右美托咪定對體外循環(huán)大鼠海馬區(qū)TLR4蛋白表達影響.pdf

1、目的:
　　探討右美托咪定預處理對體外循環(huán)大鼠海馬組織中TLR4蛋白表達的影響及其可能的分子機制。
　　方法:
　　雄性SD大鼠64只，重量350～400g，按隨機數字表法分成4組，每組16只，再根據各組設定時間點，每個時間點4只。假手術組（Sham組）:麻醉狀態(tài)下，透光法大鼠氣管插管，右頸內靜脈、右股靜脈、左股動脈及尾動脈穿刺置管，監(jiān)測動脈血壓，不進行體外循環(huán)。體外循環(huán)組（CPB組）:同Sham組氣管插管及動靜脈置管

2、后，行CPB1h。單純右美托咪定預處理組（Dex組）:大鼠腹腔注射右美托咪定50ug/kg，氣管插管及動靜脈穿刺置管同Sham組。右美托咪定+CPB組（DC組）:大鼠腹腔注射右美托咪定50ug/kg，氣管插管及動靜脈穿刺置管同Sham組，行CPB1h。每組設定4個時間點:T1（轉流前）、T2（轉流1h即轉流結束即刻）、T3(停轉流后2小時)、T4（停轉流后6小時）。在各時間點處死大鼠之前，靜脈采血，離心后回收血清，保存于-80℃冰箱中，

3、用于ELISA酶聯(lián)免疫吸附法檢測S100-β、IL-6及TNF-α濃度。腹腔注射過量水合氯醛至大鼠死亡，開胸經左心室冰鹽水灌注，待流出液清涼后斷頭取腦，分離海馬組織，部分保存于甲醛固定液中用于TUNEL法檢測海馬區(qū)神經元細胞凋亡情況和免疫組化法檢測TLR4蛋白。另一部分保存于-80℃冰箱中，用于Western blot法檢測TLR4、NF-κB蛋白表達。
　　結果:
　　1.TUNEL法測定海馬處神經元凋亡情況
　　同

4、Sham組相比，CPB組和DC組IA值升高(p＜0.05)，證明存在明顯的細胞凋亡;DC組IA值低于CPB組(p＜0.05)，證明右美托咪定可以顯著減少海馬區(qū)神經元凋亡;右美托咪定組IA值與Sham組相比無明顯差別(p＞0.05)。
　　2.ELISA酶聯(lián)免疫吸附法檢測S100-β、IL-6、TNF-α濃度
　　與Sham組比較，CPB組和DC組T2～T4時刻血清中S100-β、IL-6和TNF-α濃度都升高(p＜0.05)

5、，Dex組S100-β、IL-6和TNF-α濃度無明顯變化(p＞0.05);對比CPB組，DC組T2～T4時刻血清中S100-β、IL-6和TNF-α濃度均降低(p＜0.05);在CPB及DC組中，各組內與T1時刻相比，T2～T4時刻血清中S100-β、IL-6和TNF-α濃度都升高(p＜0.05)。
　　3.Dex對CPB后海馬區(qū)TLR4和NF-κB蛋白表達影響
　　與Sham組相比，CPB組和DC組在T4時間點時TLR4