單克隆抗體WL5的抗腫瘤活性評(píng)價(jià)及其抗原的鑒定分析.pdf

1、WL5抗體是一種抗人結(jié)直腸癌單克隆抗體,由本實(shí)驗(yàn)室在前期工作中建立并篩選得到的雜交瘤細(xì)胞WL5分泌所得。本課題對(duì)WL5抗體的腫瘤特異性及抗腫瘤活性進(jìn)行了研究,確定了它的特異性抗原,并對(duì)該抗原分子在細(xì)胞粘附和遷移中的作用進(jìn)行了探索。
　　細(xì)胞流式結(jié)果表明WL5抗體可特異性結(jié)合結(jié)直腸癌細(xì)胞HT29、LS180和SW620;在利用組織芯片進(jìn)行的免疫組化實(shí)驗(yàn)中,10例結(jié)直腸癌組織樣本中有9例可被WL5抗體識(shí)別,而與之對(duì)應(yīng)的癌旁組織染色結(jié)果

2、均為陰性,與目前臨床檢測(cè)中常用的CEA單抗相比,WL5抗體顯示出更好的特異性和靈敏性。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)WL5抗體通過抗體介導(dǎo)細(xì)胞依賴的細(xì)胞毒作用(antibodydependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC)殺傷腫瘤細(xì)胞。在裸鼠荷瘤實(shí)驗(yàn)中,WL5抗體治療組的腫瘤體積比生理鹽水治療組減小25％,與常規(guī)劑量的化療藥阿霉素有相近的抗腫瘤效果(腫瘤體積減小22%);同時(shí),使用WL5進(jìn)行治療可避免長(zhǎng)期使用阿霉素引起的心肌

3、病、胃腸粘膜損傷以及骨髓抑制等副作用。利用免疫共沉淀和質(zhì)譜分析,我們鑒定出WL5抗體的特異性抗原為癌胚抗原粘附分子1(carcinoembryonicantigen-relatedcelladhesionmolecule1,CEACAM1),該分子是一種糖蛋白,有可能成為結(jié)直腸癌的新的腫瘤標(biāo)志物和治療靶點(diǎn)。
　　CEACAM1是免疫球蛋白超家族的成員,目前研究人員發(fā)現(xiàn)它具有兩種相反的作用:抑制腫瘤生長(zhǎng)和促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。本研究中,我們

4、發(fā)現(xiàn)CEACAM1可以抑制細(xì)胞粘附并促進(jìn)細(xì)胞遷移:過表達(dá)CEACAM1之后,293-CEACAM1和LOVO/trans-CEACAM1細(xì)胞的粘附能力均有所下降,而CEACAM1干涉表達(dá)的HT29/siRNA-CEACAM1細(xì)胞的粘附能力則明顯提高,此外,細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)表明,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系293-CEACAM1和瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞LOVO/trans-CEACAM1的遷移能力增強(qiáng)。在293-CEACAM1、LOVO/trans-CEACAM1和