簡(jiǎn)介：學(xué)校代碼10126分類號(hào)學(xué)號(hào)三三Q墨Q壘Z“J口锎丐論文題目MTOR信號(hào)通路在牛乳腺上皮細(xì)胞甘油三脂和脂肪酸合成中的作用學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院專業(yè)微生物學(xué)研究方向基因工程姓名郭志新指導(dǎo)教師王志鋼教授2016年5月30日內(nèi)蒙古大學(xué)碩士學(xué)位論文MTOR信號(hào)通路在牛乳腺上皮細(xì)胞甘油二M月目W個(gè)U月日W肪酸合成中的作用摘要乳脂肪含量與組成是構(gòu)成牛奶重要營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的主要物質(zhì)基礎(chǔ)之一。牛乳脂肪的主要成分是甘油三酯，乳腺細(xì)胞以細(xì)胞內(nèi)合成和胞外攝取兩種形式獲得脂肪酸并進(jìn)一步合成甘油三酯。乳脂合成過(guò)程受到乳腺細(xì)胞內(nèi)外營(yíng)養(yǎng)因素和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)控，其中哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白THEMAMMALIANTARGETOFRAPAMYCIN，MTOR信號(hào)通路起著重要的作用。奶牛乳腺炎是一種奶牛常見(jiàn)病，影響牛奶中甘油三酯含量和脂肪酸的組成，無(wú)乳鏈球菌俗AGALACTIAE是奶牛乳腺炎的重要病原體之一。本研究以奶牛乳腺上皮細(xì)胞為模型，研究在胰島素刺激條件下和無(wú)乳鏈球菌侵染時(shí)，細(xì)胞中甘油三酯和脂肪酸合成的變化情況，并對(duì)MTORII號(hào)通路在其中所起作用進(jìn)行初步探討。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)乳汁分離法得到純化的奶牛乳腺上皮細(xì)胞，1通過(guò)抑制劑RAPAMYCIN和RNA干擾技術(shù)抑制MTOR信號(hào)通路活性，或過(guò)表達(dá)RHEB激活MTOR信號(hào)通路，WESTERNBLOT檢測(cè)甘油三酯合成關(guān)鍵酶的表達(dá)、ELISA檢測(cè)甘油三酯含量以及軟質(zhì)酸、DHA的變化；2胰島素刺激奶牛乳腺上皮細(xì)胞，ELISA檢測(cè)甘油三脂含量變化，GCMS檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)37種脂肪酸含量的變化；3無(wú)乳鏈球菌侵染奶牛乳腺上皮細(xì)胞，ELISA檢測(cè)甘油三脂含量變化，OCMS檢測(cè)細(xì)胞N37種脂肪酸含量變化。結(jié)果表明1MTOR信號(hào)通路特異性抑制劑R印AMYCIN顯著抑制奶牛乳腺上皮細(xì)胞的增殖PO01、MTOR信號(hào)通路活性和甘油三脂合成關(guān)鍵酶DGATL的表達(dá)；2100NMRAPAMYCIN處理奶牛乳腺上皮細(xì)胞8H，軟脂酸、DHA和甘油三脂的含量都有明顯下降PO01；3RHEB基因轉(zhuǎn)錄后沉默，降低MTOR信號(hào)通路活性和甘油三脂合成關(guān)鍵酶LIPINL和DGATL的表達(dá)，甘油三脂合成減少PO05；4過(guò)表達(dá)RHEB基因，增強(qiáng)MTORFI號(hào)通路活性和LIPINL和DGATL的T

簡(jiǎn)介：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文中國(guó)荷斯坦奶牛乳鐵蛋白基因多態(tài)性與乳腺炎相關(guān)性的研究姓名孔振興申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師呂文發(fā)20080601一478位點(diǎn)／GAB基因型個(gè)體的乳蛋白率、乳脂率顯著高于AA基因型、BB基因型個(gè)體。因此，A等位基因是優(yōu)良的等位基因。一916位點(diǎn)T／G和一927位點(diǎn)G／A的基N型對(duì)體細(xì)胞評(píng)分、產(chǎn)奶量、乳脂率、乳蛋白率的效應(yīng)檢驗(yàn)不顯著。關(guān)鍵詞奶牛乳腺炎，乳鐵蛋白基因，單核苷酸多態(tài)性，體細(xì)胞評(píng)分11

簡(jiǎn)介：刪舢4分類號(hào)學(xué)號(hào)南京應(yīng)黃戈萼學(xué)術(shù)型碩士學(xué)位論文比較重組牛野生型和突變型脂多糖結(jié)合蛋白對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的牛乳腺上皮細(xì)胞的影響李曉娟指導(dǎo)教師王根林教授學(xué)科門類農(nóng)學(xué)專業(yè)名稱動(dòng)物生物工程研究方向動(dòng)物生殖生理與調(diào)控答辯曰期二。一六年五月本研究由國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目編號(hào)31372290，“十二五”國(guó)家科技計(jì)劃課題編號(hào)2011BAD28802，2012BADL2810資助SUPPORTEDBYNATIONALNATURALSCIENCEFOUNDATIONOFCHINANO31372290，NATIONALSUPPORTINGPROJECTSFORSCIENCEANDTECHNIQUESNO、2011BAD28802，2012BADL2810

簡(jiǎn)介：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文蒙藥特潤(rùn)舒都樂(lè)對(duì)小鼠實(shí)驗(yàn)性乳腺炎抗炎免疫作用的影響姓名烏日娜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師王純潔20080601EFFECTSOFMONGOLIANMEDICINETERUNSODOLOLONTHEANTIINFLAMMATORYANDIMMUNEOMODULATORYACTIONOFEXPERIMENTALMASTITISMICEBSTRACT“RERUNSODOLOLISAKINDOFNEWMONGOLIANMEDICINEMADEOFSEVENINGREDIENTS，SUCHASHEZI，JIANGHUANG，HUANGBAIANDHUHUANGLIANETCACCORDINGTOTHETHEORYOFTHEMONGOLIANMEDICINE，ITCOULDANTIPYETIC，HOTANDDRY，DIMINISHINFLAMMATION，DETUMESCENCE，REGULATETHEIMMUNEABILITYANDHASSOMEOTHERFUNCTIONSTOSTUDYTHEANTIINFLAMMATORYANDIMMUNOLOGYMECHANISMINPHARMOCOLOGYOFITONTHEMASTITIS，THEMEDICINEEFFECTOFITONTHEANTIBIOSIS，IMMUNITYANDTHEIMMUNOLOGICALFUNOTIONONTHEEXPERIMENTALMICEANDTHETOXICOLOGYWEREPRIMARILYSTUDIED，WHICHPROVIDESCLINICALINFORMATIONFORITSUSAGETHEBACTERIOSTASISCIRCLEDIAMETEROFL5SINGLEMEDICINETOESCHERICHIACOLIWEREDETERMINEDBYOXFORDCUPLAWTHEMINIMALINHIBITORYCONCENTRATIONMICANDMINIMALBACTERICIDALCONCENTRATIONMBCOFTERUNSODOLOLTOESCHERIEHIACOLIWEREEXAMINEDINVITROBYTWOTIMESDILUTIONMETHODTHEANTIBACTERIALEFFECTOFTERUNSODOLOLONTHEMICEINFECTEDBYESCHERICHIACOLIWASALSOOBSERVEDAFTERMICEWEREGIVENDIFFERENTDOSESOFTERUNSODOL01THERESULTSSHOWED8KINDSOFL5SINGLEMONGOLIANMEDICINESHADSIGNIFICANTINHIBITINGEFFECTSONESCHERICHIACOLI，BACTERIOSTASISCIRCLEDIAMETERWASBIGGERTHANL0RAM，ACHIEVEDL6MMMOSTGREATLYTERUNSODOLOLCOMPOUNDPRESCRIPTIONMADEOF7SINGLEMEDICINEOFL5SINGLEMEDICINEABOVEINVITROHADTHEGOODBACTERIOSTASISFUNCTION，THEMICANDTHEMBCOFITFORTHECOLIBACILLUSWAS0259／MLAND059／MIRESPECTIVELYTHEINFECTIOUSMOUSESURVIVALRATEWASSIGNIFICANTLYADVANCEDINTAKINGORALLYTHEDIFFERENTDOSAGESTERUNSODOL01THEMODELOFTHEMAMMITISOFTHEMICEINDUCEDBYTHECOLIBACILLUSWASMADETHENTHEEFFECTOFITONTHEBLOODCELLSANDTHEMAMMARYGLANDPATHOLOGICALCHANGESOFTHEEXPERIMENTALMICEWEREEXAMINED，THERESULTSSHOWEDTHEINFILTRATIONOFTHEPMNINTHEINFECTEDMAMMARYGLANDWEREINCREASEDATFIRSTANDDECREASEDTHENINORALTAKINGMEDICINEGROUP，TOENGULFBACTERIAINTIME，DECREASINGOFTHEBACTERIADAMAGEOFTHEINFCOTEDTISSUEANDSHORTENINGOF’THEINFECTIONTIME，WHICHSHOWEDCERTAINEFFECTONTHE。PROTECTIONOFTHEGLANDFROMTHE

簡(jiǎn)介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO1206062DISSERTATIONFORTHEDOCTORALDEGREE1433丫REGULATESLIPOPOLYSACCHARIDEINDUCEDLLPOPOLVSACCNARLDEINFLAMMATORYRESPONSESANDLACTATIONINDAIRYCOWMAMMARYEPITHELIALCELLSCANDIDATELIULIXINSUPERVISORPROFLIQINGZHANGDEGREECATEGORYDOCTOROFAGRICULTURECOLLEGECOLLEGEOFVETERINARYMEDICINEFIRSTLEVELDISCIPLINEVETERINARYMEDICINESECONDLEVELDISCIPLINANIMALBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYHARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)博士學(xué)位論文341433Y對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS炎癥反應(yīng)的影響41341LPS對(duì)DCMECS中14331，表達(dá)的影響41342DCMECS中真核表達(dá)載體PGCMV／IRES／EGFP／14331，的檢測(cè)4234314337超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS炎性因子分泌的影響4334414331，超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECSTLR4蛋白表達(dá)的影響4734514331，超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECSNFRB信號(hào)通路的影響4834614331，超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECSMAPK信號(hào)通路的影響503514331，超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS活性及其泌乳的影響5235114331，超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS活性和增殖能力的影響523521433丫超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS凋亡的影響533531433Y超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS泌乳功能的影響563541433丫超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMEC泌乳相關(guān)基因表達(dá)的影響～5735514331，超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMEC乳脂肪合成關(guān)鍵酶活性的影響6035614331，超表達(dá)對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMEC泌乳相關(guān)蛋白表達(dá)的影響613614331，基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS活性及其泌乳的影響62361最佳干擾片段和干擾時(shí)間的篩選6236214337RNA沉默效率633631433丫基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS活性和增殖能力的影響643641433Y基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS凋亡的影響653651433丫基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS泌乳功能的影響6836614331，基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS泌乳相關(guān)基因表達(dá)的影響6936714331，基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS乳脂肪合成關(guān)鍵酶活性的影響7236814331，基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS泌乳相關(guān)蛋白表達(dá)的影響734討論7541LPS對(duì)DCMECS的毒性作用7542LPS對(duì)DCMECS泌乳的影響76421LPS對(duì)DCMECS泌乳功能的影響76422LPS對(duì)DCMECS泌乳相關(guān)信號(hào)通路的影響774314331，蛋白對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS炎癥反應(yīng)的保護(hù)作用78431LPS作用DCMECS對(duì)相關(guān)炎癥因子及1433丫蛋白的影響7843214331，蛋白抑制LPS誘導(dǎo)的DCMECS分泌炎性細(xì)胞因子的機(jī)理79441433丫超表達(dá)和基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS活性和增殖的影響8L4514331，超表達(dá)和基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS泌乳的影響814511433丫超表達(dá)和基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS泌乳功能的影響8145214331，超表達(dá)和基因沉默對(duì)LPS誘導(dǎo)的DCMECS泌乳相關(guān)信號(hào)通路的影響824614331，調(diào)控LPS誘導(dǎo)的DCMECS炎癥反應(yīng)與泌乳的示意圖825結(jié)侖84Ⅱ

簡(jiǎn)介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO130610446DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREEMIR1423PINFLUENCESTHEPROLIFERATIONOFMCF10ABYREGULATINGTARGETGENECANDIDATEWANGYUANSUPERVISORPROFWANGCHUNMEIDEGREECATEGORYMASTEROFAGRICULTURECOLLEGECOLLEGEOFVETERINARYMEDICINEFIRSTLEVELDISCIPLINEVETERINARYMEDICINESECONDLEVELDISCIPLINEBASICVETERINARYMEDICINEHARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文33MIR1423P基因沉寂對(duì)乳腺上皮細(xì)胞MCF10A的影響26331活細(xì)胞RNA納米檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)MIR1423P沉寂后MIR1423P表達(dá)26332MIR1423PINHIBITOR對(duì)乳腺上皮細(xì)胞尸舢，基因表達(dá)的影響27333MIR1423PINHIBITOR對(duì)乳腺上皮細(xì)胞尸刪J基因及增殖的相關(guān)通路蛋白的影響28335MIR1423PINHIBITOR對(duì)乳腺上皮細(xì)胞增殖能力的影響2934尸舢J沉寂后對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的影響30341P即Ⅳ，J干擾片段的選擇30342熒光定量PCR檢測(cè)PTPNLLMRNA表達(dá)31343檢驗(yàn)尸即Ⅳ，J基因抑制后蛋白的表達(dá)變化324討論3341MIR1423P檢測(cè)及靶基因篩選及驗(yàn)證33411MIR1423P靶基因的篩選33412MIR1423P基因的檢測(cè)3342MIR1423P對(duì)乳腺上皮細(xì)胞增殖及相關(guān)信號(hào)通路蛋白的影響345結(jié)侖36型【謝37參考文獻(xiàn)38附錄44攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文45II

簡(jiǎn)介：CLASSIFLEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO130610438DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREECULTUREOFMAMMARYEPITHELIALCELLSANDIDENTIFICATIONOFMAMMARYSTEMCELLSCANDIDATEHAOYUMENGSUPERVISORPROFLIQINGZHANGDEGREECATEGORYMASTEROFAGRICULTURECOLLEGECOLLEGEOFVETERINARYMEDICINEFIRSTLEVELDISCIPLINEVETERINARYMEDICINESECONDLEVELDISCIPLINEBASICVETERINARYMEDICINEHARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)碩士學(xué)位論文41奶牛乳腺上皮細(xì)胞的基本特征26411奶牛乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定26412奶牛乳腺上皮細(xì)胞的生物學(xué)特性2742奶牛乳腺上皮干細(xì)胞的鑒定28421FNDC3B和PROCR是新型乳腺千／祖細(xì)胞標(biāo)志28422奶牛乳腺上皮細(xì)胞群體中的干細(xì)胞2843添加黃苷和IGFI對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞群體的影響295結(jié)論30至殳謝31參考文獻(xiàn)32附錄39攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文40Ⅱ

簡(jiǎn)介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO130910797DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREEMIRNASANDTHEIRTARGETGENESFORREGULATINGMILKQUALITYINDAIRYCOWMAMMARYGLANDCANDIDATEJINJINGSUPERVISORPROFLIQINGZHAN91JROTL1MGZNANGDEGREECATEGORYMASTEROFSCIENCECOLLEGECOLLEGEOFLIFESCIENCEFIRSTLEVELDISCIPLINEBIOLOGYSECONDLEVELDISCIPLINEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGY一一HARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)壩士學(xué)位論文341SMALLRNA測(cè)序與交聯(lián)免疫沉淀測(cè)序聯(lián)合分析28342交集靶基因的GO和通路分析。30343MIRNA和MRNA互作網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建314討論3341奶牛乳腺中乳品質(zhì)調(diào)控相關(guān)MIRNAS3342奶牛乳腺中乳品質(zhì)調(diào)控相關(guān)MIRNAS的靶基因33421奶牛乳腺中乳品質(zhì)調(diào)控相關(guān)MIRNAS靶基因的鑒定33422奶牛乳腺中乳品質(zhì)調(diào)控相關(guān)MIRNAS靶基因的確定345結(jié)論36致謝37參考文獻(xiàn)38附錄44攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文45II

簡(jiǎn)介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO130910798DISSERTATIONFORTHEMASTERDEGREESTUDYOFTHEEFFECTOFLATLONMILKL●L●OOROTEINSYNTHESISLNMAMMARV2LAND0I1●NALRVCOWCANDIDATEXINGWEINANSUPERVISORAEOLINYB1NYEDEGREECATEGORYMASTEROFSCIENCECOLLEGECOLLEGEOFLIFESCIENCEFIRSTLEVELDISCIPLINEBIOLOGYSECONDLEVELDISCIPLINEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYHARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)碩士學(xué)位論文311奶牛乳腺組織中LATLMRNA的表達(dá)17312奶牛乳腺組織中LATL蛋白水平的表達(dá)17313奶牛乳腺組織中LATL的表達(dá)部位1832LATI對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞乳蛋白合成的影響21321奶牛乳腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)和鑒定2L322LATL真核表達(dá)載體的構(gòu)建一22323LATL過(guò)表達(dá)對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞中乳蛋白合成的影響23324LATL基因沉寂對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞乳蛋白合成的影響2433ROTOR信號(hào)通路對(duì)LATL基因表達(dá)的影響274討論2941奶牛乳腺組織中LATL的表達(dá)與定位分析2942LATL基因?qū)δ膛Ｈ橄偕掀ぜ?xì)胞乳蛋白合成的影響2943MTOR信號(hào)通路對(duì)奶牛乳腺上皮細(xì)胞中LATL表達(dá)的影響305結(jié)論3L致謝32參考文獻(xiàn)33攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文37

簡(jiǎn)介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224NO1299010DISSERTATIONFORTHEDOCTORALDEGREE1433TREGULATESLACTOGENESISTHROUGHMTORPATHWAYINDAIRYCOWMAMMARYEPITHELIALCELLSCANDIDATENAGAMKHUDHAIRMAHDISUPERVISORPROFXUEJUNGAODEGREECATEGORYDOCTOROFSCIENCECOLLEGECOLLEGEOFLIFESCIENCEFIRSTLEVELDISCIPLINEBIOLOGYSECONDLEVELDISCIPLINEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYHARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)博士學(xué)位論文244翻譯后修飾35245亞細(xì)胞定位352461433丫的系統(tǒng)發(fā)育一353結(jié)果與分析3631原代培養(yǎng)及鑒定牛乳腺上皮細(xì)胞3632氨基酸和激素對(duì)DCMECSL4337表達(dá)和泌乳的影響38321氨基酸和激素對(duì)DCMECSL433丫表達(dá)的影響38322氨基酸和激素對(duì)DCMECS泌乳的影響3833共聚焦分析1”3丫表達(dá)40341舢33T基因過(guò)表達(dá)分析一40341PGCMVIRESEGFP14337表達(dá)載體構(gòu)建40342細(xì)胞傳染42343PGCMVIRESEGFP1鈣3T瞬時(shí)轉(zhuǎn)染42344PGCMVIRESEGFP14337穩(wěn)定轉(zhuǎn)染4535L4_33丫基因沉寂47361433T通過(guò)MTOR／S6K1信號(hào)通路調(diào)節(jié)DCMEC乳合成的機(jī)制4937生物信息學(xué)分析一503711鈣3丫結(jié)構(gòu)基序、結(jié)構(gòu)域和翻譯后修飾50372二級(jí)結(jié)構(gòu)533731433Y系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)5537414337的亞細(xì)胞定位563751433丫蛋白的基因本體分析563761433Y的分子質(zhì)量和等電點(diǎn)584討侖5941乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)、純化和鑒定594214337的亞細(xì)胞定位59431433“／基因在DCMECS中的表達(dá)60441433對(duì)DCMECS信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響6L4514337的生物信息學(xué)分析625結(jié)J侖65致謝66參考文獻(xiàn)67縮略詞附錄78攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文80Ⅱ

簡(jiǎn)介：CLASSIFIEDINDEXCONFIDENTIALYES／NONOCODE10224N0140920875DISSERTATIONFORTHEPROFESSIONALMASTERDEGREEPRIMARYBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSWEREISOLATED，CULTUREDANDPASSAGEDTECHNOLOGYCANDIDATELVWEISUPERVISORGAOXUEJUNBUDENGPANDEGREECATEGORYMASTEROFENGINEERINGCOLLEGECOLLEGEOFLIFESCIENCESRESEARCHFIELDBIOLOGYENGINEERING一一一一STUDYMODEFULLTIMEHARBINCHINAJUNE2016東北農(nóng)業(yè)大學(xué)工程碩士學(xué)位論文33奶牛乳腺上皮細(xì)胞光學(xué)顯微鏡觀察2134奶牛乳腺上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的鑒定2235奶牛乳腺上皮細(xì)胞傳代培養(yǎng)2336奶牛乳腺上皮細(xì)胞的凍存和復(fù)蘇2637奶牛乳腺上皮細(xì)胞的增殖2738奶牛乳腺上皮細(xì)胞乳糖含量測(cè)定3039奶牛乳腺上皮細(xì)胞甘油三酯含量測(cè)定31310奶牛乳腺上皮細(xì)胞酪蛋白含量測(cè)定324討論3141原代奶牛乳腺上皮細(xì)胞的分離、純化和傳代3342奶牛乳腺上皮細(xì)胞的泌乳和增殖3343奶牛乳腺上皮細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇345結(jié)論35至炙謝36參考文獻(xiàn)37攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文42II

簡(jiǎn)介：廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文沼澤型水牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系建立及永生化研究姓名朱佳杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師蔣和生20080701NCBI上發(fā)表的奶牛雌激素受體Q基因和催乳素受體基因CDNA序列，設(shè)計(jì)兩對(duì)特異性引物，用RTPCR從永生化水牛乳腺上皮細(xì)胞系擴(kuò)增水牛雌激素受體Q基因和催乳素受體基因部分序列。結(jié)果擴(kuò)增出雌激素受體Q基因序列為171BP，催乳素受體基因序列為253BP，與奶牛的同源性分別為100％和992％。證實(shí)了永生化水牛乳腺上皮細(xì)胞與原代細(xì)胞一樣，仍能表達(dá)雌激素受體和催乳素受體。采用MTT法檢測(cè)不同濃度雌二醇對(duì)水牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果得到濃度為5MG／L處理組的增殖效果最佳，差異顯著P005。以上結(jié)果表明1用組織塊接種法比酶消化法更易獲得原代的水牛乳腺上皮細(xì)胞；2經(jīng)過(guò)熒光免疫細(xì)胞染色、Q一酪蛋白PCR鑒定和染色體核型分析證實(shí)所獲得的細(xì)胞為水牛乳腺上皮細(xì)胞，且具有正常分泌酪蛋白的功能；3通過(guò)DNA磷酸鈣沉淀法轉(zhuǎn)染使SV40在水牛乳腺上皮細(xì)胞中得到表達(dá)，細(xì)胞的端粒酶活性高于未轉(zhuǎn)染前，成功建立了永生化沼澤型水牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系；4經(jīng)過(guò)SV40轉(zhuǎn)染后水牛乳腺上皮細(xì)胞仍表達(dá)雌激素受體Q和催乳素受體；5適當(dāng)濃度的雌二醇可以促進(jìn)水牛乳腺上皮細(xì)胞的增殖，而高濃度的雌二醇則會(huì)抑制水牛乳腺上皮細(xì)胞增殖，以濃度為5MG／L時(shí)細(xì)胞的增殖效果最佳。關(guān)鍵詞水牛乳腺上皮細(xì)胞SV40端粒酶活性檢測(cè)MTT雌激素受體催乳素受體

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文BLGHLF基因轉(zhuǎn)染山羊乳腺上皮細(xì)胞及TSA對(duì)轉(zhuǎn)染基因表達(dá)的影響姓名徐冬蘭申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)臨床獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師成勇20080501揚(yáng)州大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明和版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，本論文不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果。對(duì)本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名淪毒乙簽字日期獷呵鋅鈿11日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)揚(yáng)州大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。學(xué)位論文作者簽名給冬之導(dǎo)師簽名簽字日期膿鈿J7日簽字日期凇年6月J7日

簡(jiǎn)介：西北農(nóng)林科技大學(xué)碩士學(xué)位論文奶山羊乳腺脂肪酸合酶基因表達(dá)的RNA干擾研究姓名曹艷紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)動(dòng)物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師羅軍20080501構(gòu)；100PMOL／L的17P雌二醇可使乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH酶活力的極顯著增強(qiáng)，從而引起乳腺上皮細(xì)胞發(fā)生嚴(yán)重的病理組織形態(tài)性損傷，顯著降低乳腺上皮細(xì)胞中脂肪酸合酶基因的表達(dá)豐度，還能誘發(fā)乳腺上皮細(xì)胞凋亡。3沉默山羊乳腺上皮細(xì)胞脂肪酸合酶基因，可抑制乳腺上皮細(xì)胞的增殖，增加乳腺上皮細(xì)胞的形態(tài)損傷，改變?nèi)橄偕掀ぜ?xì)胞中的脂肪酸組成含量，短鏈脂肪酸的百分含量極顯著下降，中鏈脂肪酸的百分含量顯著升高，長(zhǎng)鏈脂肪酸的百分含量略有變化，并誘發(fā)乳腺上皮細(xì)胞發(fā)生凋亡，產(chǎn)生凋亡小體，同時(shí)，線粒體也出現(xiàn)腫脹，破裂現(xiàn)象。關(guān)鍵詞奶山羊；脂肪酸合酶基因；乳腺上皮細(xì)胞；17P雌二醇；實(shí)時(shí)定量PCR；IⅢA干擾

簡(jiǎn)介：山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌相關(guān)毒力因子的研究姓名王英杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師安利國(guó)仲躋峰20080420山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌相關(guān)毒力因子的研究中文摘要本實(shí)驗(yàn)對(duì)奶牛乳腺炎陽(yáng)性和陰性乳汁進(jìn)行細(xì)菌分離，用金黃色葡萄球菌的特異性檢測(cè)引物檢測(cè)出金黃色葡萄球菌。金黃色葡萄球菌溶血素是一種外毒素，是其主要毒力因子之一，包括Q、B、Y和6毒素。溶血素對(duì)多種哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞有溶血作用，并可作用于平滑肌細(xì)胞，引起乳腺平滑肌收縮、麻痹，引發(fā)牛的壞疽性乳腺炎。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)雙重PCR方法，檢測(cè)山東省內(nèi)20多個(gè)規(guī)?；膛?chǎng)乳腺炎病例中分離得到的金黃色葡萄球菌，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)80％以上的金葡菌存在Q溶血素基因，基因片斷長(zhǎng)704BP；而B溶血素基因比例為59％，片斷大小為496BP。檢測(cè)金黃色葡萄球菌粘附素基因FNBPA和FNBPB，分析奶牛乳腺炎金黃色葡萄球菌臨床分離株纖連蛋白連接蛋白主效基因。利用設(shè)計(jì)合成的特異性引物對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行PCR擴(kuò)增，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室所分離鑒定的金葡菌臨床分離株進(jìn)行雙重PCR檢測(cè)。PCR產(chǎn)物經(jīng)過(guò)電泳成像顯示，分別在524BP和642BP處出現(xiàn)特異性條帶。通過(guò)對(duì)金葡菌臨床分離株雙重PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)95％以上的金葡菌存在粘附素基因FNBPA，而FNBPB基因僅有10％。血漿凝固酶是檢驗(yàn)致病性金黃色葡萄球菌的重要指標(biāo)，它們能使含有抗凝劑的家兔或人的血漿凝固，有助于致病菌抵御宿主體內(nèi)吞噬細(xì)胞和殺菌物質(zhì)的作用。依據(jù)金黃色葡萄球菌血漿凝固酶基因序列，設(shè)計(jì)合成特異性引物，通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增其基因，并將擴(kuò)增基因克隆入T載體，進(jìn)行序列測(cè)定，對(duì)所分離的奶牛乳腺炎病原菌進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示金黃色葡萄球菌擴(kuò)增出特異性條帶，大小為761BP；其他菌株未出現(xiàn)條帶。金黃色葡萄球菌FNBP的抗體不僅可以阻止細(xì)菌的黏附，而且還是一種調(diào)理素，可以促進(jìn)機(jī)體對(duì)細(xì)菌的清除作用。金黃色葡萄球菌的船溶血素是一種胞外毒素，其類毒素對(duì)金黃色葡萄球菌所致的羊乳腺炎有部分保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)利用獲得的基因工程蛋白R(shí)FNBP、MHL及真核表達(dá)質(zhì)粒P刪3JQ級(jí)，混合佐劑免疫實(shí)驗(yàn)小鼠，通過(guò)刪方法檢測(cè)血清中的抗體水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn)所有蛋白疫苗免疫實(shí)驗(yàn)小白鼠在首免后所采集的血清中均檢測(cè)到了特異性抗體，通過(guò)初步