抑制p38MAPK信號(hào)通路調(diào)控癲癇大鼠腦組織中腺苷A1受體及ENT1表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　探索抑制p38MAPK信號(hào)通路后，癲癇大鼠的行為學(xué)和腦組織內(nèi)腺苷A1受體及ENT1的表達(dá)變化。
　　方法：
　　健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為：正常對(duì)照組（n=5）、癲癇組（0h、24h、72h、1W、2W五個(gè)時(shí)間點(diǎn)，n=5×5）、SB203580組（n=5）及DMSO組（n=5）。建立氯化鋰-匹魯卡品癲癇大鼠模型，應(yīng)用Racine評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)觀察各組大鼠首次癲癇發(fā)作潛伏期、1小時(shí)內(nèi)癲癇發(fā)作次數(shù)；HE染色觀察各組

2、大鼠腦組織病理形態(tài)學(xué)改變；免疫組化、免疫熒光及Western blot檢測(cè)腺苷A1受體在各組大鼠海馬及顳葉新皮質(zhì)中的表達(dá)情況；Western blot檢測(cè)ENT1在各組大鼠海馬中的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.行為學(xué)結(jié)果示：癲癇組的大鼠首次癲癇發(fā)作潛伏期為25.89±1.27min，DMSO組為25.65±1.56min，SB203580組為37.53±1.73min；癲癇組的1小時(shí)內(nèi)大鼠癲癇發(fā)作次數(shù)為7.4±1.07，D

3、MSO組為7.0±0.83，SB203580組為3.0±0.70。大鼠首次癲癇發(fā)作潛伏期和1小時(shí)內(nèi)癲癇發(fā)作次數(shù)在癲癇組及DMSO組之間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與上述兩組比較，SB203580組大鼠首次癲癇發(fā)作潛伏期明顯延長，1小時(shí)內(nèi)癲癇發(fā)作次數(shù)減少，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　2.HE染色結(jié)果示：正常對(duì)照組海馬組織結(jié)構(gòu)清晰，未見病理性改變；癲癇組海馬組織可見大量神經(jīng)細(xì)胞凋亡、壞死；SB203580組

4、海馬組織亦有部分神經(jīng)細(xì)胞變性壞死，但程度較癲癇組輕。
　　3.Western blot檢測(cè)腺苷A1受體表達(dá)的結(jié)果示：正常對(duì)照組大鼠的海馬及顳葉新皮質(zhì)中腺苷A1受體有基礎(chǔ)水平的表達(dá)；氯化鋰-匹魯卡品癲癇模型大鼠中，腺苷A1受體在癲癇造模成功后24h表達(dá)較正常對(duì)照組上調(diào)，72h表達(dá)達(dá)到高峰，與正常對(duì)照組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在應(yīng)用p38MAPK抑制劑SB203580干預(yù)后，癲癇造模后第72h，SB203580組大鼠

5、腺苷A1受體的表達(dá)較癲癇組（72h）顯著下調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；免疫組化檢測(cè)腺苷A1受體表達(dá)的結(jié)果示：正常對(duì)照組大鼠海馬組織腺苷A1受體陽性細(xì)胞數(shù)為5.33±1.45，癲癇組為25.33±3.18，SB203580組為12.33±1.45。與正常對(duì)照組相比，癲癇組腺苷A1受體的陽性細(xì)胞數(shù)明顯增多，且著色增強(qiáng)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；與癲癇組相比， SB203580組的腺苷A1受體陽性細(xì)胞數(shù)減少，且著色較淺，

6、差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。免疫熒光檢測(cè)腺苷A1受體表達(dá)的結(jié)果示：腺苷A1受體主要表達(dá)于神經(jīng)元的胞膜及胞質(zhì)中。
　　4.Western blot檢測(cè)ENT1表達(dá)的結(jié)果示：SB203580組（24h）大鼠海馬組織中ENT1的表達(dá)較癲癇組（24h）顯著下調(diào)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　p38MAPK抑制劑SB203580可減輕大鼠海馬神經(jīng)元病理損害，延長大鼠首次癲癇發(fā)作潛伏期和降低大鼠癲癇