(xué)診斷廣泛應(yīng)用于臨床。目的基因捕獲二代測序（NEXTGENERATIONSEQUENCINGNGS）技術(shù)，能夠一次性對多個基因的全部外顯子捕獲、測序，堿基覆蓋度達到99％，對每一個堿基檢測平均重數(shù)（測序深度）達100重以上，快速、準確、一次性完成多個目的基因的外顯子測序，相比全外顯子及全基因組測序，其所用時間少、單堿基測序費用低及生物信息分析相對簡單，因此更多應(yīng)用于臨床。同時目的基因捕獲NGS技術(shù)學(xué)特點，解決了SANGER測序在CMS分子生物學(xué)診斷中的不足，推動CMS分子生物學(xué)分型診斷及鑒別診斷。本研究從河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院骨骼肌遺傳資源標本庫（20053201512，1471例）篩選1）中央軸空?。?例）；2）中心核肌?。?例）；進行臨床、病理分析，目的基因捕獲NGS進行致病基因篩查，生物信息學(xué)分析得出的位點經(jīng)患者及其無癥狀親屬（22例）SANGER法驗證。第一部分中央軸空病臨床、病理及基因分析目的本部分基于臨床、活檢骨骼肌病理診斷，篩選9例中央軸空病（CENTRALCEDISEASECCD）患者，采用軸空性肌病目的基因捕獲NGS技術(shù)、SANGER驗證，確定致病基因及突變類型，分析、總結(jié)中國人群CCD臨床、病理及基因變異特點，并探討目的基因捕獲NGS在CCD診斷中的應(yīng)用價值。方法1臨床病例入選標準1）臨床表現(xiàn)嬰幼兒起病的緩慢進展的四肢近端肌、腰帶肌無力、萎縮，伴不伴骨骼肌外并發(fā)癥及面肌受累；2）CK正?；蜉p度升高，肌電圖呈肌源性損害或正常；3）活檢骨骼肌組織化學(xué)染色呈典型中央軸空結(jié)構(gòu)，除外肌營養(yǎng)不良改變，糖原、脂類正常。2歸納整理入組患者臨床資料，包括性別、發(fā)病年齡、血CK、電生理檢查結(jié)果，2例（病例1、7）行骨盆CT（COMPUTERIZEDTOMOGRAPHYCT）檢查。3活檢骨骼肌組織化學(xué)，病理分析；4例患者（病例2、3、4、8）行電子顯微鏡超微結(jié)構(gòu)分析。4軸空性肌病目的基因富集（RYR1、MYH7、SEPN1）二代測序，生物信息學(xué)分析致病基因，對發(fā)現(xiàn)的突變應(yīng)用SANGER法對患者（9例）及部分無癥狀親屬（9例）驗證。結(jié)果19例CCD患者中，男性3例，女性6例，陽性家族史者3例，年齡232歲，全部為出生后或嬰幼兒期起病。臨床表現(xiàn)為輕中度的非進行性近端肌無力、肌張力低下；5例具有特殊容貌（高腭弓、倒V型嘴、細長臉等），6例患者伴骨骼肌外并發(fā)癥（關(guān)節(jié)過伸展、跟腱攣縮等、脊柱側(cè)彎先天性髖關(guān)節(jié)脫位）。血CK輕度升高1例，正常8例。EMG呈肌源性損害6例，正常3例。2例骨盆CT示髖臼發(fā)育不良及臀肌萎縮。2活檢骨骼肌組織化學(xué)染色（9例）肌纖維未見明顯變性、壞死和再生，肌纖維輕中度大小不等，可見典型中央軸空結(jié)構(gòu)，呈單個或多個，位于肌纖維中央或偏側(cè)。所有病例均表現(xiàn)為I型肌纖維萎縮；肌纖維類型分布單一I型肌纖維5例，I型肌纖維優(yōu)勢4例。電子顯微鏡超微結(jié)構(gòu)特點（4例）軸空區(qū)域肌纖維結(jié)構(gòu)紊亂，線粒體缺失。3目的基因捕獲NGS分析、SANGER驗證，8例患者致病基因為RYR1，共發(fā)現(xiàn)5個雜合突變（新發(fā)突變2個，已報位點3個）。具體如下3例新發(fā)突變（C13732TG和C13915_13923DEL），3例C14582GA，1例C14581CT，1例C13919TG。其中2例RYR1為DENOVO突變（C13919TG和C13915_13923DEL）。1例（例6）于RYR1、MYH7、SEPN1均未發(fā)現(xiàn)具有臨床意義致病突變。結(jié)論1CCD符合CMS的一般臨床表現(xiàn)。2活檢骨骼肌病理分析，中央軸空是診斷與鑒別診斷其他類型CMS、兒童遺傳性骨骼肌疾病的重要方法。3RYR1可能為中國人CCD常見致病基因，可能存在外顯子94101的附近熱點突變區(qū)域。4NGS對于發(fā)現(xiàn)CCD的RYR1以外基因變異具有篩查價值。第二部分中心核肌病臨床、病理及分子生物學(xué)分析目的中心核肌病（CENTRONUCLEARMYOPATHIESCNMS）根據(jù)遺傳方式及臨床表現(xiàn)分為三類XR遺傳（MTM1）、AD遺傳（DNM2、CCDC78等）及AR遺傳（BIN1、RYR1等）。不同的類型存在不同的臨床表現(xiàn)和不同的預(yù)后。其中女性MTM1變異攜帶者患者僅有個例報道，其發(fā)病機制可能與X染色體失活偏移（SKEWEDXCHROMOSOMEINACTIVATIONSXCI）有關(guān)。本部分篩選經(jīng)臨床、活檢骨骼肌病理診斷的CNMS患者7例，使用中心核肌病目的基因捕獲NGS測序技術(shù)，篩選致病基因，并對2例MTM1女性攜帶者進行X染色體失活分析。總結(jié)不同亞型CNMS臨床、下肢骨骼肌MRI特點、骨骼肌病理特點；確定一組中國人群CNMS致病基因及突變類型，總結(jié)基因變異特點。方法1臨床病例入選標準1）臨床表現(xiàn)符合CMS，包括嬰幼兒起病的緩慢進行性加重肌無力、萎縮，運動發(fā)育遲緩，伴不伴骨骼肌外并發(fā)癥（關(guān)節(jié)攣縮、脊柱側(cè)彎）及面肌受累（細長臉、高腭弓、眼外肌麻痹等）；2）CK正常或輕度升高，肌電圖正常或呈肌源性損害；3）活檢骨骼肌組織化學(xué)染色中心核肌纖維比例增加，除外肌營養(yǎng)不良改變，糖原、脂類正常。2歸納整理入組患者臨床資料，包括性別、發(fā)病年齡、血CK、電生理檢查結(jié)果，5例患者（病例2、3、4、6、7）行雙下肢骨骼肌核磁共振成像（MAGICRESONANCEIMAGINGMRI）檢查。3活檢骨骼肌組織化學(xué)，病理分析；2例患者（病例1、7）行電子顯微鏡超微結(jié)構(gòu)分析。4中心核肌病目的基因捕獲（MTM1、DNM2、BIN1、RYR1、CCDC78、TTN、SPEG、MTMR14）NGS測序，生物信息學(xué)分析致病基因，對發(fā)現(xiàn)的突變應(yīng)用SANGER法對患者（7例）及無癥狀親屬（12例）家系驗證。5X染色體失活（XCHROMOSOMEINACTIVATION，XCI）分析2例MTM1變異的女性患者，PCR其外周血DNA擴增雄性激素受體（ROGENRECEPTAR）基因第1外顯子CAG重復(fù)序列的多肽性分析X染色體失活。X染色體失活時，位于該重復(fù)序列附近的甲基化敏感性內(nèi)切酶HPAII的酶切位點被甲基化而不能被切斷，而有活性的X染色體則相反。因此，如先用HPAII對基因組DNA酶切后再進行PCR擴增，僅有失活X染色體有產(chǎn)物。結(jié)果17例CNMS患者中，男性3例，女性4例，例1具陽性家族史，其余患者無陽性家族史。年齡347歲，均為生后或嬰幼兒期起病，病情緩慢進展。3例（病例4、5、6）為遠端肌無力為主要及首發(fā)癥狀，其余4例主要表現(xiàn)為四肢近端肌無力。5例具有特殊面容（細長面容、高腭弓），3例伴眼外肌受累（眼瞼下垂、眼外肌麻痹），4例伴骨關(guān)節(jié)異常（脊柱側(cè)凸、跟腱攣縮、手指關(guān)節(jié)畸形及過伸展）；CK正常6例，升高1例；EMG呈肌源性改變。下肢骨骼肌MRI例4、6為小腿重于大腿，例2、3、7大腿重于小腿。其中例4、6大腿前群?。ü芍虚g肌）重于后群，而小腿以后群肌受累為主（比目魚肌）；例3、7大腿后群肌受累重于前群，小腿以腓腸肌及脛骨前肌輕度受累；例3小腿肌群無明顯受累。2活檢骨骼肌組織化學(xué)染色（7例）未見明顯肌纖維變性、壞死和再生，肌纖維大小不等，脂肪結(jié)締組織輕重度增生（例2彌漫性脂肪浸潤）。中心核及核集中肌纖維顯著增加；I型肌纖維小徑化，2例為I型肌纖維優(yōu)勢，2例為單一I型肌纖維，其中MTM1CNM（例1）可見項圈纖維，DNM2CNM（例4、5、6）及RYR1CNM（例7）可見輪輻狀肌纖維RADIALSARCOPLASMICSTRS，RSS。電子顯微鏡超微結(jié)構(gòu)特點（2例）可見中心核呈鏈狀排列，中心核周邊區(qū)域線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體、糖原顆粒聚集。3目的基因捕獲NGS測序、SANGER驗證，病例1、2、3為MTM1變異（分別為C10541GA、C286DUPA、C1405CG）；病例4、5、6為DNM2變異（分別為C1106GA、C1102GA、C1105CT）；例7為RYR1變異（C12237DELC、C12536GA），其中MTM1（C1405CG）及RYR1（C12237DELC）為新發(fā)突變，病例4、5為DENOVO突變。根據(jù)基因分析結(jié)果，將7例患者分型診斷病例1、2、3為MTM1變異X連鎖隱性遺傳肌管疾病（XLINKEDRECESSIVEMYOTUBULARMYOPATHYXLMTM），病例4、5、6為DNM2變異的常染色體顯性遺傳CNM病例7為RYR1變異常染色體隱性遺傳CNM。4病例1和2X染色體失活分析XCI80病例1XCI傾斜率為8416，病例2XCI傾斜率為8317，為SXCI。結(jié)論1CNMSCNMS表型相似，臨床不能明確分型診斷；DNM2CNM具有相對一致的臨床表型，表現(xiàn)為下肢遠端為重的肌無力，有待進一步增加樣本量研究。2特征性骨骼肌受累肌群，一定程度上提示CNMS亞型，指導(dǎo)致病基因測序方向，同時可以進一步指導(dǎo)骨骼肌活檢部位。3中心核肌纖維明顯增多是特征性病理改變，對CNMS與其他類型CMS及其他遺傳性骨骼肌疾病的具有診斷、鑒別診斷價值。4CNMS多個基因、點突變致病，應(yīng)將CNMS視為一疾病譜系，臨床表型相似、高度遺傳異質(zhì)性，建議基因分析首選NGS，一次性完成診斷與鑒別診斷。5MTM1變異的女性攜帶者能夠發(fā)病并有較嚴重的臨床表現(xiàn)及典型中心核病理特點，癥狀較男性患者輕，可能與SXCI有關(guān)，女性XLMTM攜帶必要時應(yīng)行XCI分析。6CNMS高度致殘，正確的分子生物學(xué)診斷可使先證者及其家系獲得正確的遺傳咨詢及產(chǎn)前診斷，避免出生缺陷。

簡介：點擊查看更多銅綠假單胞菌噬菌體PL39生物學(xué)特性及對小鼠全身感染的治療研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多石墨烯-聚酰胺66功能材料與納米羥基磷灰石復(fù)合材料的制備及其生物學(xué)特性的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明秉承學(xué)校嚴謹?shù)男ｏL(fēng)和科研作風(fēng)，本人申明所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名；≥望手一日期絲鱉第三軍醫(yī)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解第三軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為第三軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名．I日期第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文英文簡寫AMPFCSCDNACPGDABHEBSPDNTPSIGF．1RDEPCIHCEDTAEBDNMTPBSDNAFBSIGF．2DMSOHI沖ODRNAMRNAPCRQPCRRRPCROSMECP2英文縮寫字表英文全名中文名稱AMPICILLIN氨芐青霉素FETALCALFSERUM胎牛血清COMPLEMENTARYDNA互補脫氧核糖核酸CGDINUCLEOTIDECG二核苷酸3，3一DIAMINOBENZIDINETETRAHYDROCHLORIDE3，3．二氨基聯(lián)苯胺HAEMATOXYLIN．EOSIN蘇木素．伊紅染色BISULFITESEQUENCINGARRAYS亞硫酸氫鈉修飾后測序法DEOXYRIBONUCLEOSIDETRIPHOSPHATE脫氧核糖核苷三磷酸INSULIN．1IKEGROWTHFACTORIRECEPTOR胰島素樣生長因子1受體DIETHYLPYROCARBONATE焦炭酸二乙酯IMMUNOHISTOCHEMISTRY免疫組織化學(xué)ETHYLENEDIAMINETETRAACETICACID乙二胺四乙酸ETHIDIUMBROMIDE溴化乙錠DNAMETHYLTRANSFERASEDNA甲基轉(zhuǎn)移酶PHOSPHATEBUFFERSOLUTION磷酸鹽緩沖DEOXYRIBONUCLEICACID脫氧核糖核酸FETALBOVINESERUM胎牛血清INSULIN．1IKEGROWTHFACTORII胰島素樣生長因子2DIMETHYLSULFOXIDE二甲基亞砜HORSERADISHPEROXIDASE辣根過氧化酶OPTICALDENSITY光密度值RIBONUCLEICACID核糖核酸MESSENGERRIBONUCLEICACID信使核糖核酸POLYRNERASECHAINREACTION聚合酶鏈反應(yīng)QUANTITATIVEREAL．TIMEPOLYMERASECHAINREACTION實時熒光定量REAL．TIMEPCR實時定量PCROSTEOSARCOMA骨肉瘤METHYL．CPG．BINDINGPROTEIN2甲基化CPG結(jié)合蛋白2

簡介：博士學(xué)位論文科學(xué)學(xué)位科學(xué)學(xué)位沉默沉默MUSASHI1基因?qū)Y(jié)腸癌基因?qū)Y(jié)腸癌細胞生物學(xué)特性及放細胞生物學(xué)特性及放療敏感性的影響療敏感性的影響研究生高超高超導(dǎo)師張翼張翼教授專業(yè)生理學(xué)生理學(xué)二級學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院研究起止日期2013年10月2016年1月提交日期2016年4月授予單位代碼10089學(xué)號或申請?zhí)?0131003授予單位代碼10089學(xué)號或申請?zhí)栔袌D分類號20131003R73535HEBEIMEDICALUNIVERSITY目錄中文摘要1英文摘要5英文縮寫11研究論文沉默MUSASHI1基因?qū)Y(jié)腸癌細胞生物學(xué)特性及放療敏感性的影響引言13第一部分結(jié)腸癌組織和細胞中MUSASHI1蛋白表達及MUSASHI1穩(wěn)定低表達結(jié)腸癌細胞系構(gòu)建前言15材料與方法17結(jié)果36附圖38討論45小結(jié)49參考文獻50第二部分沉默MUSASHI1對結(jié)腸癌HCT116細胞生物學(xué)特性的影響前言54材料與方法55結(jié)果61附圖63討論70小結(jié)75參考文獻76第三部分沉默MUSASHI1對結(jié)腸癌HCT116細胞生長抑制的分子機制前言80材料與方法82結(jié)果92附圖93討論96

簡介：RBM8A與肝細胞癌發(fā)生的相關(guān)性及對肝細胞癌增殖及凋亡生物學(xué)特性的影響及機制研究2013級博士研究生年級2013級學(xué)號201310031廣西醫(yī)科大學(xué)廣西醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文RBM8A與肝細胞癌的相關(guān)性及對肝細胞癌與肝細胞癌的相關(guān)性及對肝細胞癌增殖及凋亡生物學(xué)特性的影響增殖及凋亡生物學(xué)特性的影響葉甲舟指導(dǎo)教師姓名黎樂群指導(dǎo)教師姓名黎樂群教授教授專業(yè)名稱腫瘤外科學(xué)專業(yè)名稱腫瘤外科學(xué)申請學(xué)位類型科學(xué)學(xué)位申請學(xué)位類型科學(xué)學(xué)位二零一六年三月二零一六年三月RBM8A與肝細胞癌發(fā)生的相關(guān)性及對肝細胞癌增殖及凋亡生物學(xué)特性的影響及機制研究2013級博士研究生簽字日期年月日簽字日期年月日目錄主要縮略語英文對照表1摘要4ABSTRACT9一、RBM8A與人肝細胞癌相關(guān)性的臨床初步研究141前言142材料及方法1821標本1822實驗方法193結(jié)果334討論42參考文獻46二、RBM8A與肝癌細胞增殖及凋亡特性的基礎(chǔ)實驗研究521前言522材料與方法5321體外肝癌細胞株RBM8A表達的篩選檢測5322HUMANRBM8過表達慢病毒載體的構(gòu)建與包裝53221階段1RBM8A過表達慢病毒載體的構(gòu)建53222階段2慢病毒的包裝和病毒滴度的測定60

簡介：純鈦表面載I。AMA3涂層在種植俺牙齦生物學(xué)封閉形成中的作用⑧論文作者簽名匆L品指導(dǎo)教師簽名論文評閱人L評閱人2評閱人3評閱人4評閱人5答辯委員會主席委員1委員2委員3委員4委員5匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱匿名評閱陳萬濤教授上海交通大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院王佐林教授上海同濟大學(xué)附屬口腔醫(yī)院翁文劍教授浙江大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院王小祥教授浙江大學(xué)材料科學(xué)與工程學(xué)院任國平主任醫(yī)生浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院答辯日期2016年05月23目浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得迸’江盤堂或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名簽字日期劫16年歲月巧日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解迸姿盤堂有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)逝’江盤堂可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索和傳播，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名肚導(dǎo)師簽名簽字日期20如年歹月5日簽字日跫必／G年廠月歲D日

簡介：HEBEIMEDICALUNIVERSITY碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文專業(yè)學(xué)位專業(yè)學(xué)位強直性肌營養(yǎng)不良癥的臨床、病理及強直性肌營養(yǎng)不良癥的臨床、病理及分子生物學(xué)特征研究分子生物學(xué)特征研究2016年3月授予單位代碼授予單位代碼10089學(xué)號或申請?zhí)枌W(xué)號或申請?zhí)?0133128中國圖書分類號中國圖書分類號R7462研究生生侯志剛侯志剛導(dǎo)師師宋學(xué)琴宋學(xué)琴教授教授專業(yè)業(yè)神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)病學(xué)二級學(xué)院二級學(xué)院河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院目錄中文摘要1英文摘要4英文縮寫9研究論文強直性肌營養(yǎng)不良癥的臨床、病理及分子生物學(xué)特征研究前言10材料與方法12結(jié)果18附圖23附表32討論37結(jié)論41參考文獻42綜述離子通道性肌病肌強直性綜合征的研究45致謝54個人簡歷55