簡介：點擊查看更多慢性酒精中毒性肌病模型的建立.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的研究利塞膦酸鈉干預(yù)對人成骨樣細胞MG63護骨素OPG和腫瘤壞死因子ΑTNFΑ表達及對堿性磷酸酶活性的影響，探討利塞膦酸鈉對成骨細胞功能的影響方法將人成骨樣細胞MG63接種于置玻片的六孔培養(yǎng)板中，于第6、12、18D取出細胞片，分別采用VANGIESON氏苦味酸復(fù)紅染色法、改良鈣鈷法、茜素紅染色法觀察MG63細胞Ⅰ型膠原、堿性磷酸酶在增殖、分化時期表達的變化及礦化結(jié)節(jié)的形成；將人成骨樣細胞MG63予以不同濃度1010MOLL；109MOLL；108MOLL107MOLL的利塞膦酸鈉干預(yù)72H，ELISA法測定細胞條件培養(yǎng)液中OPG及TNFΑ含量的變化，比色法測定條件培養(yǎng)液中堿性磷酸酶的活性。結(jié)論利塞膦酸鈉可通過增加成骨樣細胞MG63OPG的表達，下調(diào)TNFΑ的表達，從而可以間接抑制破骨細胞的活化，發(fā)揮其抗骨吸收的作用；利塞膦酸鈉可促進人成骨樣細胞MG63堿性磷酸酶的活性，可能對骨形成具有促進作用。

簡介：骨髓炎骨缺損OSTEOMYELITICBONEDEFECTIONOBD對于病人來說是相當(dāng)痛苦的其治療對于醫(yī)生來說也是非常棘手的有很多患有此病的患者最后不得不截肢。其治療主要是抗感染和骨缺損的修復(fù)近年來出現(xiàn)了大量有關(guān)轉(zhuǎn)移局部帶血供肌瓣MUSCLEFLAPWITHVESSELPEDICLEMFVP修復(fù)骨缺損的報道也有轉(zhuǎn)移以腺病毒為載體表達的骨形態(tài)發(fā)生蛋白2ADENOVIRUSRECOMBINEDHUMANBONEMPHOGEICPROTEIN2ADRHBMP2基因誘導(dǎo)肌細胞成骨的報道但尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)于轉(zhuǎn)移肌瓣骨化過程及轉(zhuǎn)移ADRHBMP2基因修復(fù)OBD的報道。我們應(yīng)用顯微外科技術(shù)轉(zhuǎn)移局部帶血管蒂肌瓣骨化修復(fù)OBD并聯(lián)合應(yīng)用基因技術(shù)縮短肌瓣骨化修復(fù)OBD時間提出治療OBD有效的新方法。目的觀察、比較兩種治療方案誘導(dǎo)肌瓣骨化修復(fù)OBD的效果。①應(yīng)用顯微外科技術(shù)轉(zhuǎn)移MFVP填充清創(chuàng)術(shù)后的OBD保證肌瓣的血供。②聯(lián)合應(yīng)用顯微外科技術(shù)與基因技術(shù)轉(zhuǎn)移MFVP填充清創(chuàng)術(shù)后的OBD并轉(zhuǎn)移ADRHBMP2基因至肌瓣。方法一大鼠OBD模型制備向脛骨上段骨缺損腔內(nèi)塞入蘸有3106CFU金葡菌03ML的紗布及注射5％魚肝油酸鈉SODIUMMRHUATESM注射液含有2％苯甲醇以骨蠟封閉骨面14天后造成骨髓炎骨缺損模型。二治療OBD1分組將120只WISTAR大鼠OBD模型隨機分為3組每組40只第1組對照組；第2組肌瓣組；第3組復(fù)合轉(zhuǎn)移ADRHBMP2組。2清創(chuàng)清除不健康的軟組織及壞死的骨組織保留感染骨質(zhì)鉆通封閉的髓腔。3實驗過程第1組膝下愿切口進入適當(dāng)延長清創(chuàng)后縫合創(chuàng)口。第2組取膝下切口局部清創(chuàng)。更換手套及操作器械自腹股溝中點向上方做S形切口長約4CM應(yīng)用顯微外科技術(shù)自股動脈起始處找到向上走行的腹壁淺血管神經(jīng)束保留肌肉深層游離血管神經(jīng)蒂寬45MM及以腹壁淺血管、神經(jīng)為蒂的肌瓣MUSCLEFLAPWITHEPIGASTRIASUPERFICIALISVESSELPEDICLEMFSAVP并在與股動脈神經(jīng)束交界處切斷神經(jīng)束。上下口之間做皮下潛行隧道將肌瓣經(jīng)隧道穿至下方的清創(chuàng)口將肌瓣填充殘腔縫合創(chuàng)口。第3組第一步清創(chuàng)及轉(zhuǎn)移肌瓣同第2組第二步在肌瓣上分3點局部注射ADRHBMP2注意不損害肌瓣血供縫合創(chuàng)口。4術(shù)后處理3天內(nèi)給予肌肉注射鹽酸罌粟堿預(yù)防血管痙攣按10MGKGD肌肉注射注射用頭孢呋辛按100MGKGD抗感染知道傷口愈合。并分別在術(shù)后7、14、28、42、56天時測量肛溫、檢驗白細胞分析以斷髓法處死8只大鼠觀察大鼠肌瓣檢查脛骨CR光鏡下觀察肌瓣組織病理切片觀測成骨情況。結(jié)果一模型體重、肛溫、局部表現(xiàn)、CR及光鏡下所見病理圖片示7天時骨髓炎急性期7天后癥狀逐漸緩解14天時骨髓炎轉(zhuǎn)為慢性期制造出OBD模型。二治療第1組傷口愈合時間比第2、3組時間長。第1組術(shù)后56天時殘腔變小為原來體積的12瘢痕填充缺損腔。第2組術(shù)后56天時肌瓣骨化修復(fù)OBD。第3組術(shù)后42天時肌瓣骨化修復(fù)OBD。結(jié)論一將蘸有3106CFU金黃色葡萄球菌的棉條植入WISTAR大鼠脛骨上段骨缺損腔內(nèi)并腔內(nèi)注射5％魚肝油酸鈉骨蠟封閉可以造成OBD模型。二將蘸有3106CFU金黃色葡萄球菌的棉條植入WISTAR大鼠脛骨上段骨缺損腔內(nèi)并腔內(nèi)注射5％魚肝油酸鈉骨蠟封閉7天時骨髓炎處于急性期；經(jīng)過應(yīng)用抗生素7天骨髓炎轉(zhuǎn)為慢性。三骨髓炎骨缺損區(qū)骨質(zhì)直徑D骨缺損面積M當(dāng)MD15D時骨髓炎骨缺損很難自愈。四轉(zhuǎn)移局部帶血管蒂肌瓣肌瓣可以骨化修復(fù)骨髓炎骨缺損。五IV途徑轉(zhuǎn)移5108PFUML滴度的ADRHBMP2誘導(dǎo)肌瓣骨化過程中無明顯排異反應(yīng)。六IV途徑轉(zhuǎn)移ADRHBMP2至肌瓣可以誘導(dǎo)肌瓣骨化修復(fù)骨髓炎骨缺損。七當(dāng)轉(zhuǎn)移帶血管蒂肌瓣修復(fù)骨髓炎骨缺損時ADRHBMP2可以縮短肌瓣骨化時間。

簡介：天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文糖尿病大鼠牙槽骨RANKL、OPG基因表達的實驗研究姓名吳陳炫申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師劉士有王永蘭20070401學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進行研究工作取得的研究成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容和致謝的地方外，論文中不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名曩F亟日期P。K廠月P侶I學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解天津醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，并采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編以供查閱和借閱。同意學(xué)校向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文，并編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫。保密口，在年解密后適用本授權(quán)書。本論文屬于不保密囪。請在以上方框內(nèi)打“√”作者簽名趙導(dǎo)師簽名字目豇日期護刁年廣月諺日

簡介：目的探討CANNFAT信號通路在慢性氟中毒氟骨癥發(fā)病中的作用。方法將36只SD大鼠按性別和體重隨機分為3組對照組飲水含氟結(jié)果1氟中毒大鼠模型復(fù)制成功，表現(xiàn)為染氟組大鼠有不同程度氟斑牙發(fā)生，以高劑量組最為嚴重，各組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P2ELISA結(jié)果顯示1染氟組大鼠血清BGP升高，各組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P3病理形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)骨組織呈骨質(zhì)硬化表現(xiàn)，與對照組比較，隨染氟劑量增加，氟中毒組大鼠骨小梁厚度、密度及骨皮質(zhì)厚度均明顯增加骨小梁間隙逐漸減小，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P4破骨細胞的鑒定與計數(shù)對照組比較，低氟組破骨細胞數(shù)目增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005；低氟組與高氟組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義P5免疫組化和原位雜交結(jié)果顯示1與對照組比較，染氟組大鼠成骨細胞中CAN和NFAT蛋白及MRNA表達逐漸增高，各組間比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P005。成骨細胞和破骨細胞中，CAN表達與NFAT的表達均呈正相關(guān)性ROB0923，ROC0984，P結(jié)論飲水型慢性氟中毒大鼠模型復(fù)制成功。BGP、TRACP5B可作為慢性氟中毒骨骼病變的代謝指標(biāo)之一。慢性氟中毒大鼠骨組織中CAN和NFAT表達出現(xiàn)改變，經(jīng)由CANNFAT信號通路參與氟中毒骨骼損傷，可能是氟骨癥發(fā)病機制的重要環(huán)節(jié)之一。

簡介：分類號密級國際十進分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文雌激素受體Β在大鼠骨髓基質(zhì)干細胞雌激素受體Β在大鼠骨髓基質(zhì)干細胞成骨與成脂肪分化平衡中的作用骨與成脂肪分化平衡中的作用（題名和副題名）鄭紅（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名丁寅教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院正畸科申請學(xué)位級別博士專業(yè)名稱口腔臨床醫(yī)學(xué)（正畸學(xué)）論文提交日期200804答辯日期200805論文起止時間2006年3月至2008年4月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)雌激素受體Β在大鼠骨髓基質(zhì)干細胞雌激素受體Β在大鼠骨髓基質(zhì)干細胞成骨與成脂肪分化平衡中的作用成骨與成脂肪分化平衡中的作用研究生鄭紅學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（口腔正畸學(xué)）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院正畸科導(dǎo)師丁寅教授（主任醫(yī)師）資助基金項目國家自然科學(xué)基金資助30572069關(guān)鍵詞骨髓基質(zhì)干細胞；雌激素受體Β；小干擾RNA；成脂肪分化；成骨分化中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2008年05月

簡介：目的近年來應(yīng)用支架材料性組織工程骨修復(fù)重建骨缺損成為骨組織工程學(xué)領(lǐng)域重要研究方向如何有效的監(jiān)測支架材料的成骨活性、血管化進程等性質(zhì)一直是研究的重點之一。本研究采用了單光子發(fā)射型計算機斷層術(shù)SPECT對已行組織工程骨修復(fù)頜骨缺損的患者進行定期監(jiān)測從而尋求合適的方法研究支架材料的成骨特性并證明其良好的臨床應(yīng)用前景。方法使用合理的方法篩選臨床病例行相關(guān)手術(shù)后完善術(shù)后隨訪工作并定期行SPECT檢查通過得到的核素骨顯像圖片利用相關(guān)軟件進行定性定量分析。結(jié)果根據(jù)定期隨訪所獲得的ECT圖像可以明確判斷術(shù)區(qū)相對于對照側(cè)明顯示蹤劑濃聚表現(xiàn)為深色著色。定性說明了支架材料在修復(fù)頜骨缺損時的成骨活性和血管再生程度。通過SPECT相應(yīng)軟件進行定量分析圖像中感興趣區(qū)域的放射計數(shù)得到相同結(jié)論。此外時間軸的延伸可看出監(jiān)測的敏感度和持久性。結(jié)論無機活性誘導(dǎo)元素骨支架材料在用于修復(fù)骨缺損時能有效促進和提高其成骨特性支架材料在分化成骨及血管再生方面具有一定優(yōu)勢使骨缺損的修復(fù)及重建效率得到有效提升是一種極具潛力的優(yōu)質(zhì)組織工程化構(gòu)建骨支架材料。應(yīng)用核素骨顯像技術(shù)在針對無機活性元素支架材料修復(fù)頜骨缺損的監(jiān)測具有非常重要的意義其具有靈敏、直觀、定量分析準(zhǔn)確、持久的特點使其成為臨床動態(tài)監(jiān)測骨組織工程修復(fù)頜骨缺損后骨再生的重要指標(biāo)。

簡介：點擊查看更多基于SOFM網(wǎng)絡(luò)肌電信號識別系統(tǒng)的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的骨缺損修復(fù)一直是醫(yī)學(xué)研究的重點之一。骨髓間充質(zhì)干細胞BMSCS以其生物學(xué)特性吸引了諸多學(xué)者的目光。氧作為生命活動所必需的環(huán)境因素，對間充質(zhì)干細胞的增殖、分化具有重要的調(diào)節(jié)作用，同樣，氧的存在也是MSCS的存活、增殖和分化過程中不可缺少的條件之一。骨髓中的氧大約是1％7％PO2，這比一般環(huán)境中的20％低很多。在病理條件下如骨缺損的修復(fù)過程中，MSCS需保持在更低的氧的環(huán)境中發(fā)揮它應(yīng)有的作用。本實驗的目的是研究低氧對MSCS成骨分化的影響在MSCS的成骨分化過程中低氧與NOTCH信號之間的關(guān)系以及低氧條件下NOTCH信號對MSCS成骨分化影響的機制。方法在1％PO2（低氧）或21％PO2（正常氧）氧下培養(yǎng)MSCS，對目的細胞分別進行ALP活性分析，實時PCR指定基因表達分析，ARS著色礦化檢測在MSCS分化過程中通過實時PCR在7天、14天、21天的時候檢測NOTCH1的表達水平，通過免疫印跡檢測NOTCH1的蛋白表達水平NOTCH1專一性的慢性病毒調(diào)節(jié)SHRNA注入MSCS以抑制NOTCH信號活性在成骨誘導(dǎo)條件下培養(yǎng)7天以后，觀測ALP活性、RUNX2、OPN和OCN的MRNA表達水平及成骨礦化水平在低氧和正常氧條件下測量RUNX2在對照NOTCH1SHRNA轉(zhuǎn)染MSCS中和NOTCH1SHRNA轉(zhuǎn)染MSCS中蛋白表達水平免疫沉淀實驗研究NOTCH1和RUNX2的關(guān)系使用骨鈣素和纖連蛋白啟動子熒光素酶實驗測定RUNX2的轉(zhuǎn)錄活性。結(jié)果體外培養(yǎng)后細胞的ALP活性在低氧條件下比正常氧條件下低很多實驗組低氧組中三種基因的表達水平比正常氧條件下低很多相應(yīng)的，在形態(tài)學(xué)表現(xiàn)上，低氧條件下培養(yǎng)的MSCS分化的礦化水平相比正常氧條件下顯著降低。實時PCR在7天、14天、21天的時候檢測NOTCH1的表達水平發(fā)現(xiàn)與正常氧相比，NOTCH1的表達在低氧條件下顯著升高。和MRNA水平一致，NOTCH1在低氧條件下培養(yǎng)的MSCS7天、14天、21天各個時間點中的蛋白表達水平顯著增加。NOTCH1專一性的慢性病毒調(diào)節(jié)SHRNA被注入MSCS來抑制NOTCH信號活性。NOTCH1的表達被SHRNA明顯抑制。當(dāng)NOTCH1SHRNA和控制SHRNA轉(zhuǎn)化的MSCS在成骨誘導(dǎo)條件下培養(yǎng)7天以后，在對照組細胞中，ALP活性在低氧條件下比在正常氧條件下低很多在NOTCH1抑制的細胞中，ALP活性差異在兩種條件下不明顯。除此之外，RUNX2，OPN和OCN的MRNA表達水平在控制SHRNA轉(zhuǎn)化組中低氧和正常氧下差別很大，但在NOTCH1SHRNA轉(zhuǎn)化組中就不明顯。相同的，礦化水平差異在SHRNA轉(zhuǎn)化細胞中不明顯，但是在對照組中就很明顯。我們進一步研究了低氧通過NOTCH信號抑制MSCS成骨分化的機制。基于RUNX2對于成骨細胞分化是很關(guān)鍵的轉(zhuǎn)錄因子，在低氧和正常氧條件下測量RUNX2在對照NOTCH1SHRNA轉(zhuǎn)染MSCS中和NOTCH1SHRNA轉(zhuǎn)染MSCS中蛋白表達水平。不管是在低氧還是正常氧條件下，NOTCH1抑制都可導(dǎo)致RUNX2的上調(diào)。另外，免疫沉淀實驗顯示NOTCH1可以綁定在RUNX2上。為了進一步研究NOTCH1和RUNX2之間綁定的功能性結(jié)果，在對照組和NOTCH1SHRNA轉(zhuǎn)染組中RUNX2的轉(zhuǎn)錄活性通過使用骨鈣素和纖連蛋白啟動子熒光素酶實驗測定。RUNX2的轉(zhuǎn)錄活性在NOTCH1抑制后顯著提高。結(jié)論低氧抑制MSCS成骨分化在MSCS的成骨分化過程中低氧可激活NOTCH信號NOTCH信號對于MSCS成骨分化的低氧性損傷是必須的NOTCH通過直接綁定在RUNX2上抑制RUNX2的轉(zhuǎn)錄活性。

簡介：目的探討骨折后不同代次大鼠BMSCS在體外共培養(yǎng)條件下的增殖及成骨能力的實驗研究。方法①3月齡雄性大鼠15只制作骨折及骨折后內(nèi)固定模型，分別于術(shù)后1D、1W、2W行大X線檢查骨折愈合及克氏針在位情況。②取喂養(yǎng)2W大鼠骨折端BMSCS，進行原代、傳1代、傳2代、傳3代體外增殖培養(yǎng)，將原代及傳代培養(yǎng)的BMSCS分別編號為P0、P1、P2、P3，將單代次BMSCS設(shè)為對照組，編為第I組。③將不同2代次培養(yǎng)設(shè)為第II組，同理，將3種不同代次BMSCS共培養(yǎng)設(shè)為第III組將4種不同代次BMSCS設(shè)為第IV組，進行體外共培養(yǎng)。④各組BMSCS細胞培養(yǎng)8天，每天行MTT檢測并其繪制其生長曲線。⑤各組BMSCS成骨誘導(dǎo)分化3周后，進行堿性磷酸酶染色同時行堿性磷酸酶活性檢測、茜素紅染色并鈣結(jié)節(jié)計數(shù)及WESTERNBLOT檢測BMP2蛋白含量。⑥分別進行組間統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果①骨折模型制作成功，在術(shù)后1D、1W、2W的X線檢測中，克氏針均在位，骨折無明顯愈合跡象。②倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)各組BMSCS生長均呈放射狀集落貼壁生長，共培養(yǎng)組細胞在鏡下觀察有各代細胞，形態(tài)不一。③MTT法檢測生長情況各組在開始24小時各組均出現(xiàn)生長滯緩期，差異較小，24小時后，IV組細胞開始大量增殖，進入對數(shù)生長期，生長速率較快，持續(xù)約3天，最早到達峰值，保持較高水平約48小時，然后緩慢下降；隨著組合細胞代次的減少，增殖數(shù)量由高到低，平臺期持續(xù)時間逐漸縮短，衰竭期下降速率由慢到快。④各組BMSCS細胞向成骨細胞誘導(dǎo)培養(yǎng)，排列呈魚群樣，生長旺盛，形體飽滿，體積逐漸增大。⑤堿性磷酸酶化學(xué)染色所有組別BMSCS成骨誘導(dǎo)后均能被染色，成骨細胞胞漿內(nèi)可見棕褐色陽性顆粒。⑥堿性磷酸酶活性檢測I、II、III、IV多組作單因素方差分析，2D、4D、6D無明顯差異，第8D見III組為2725±045、IV組為2956±052與I組2519±080相比有統(tǒng)計學(xué)差異。⑦各組BMSCS成骨誘導(dǎo)后茜素紅染色檢測均呈陽性反應(yīng)，出現(xiàn)橘紅色鈣結(jié)節(jié)，提示成骨誘導(dǎo)成功。⑧鈣結(jié)節(jié)計數(shù)提示共培養(yǎng)組BMSCS的鈣結(jié)節(jié)大而多IIV組鈣結(jié)節(jié)計數(shù)分別為3150±150、3343±114、3485±148、3412±276，II、III、IV組與I組比較有統(tǒng)計學(xué)差異，而共培養(yǎng)組內(nèi)比較無統(tǒng)計學(xué)差異。⑨WESTERNBOLT檢測發(fā)現(xiàn)IIV組BMP2蛋白含量依次增加，分別為0694±0080、0741±0469、0832±0035、0935±0106，II組與IV組、I組與III組有統(tǒng)計學(xué)差異，I組與II組、II組與III組、III組與IV組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論應(yīng)用體外共培養(yǎng)技術(shù)對不同代次骨折大鼠BMSCS共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)1不同代次BMSCS共培養(yǎng)增殖能力較強；2共培養(yǎng)BMSCS能夠向成骨方向分化，成骨分化能力比單代培養(yǎng)細胞強；3共培養(yǎng)技術(shù)可以作為獲得和BMSCS增殖的可靠方法。

簡介：原發(fā)性高血壓，中風(fēng)，缺血性心臟病，肺動脈高壓和其他一些心血管疾病是現(xiàn)代化社會主要引起死亡的病因。雖然在臨床研究中已經(jīng)投入巨資，但這些疾病還未能得到解決。而引起上述疾病的重要因素包含血管張力異常，因此對調(diào)節(jié)平滑肌收縮性的因素的研究是目前的熱門課題。平滑肌的收縮是由粗細肌絲之間的相互滑動形成的，在此過程中，構(gòu)成粗肌絲的肌球蛋白輕鏈磷酸化是啟動粗細肌絲之間滑動的關(guān)鍵步驟。早先的認識認為構(gòu)成細肌絲的肌動蛋白是固定結(jié)構(gòu)，而最近的研究表明，除了肌球蛋白輕鏈磷酸化之外，平滑肌肌動蛋白也處于動態(tài)，肌動蛋白的聚合－解離的過程也在平滑肌張力產(chǎn)生中起重要作用。ABL屬于非受體酪氨酸激酶家族，有證據(jù)表明在非肌肉細胞細胞中，ABL可以通過調(diào)節(jié)肌動蛋白細胞骨架結(jié)構(gòu)而調(diào)節(jié)細胞遷移，伸展，胞緣波動和細胞黏附等活動。而ABL在調(diào)節(jié)平滑肌肌動蛋白骨架結(jié)構(gòu)中的作用及其對于平滑肌張力方面的作用則有待進一步發(fā)掘。目的基于上述理論基礎(chǔ)，本研究采用ABL基因敲除小鼠，對其與野生型小鼠的尾動脈血壓，動脈血管平滑肌層厚度，在收縮刺激后的血管平滑肌肌動蛋白結(jié)構(gòu)，肌球蛋白輕鏈磷酸化變化，及ABL下游因子及相關(guān)收縮蛋白的表達方面進行研究。探討ABL在平滑肌收縮及細胞收縮骨架蛋白中的作用。方法和結(jié)果第1部分、尾動脈血壓測定及血管中層厚度測量。1尾動脈血壓測定。方法采用XBP1000型（KENTSCIENTIFIC公司）無創(chuàng)尾動脈血壓測量系統(tǒng)進行血壓測量。結(jié)果ABL基因敲除組小鼠的尾動脈血壓較野生型小鼠的尾動脈血壓為低，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。2動脈血管中層厚度測量。方法取二氧化碳小室安樂死后的小鼠的頸動脈，冰凍切片后以相差顯微鏡拍照，并在專業(yè)軟件下測量動脈中層厚度。結(jié)果ABL基因小鼠和野生小鼠頸動脈中層管壁厚度相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。第2部分、收縮刺激后，動脈血管肌球蛋白輕鏈磷酸化檢測和肌動蛋白聚合狀態(tài)檢測。1動脈血管肌球蛋白輕鏈磷酸化檢測分組A野生型對照組；B野生型脫羥腎上腺素刺激組；CABL基因敲除型對照組；DABL基因敲除型脫羥腎上腺素刺激組。方法取二氧化碳小室安樂死后的小鼠的頸動脈，股動脈，主動脈等，以特定濃度脫羥腎上腺素刺激一定時間后以免疫印跡方法測定肌球蛋白輕鏈磷酸化程度。結(jié)果在脫羥腎上腺素刺激后，ABL基因敲除型小鼠動脈和野生型小鼠動脈肌球蛋白輕鏈磷酸化水平無明顯差異。2動脈血管肌動蛋白聚合狀態(tài)檢測分組A野生型對照組；B野生型脫羥腎上腺素刺激組；C野生型血管緊張素2刺激組；DABL基因敲除型對照組；EABL基因敲除型脫羥腎上腺素刺激組；FABL基因敲除型血管緊張素2刺激組。方法取二氧化碳小室安樂死后的小鼠的頸動脈和腸系膜動脈，以特定濃度脫羥腎上腺素和血管緊張素2刺激一定時間后以免疫熒光方法測定肌動蛋白聚合程度。結(jié)果經(jīng)以特定濃度脫羥腎上腺素和血管緊張素2刺激后，ABL敲除小鼠動脈血管由刺激引起的肌動蛋白聚合程度較野生型小鼠動脈血管降低，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。第3部分收縮刺激后CRK相關(guān)底物磷酸化水平檢測和收縮相關(guān)蛋白表達水平測定。1CRK相關(guān)底物CAS磷酸化水平檢測分組A野生型對照組；B野生型脫羥腎上腺素刺激組；C野生型血管緊張素2刺激組；DABL基因敲除型對照組；EABL基因敲除型脫羥腎上腺素刺激組；FABL基因敲除型血管緊張素2刺激組。方法取二氧化碳小室安樂死后的小鼠的主動脈和腸系膜動脈和股動脈，以特定濃度脫羥腎上腺素和血管緊張素2刺激一定時間后，以免疫印跡方法測定CAS磷酸化程度。結(jié)果經(jīng)以特定濃度脫羥腎上腺素和血管緊張素2刺激后，在野生小鼠動脈血管中CAS磷酸化程度增加，而ABL敲除小鼠動脈血管CAS磷酸化增加程度較野生型小鼠動脈血管降低，結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。2收縮相關(guān)蛋白表達水平檢測。方法取二氧化碳小室安樂死后的小鼠的主動脈和腸系膜動脈和股動脈及肺組織。以免疫印跡方法測定PAXILLIN，VINCULIN和肌動蛋白在血管組織中的水平。以定量逆轉(zhuǎn)錄PCR實驗檢測PAXILLIN，VINCULIN和GAPDH的MRNA表達水平檢測。結(jié)果在ABL基因敲除小鼠動脈血管中，PAXILLIN和VINCULIN蛋白水平較野生型小鼠動脈血管中相應(yīng)蛋白水平低，并且在ABL基因敲除小鼠肺組織中PAXILLIN和VINCULIN的MRNA水平也較野生型小鼠動脈血管中相關(guān)基因MRNA水平低。結(jié)論1ABL基因敲除小鼠尾動脈血壓較野生型小鼠尾動脈血壓偏低。且ABL基因敲除小鼠和野生型小鼠的頸動脈中層厚度相同，提示ABL不影響平滑肌層的整體結(jié)構(gòu)和厚度。2ABL基因敲除小鼠與野生型小鼠相比，其動脈血管在受到收縮刺激后肌動蛋白聚合的增加水平降低，而肌球蛋白輕鏈磷酸化水平則與野生型無明顯差異，提示ABL對于平滑肌張力調(diào)節(jié)是通過影響肌動蛋白細胞骨架結(jié)構(gòu)而發(fā)生作用。3ABL基因敲除小鼠與野生型小鼠相比，其動脈血管在受到收縮刺激后CAS磷酸化增加水平降低，提示ABL可能通過調(diào)節(jié)CAS磷酸化水平來調(diào)節(jié)肌動蛋白細胞骨架結(jié)構(gòu)。4ABL基因敲除小鼠與野生型小鼠相比，動脈血管和非肌性組織中肌動蛋白細胞骨架結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白PAXILLIN和VINCULIN的表達水平降低，且相應(yīng)MRNA水平也降低，提示ABL對細胞骨架結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié)機制可能有對于肌動蛋白細胞骨架結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白表達水平調(diào)控的參與。

簡介：目的1通過動物實驗觀察骨重建型股骨柄假體的生物學(xué)固定效果2觀察骨泥植入對骨重建型股骨頭假體的影響3探討多孔表面假體多孔層排列方式不同對骨泥植入效果的影響四結(jié)論1骨重建假體多孔表面多層鈦網(wǎng)設(shè)計能降低制作難度且對假體影響少2多層鈦網(wǎng)設(shè)計能降低假體彈性模量且不易脫落適應(yīng)髓腔能力強有利于骨長入3增加假體表面孔隙大小、深度、溝通率、加以配合術(shù)中自體植骨動物實驗觀察骨長入效果滿意4Ⅰ型假體設(shè)計植骨方便骨長入效果滿意5碎骨泥植入能增強假體骨長入效果且有助于骨重建6多孔層內(nèi)植骨能誘導(dǎo)骨長入孔隙深層且新生骨立體交聯(lián)完全生物學(xué)固定效果滿意7假體植入后股骨近端骨反應(yīng)對假體的生物學(xué)固定是有利的8該實驗中骨重建假體能達到骨重建及較好的生物學(xué)固定效果9早期負重可能對骨重建假體的生物學(xué)固定效果影響不大10骨重建型假體植入后對宿主骨代謝無明顯影響

簡介：福建中醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征上氣道開大肌的凋亡與失神經(jīng)變化姓名龔宏勛申請學(xué)位級別碩士專業(yè)中西醫(yī)結(jié)合臨床指導(dǎo)教師陳賢明20080501結(jié)論1OSAHS患者上氣道開大肌存在凋亡和失神經(jīng)變化，隨著病情的加重，失神經(jīng)和凋亡的程度也越嚴重。2痰濕體質(zhì)OSAHS患者上氣道開大肌凋亡和失神經(jīng)的程度比非痰濕體質(zhì)OSAHS患者嚴重，推測痰濕體制在OSAHS形成發(fā)展過程中發(fā)揮重要的促進作用。關(guān)鍵詞T阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征神經(jīng)細胞粘附分子鈣蛋白酶1凋亡相關(guān)蛋白BAX、BCL2失神經(jīng)凋亡中醫(yī)痰濕體質(zhì)2

簡介：由靜電紡絲技術(shù)制備出的生物高分子納米纖維材料與細胞外基質(zhì)的形態(tài)結(jié)構(gòu)相似具有極大的比表面積和高孔隙率等特點已被用于制備組織工程支架、創(chuàng)傷敷料、藥物緩釋載體等生物醫(yī)用材料。將靜電紡絲納米纖維材料用于口腔牙周組織缺損的治療不僅能夠阻止上皮結(jié)締組織長入缺損區(qū)域還可以促進牙周組織的再生。然而現(xiàn)有單一組分的材料很難滿足口腔臨床治療的復(fù)雜性因而要求通過復(fù)合不同組分和不同結(jié)構(gòu)的納米纖維材料來實現(xiàn)組織／骨引導(dǎo)再生。此外結(jié)合骨組織自愈合的特性由靜電紡絲制備三維復(fù)合納米纖維支架材料來模擬骨再生過程中形成的網(wǎng)狀骨可促進新生組織與支架材料的整合加速新骨的生長縮短愈合時間。本文利用靜電紡絲技術(shù)制備新型齒科用引導(dǎo)組織再生GTR復(fù)合納米纖維材料。通過進行材料組分、表面修飾、力學(xué)性能以及細胞相容性等方面的研究評價這類新型生物材料用于引導(dǎo)組織／骨再生的可行性和優(yōu)越性。首先通過采用混合溶劑體系優(yōu)化了聚乳酸PLLA納米纖維膜和聚乳酸／羥基磷灰石HA復(fù)合納米纖維膜的靜電紡絲制備工藝不僅使納米纖維的直徑明顯降低而且還改善了靜電紡絲過程的穩(wěn)定性。經(jīng)過熱牽伸處理后PLLA納米纖維的直徑隨牽伸比的增大而逐漸減小直徑分布變窄纖維間隙變小而平均拉伸強度和拉伸模量最高分別達到了103MPA和183GPA。經(jīng)過堿液刻蝕和浸漬明膠水溶液處理后在PLLA納米纖維和PLLA／HA納米纖維的表面均勻地包覆了一層明膠膜材料的水接觸角均由130°下降到60°左右親水性明顯得到改善。其次通過提高紡絲體系的溫度成功地由明膠水溶液通過靜電紡絲制備出了明膠納米纖維膜材料。適宜的溫度是實現(xiàn)明膠水溶液進行靜電紡絲的首要條件通過調(diào)整紡絲溫度、明膠水溶液的濃度和其它工藝參數(shù)可獲得不同直徑的明膠納米纖維材料。采用1乙基3二甲基氨基丙基碳二亞胺EDC和N羥基琥珀酰亞胺NHS對明膠納米纖維膜材料進行化學(xué)交聯(lián)處理改善了材料的耐水性、熱穩(wěn)定性和力學(xué)抗拉性能。雖然在交聯(lián)過程中明膠納米纖維發(fā)生了收縮和粘連現(xiàn)象但膜的孔隙仍得以維持。交聯(lián)明膠纖維膜吸水溶脹后表現(xiàn)出良好的彈性有利于覆蓋缺損區(qū)域避免發(fā)生破裂而導(dǎo)致修復(fù)失敗。此外在分散劑泊洛沙姆POLOXAMERF68的作用下由混合了磷酸三鈣ΒTCP納米粒子的明膠水溶液還制備出明膠／ΒTCP混雜納米纖維膜材料ΒTCP納米粒子被包裹在明膠納米纖維上并均勻分散。通過進一步將上述納米纖維膜材料進行優(yōu)化組合可設(shè)計并制備出多層復(fù)合納米纖維引導(dǎo)組織再生膜材料表層采用致密的聚乳酸納米纖維作為物理屏障以阻隔牙齦成纖維細胞進入缺損區(qū)域；中間層采用牽伸取向的聚乳酸平行纖維提供足夠的力學(xué)強度防止材料破裂；以疏松多孔的明膠／磷酸鈣鹽雜化納米纖維作為底層實現(xiàn)引導(dǎo)組織／凰再生的功能。為了模仿天然網(wǎng)狀骨的成分與結(jié)構(gòu)本文將靜電紡絲技術(shù)與溶膠凝膠技術(shù)相結(jié)合通過調(diào)整初始鈣磷比控制反應(yīng)體系PH值、紡絲液組成和燒結(jié)溫度成功制備出高純度和高結(jié)晶度的ΒTCP納米纖維支架材料并通過浸漬法在ΒTCP納米纖維的表面涂覆膠原等天然聚合物不僅提高支架材料的整體穩(wěn)定性而且具有促進成骨類細胞的黏附、增殖及分化的生物學(xué)活性有望進一步提高骨再生效率。本文最后對上述制備的復(fù)合納米纖維膜及納米纖維支架材料進行了細胞毒性試驗MTT實驗和人牙周膜細胞HPDLCS及成骨樣細胞MG63的體外復(fù)合培養(yǎng)實驗等生物相容性檢測。MTT檢測結(jié)果顯示第7天時PLLA／HA組HPDLCS的活細胞數(shù)均大于PLLA組有顯著性差異。交聯(lián)后的明膠納米纖維膜明顯能夠促進HPDLCS細胞的增殖并隨著時間推移細胞活性增加。ΒTCP／膠原納米纖維支架組的細胞數(shù)量在第5天時明顯高于ΒTCP納米纖維材料組。通過掃描電鏡觀察不同表面形貌及不同組分的材料上細胞黏附與增殖情況并結(jié)合復(fù)合培養(yǎng)的石蠟切片觀察綜合評價這兩種生物材料的細胞相容性。觀察結(jié)果顯示所有制備的納米纖維材料均能使細胞很好地黏附并且實現(xiàn)增殖在優(yōu)化后的PLLA和PLLA／HA納米纖維膜上PLLA／HA組較PLLA組更有利于HPDLCS的生長；石蠟切片結(jié)果顯示熱牽伸后的PLLA平行纖維膜組有良好的阻隔效應(yīng)細胞僅聚集在膜的表面；HPDLCS在明膠纖維膜表面均勻分布細胞生長狀況良好；MG63與ΒTCP／膠原納米纖維支架復(fù)合培養(yǎng)24小時后的生長狀態(tài)明顯優(yōu)于ΒTCP組石蠟切片可見ΒTCP／膠原復(fù)合纖維支架組有更多的細胞浸潤到支架內(nèi)部。綜上所述上述由靜電紡絲所制得復(fù)合納米纖維膜材料和支架材料均具有良好的生物相容性和力學(xué)適用性有望成為新一代納米復(fù)合生物材料用于口腔臨床的引導(dǎo)組織屑再生治療。

簡介：2QQ劍堡趔亙皿痙奎墾耋簋麈控墊達查迥查論文作者簽名翻堇蘊指導(dǎo)教師簽名論文評閱人1篋蘊浙江雀生醫(yī)院主焦醫(yī)婭亟生昱垣2評閱人2昌文浙江太堂阻屬邵逸去醫(yī)院副主任醫(yī)婭2評閱人3韭鏈堡浙江太堂附屬邳逸去醫(yī)院副主任醫(yī)短2答辯委員會主席陳眉浙江省蟲醫(yī)院主任醫(yī)痖委員1矍奎燕浙江太堂附屬筮二醫(yī)院主任醫(yī)痖≥委員2梁齷浙江太堂附屬筮二醫(yī)院副主任醫(yī)啞≥委員3奎霞浙江太堂附屬筮二醫(yī)院副主任醫(yī)垣≥委員4邵主摳逝江太堂附屬邳逸去醫(yī)院副主任醫(yī)垣≥委員5浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文致謝致謝首先，我要衷心感謝我的導(dǎo)師胡興越教授對我無私的幫助和悉心的指導(dǎo)；感謝胡老師在臨床工作和科研方面對我的悉心教導(dǎo)。導(dǎo)師崇高的醫(yī)德，精益求精的工作作風(fēng)，淵博的理論知識，豐富的臨床經(jīng)驗和忘我的工作精神都給我留下了深刻的印象，使我受益終生。其次深深感謝邵逸夫醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科的全體老師，感謝王瑾老師、呂文老師、邵宇權(quán)老師、張錦華老師、孫毅老師、張力三老師、蔣紅老師、盧佩琳老師、江云老師、徐曉燕老師、李文玉老師、桂雅星老師、陳麗麗老師、張文穎老師及張丹老師，感謝他們在臨床工作期間給我的幫助與指導(dǎo)，讓我能夠得到充分鍛煉與成長。再次，我要感謝王莉師姐、夏萍師姐，陳寅同學(xué)，感謝她們在臨床工作及日常生活上的關(guān)心和鼓勵，尤其感謝陳寅在論文準(zhǔn)備階段及生活學(xué)習(xí)上對我的支持與幫助。感謝所有2010級的碩士研究生同學(xué)三年來對我的幫助，我們的友誼將長存。最后，我要感謝我的父母，是他們無私的愛和包容讓我順利完成學(xué)業(yè)。再次向所有幫助和關(guān)心我的老師、同學(xué)和朋友們致以最誠摯的謝意。