miR-211過表達(dá)改善骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療心肌梗死的療效.pdf

1、背景:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)移植修復(fù)梗死心肌已經(jīng)成為研究的熱點(diǎn)。MSCs遷移到損傷心肌區(qū)域是修復(fù)組織至關(guān)重要的一步，但很多研究均表明經(jīng)血管移植時，遷移到受損區(qū)域的MSCs極少。因此，研究調(diào)控MSCs遷移的相關(guān)機(jī)制至關(guān)重要。我們前期研究證實(shí)，缺氧預(yù)處理能提高M(jìn)SCs的遷移能力，同時缺氧預(yù)處理也能上調(diào)miR-211的表達(dá)。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報道，miR-211能調(diào)控多種腫瘤細(xì)胞的遷移。因此，我們推測miR-211在MSCs遷移過程中起重要作

2、用。本課題的目的就是研究miR-211對MSCs遷移能力的調(diào)控作用及具體機(jī)制。
　　方法和結(jié)果:體外的Transwell遷移實(shí)驗(yàn)提示，miR-211過表達(dá)能提高M(jìn)SCs的遷移能力，而下調(diào)miR-211的表達(dá)能降低MSCs的遷移能力。miR-211過表達(dá)或表達(dá)下調(diào)的雄性MSCs經(jīng)尾靜脈移植到雌性大鼠急性心梗模型中，2天后檢測GFP表達(dá)和SRY基因來定性和定量MSCs遷移到梗死周邊區(qū)的能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示miR-211過表達(dá)能增加MSC

3、s遷移梗死周邊區(qū)的細(xì)胞數(shù)量。心梗28天后，與PBS及MSCs對照組相比，miR-211過表達(dá)的MSCs組大鼠心功能改善，疤痕面積縮小。Targetscan等生物信息學(xué)軟件預(yù)測STAT5A可能是miR-211的靶基因，雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)、RT-PCR和蛋白電泳，證實(shí)miR-211能結(jié)合到STAT5A的3'-UTR區(qū)，調(diào)控STAT5A的轉(zhuǎn)錄。體內(nèi)和體外功能學(xué)實(shí)驗(yàn)提示，上調(diào)STAT5A能抑制MSCs的遷移能力，下調(diào)STAT5A能提高M(jìn)SC

4、s的遷移能力。miR-211過表達(dá)誘導(dǎo)的遷移能力增加，能被STAT5A抑制。根據(jù)文獻(xiàn)報道，STAT3在MSCs的遷移中起到及其重要的作用，且缺氧預(yù)處理也能調(diào)控STAT3的活性。我們預(yù)測STAT3與miR-211可能有相互作用。染色質(zhì)免疫共沉淀和熒光素酶報告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證STAT3可以直接結(jié)合到miR-211的啟動子區(qū)域并能調(diào)控miR-211的表達(dá)。
　　結(jié)論:STAT3/miR-211/STAT5A信號通路在MSCs的遷移過程中起到