海藻中新型PTP1B抑制劑對db-db糖尿病模型的改善與作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶-1B（PTP1B）是治療2型糖尿病的重要靶點；雙-(2,3-二溴-4,5-二羥基芐基)-醚（BDDE）是從紅藻中分離出來的天然溴酚化合物，體外研究發(fā)現(xiàn)其具有抑制PTP1B的活性，但是它抗糖尿病的作用尚不明確；本課題從分子、細(xì)胞以及動物水平觀察BDDE對2型糖尿病的治療作用及機(jī)制。
　　方法：⑴細(xì)胞實驗建立胰島素抵抗的HepG2肝細(xì)胞模型，MTT法測定 BDDE對HepG2細(xì)胞增殖的影響，糖吸收實驗觀察BD

2、DE對胰島素抵抗細(xì)胞的葡萄糖吸收促進(jìn)作用，蛋白免疫印跡法（western blotting）檢測BDDE對胰島素抵抗細(xì)胞內(nèi)PTP1B、總 IRβ、磷酸化IRβ、總IRS-1、磷酸化IRS1/2、總PI3K、磷酸化PI3K、總Akt以及磷酸化Akt蛋白的表達(dá)水平，探討作用機(jī)制。⑵動物實驗利用2型糖尿病模型小鼠（db/db）研究BDDE體內(nèi)對2型糖尿病的治療作用。記錄小鼠的飲食、飲水以及體重的變化，測定血糖、糖化血紅蛋白（HbA1c）、血清

3、蛋白、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、胰島素、口服葡糖糖耐量，部分肌肉組織研磨后，提取總蛋白，western blotting實驗檢測模型小鼠肌肉組織中PTP1B、總IRβ、磷酸化IRβ蛋白表達(dá)水平，探討作用機(jī)制。
　　結(jié)果：①細(xì)胞實驗BDDE能促進(jìn)胰島素抵抗HepG2細(xì)胞的糖吸收，降低HepG2細(xì)胞表達(dá)PTP1B的水平。BDDE在降低肝細(xì)胞PTP1B蛋白表達(dá)的同時，激活了胰島素信號通路相關(guān)蛋白IRβ/IRS-1/PI3K/A

4、kt的磷酸化表達(dá)。②動物實驗BDDE可顯著降低 db/db小鼠的血糖水平，糖化血紅蛋白水平，改善胰島素抵抗。BDDE能降低db/db小鼠的TG和TC水平。與二甲雙胍相比，BDDE還可以降低db/db小鼠的體重。同時，BDDE降低了小鼠肌肉組織中的PTP1B蛋白表達(dá)量，上調(diào)了磷酸化的IRβ表達(dá)量。
　　結(jié)論：BDDE具有抗2型糖尿病的作用，其作用機(jī)制是抑制PTP1B的活性，激活胰島素信號通路相關(guān)蛋白活性，改善胰島素抵抗，改善血脂代謝