P38MAPK信號通路在肢體缺血預(yù)處理腦保護(hù)中的作用.pdf

1、目的：
　　應(yīng)用大鼠大腦中動脈缺血再灌注模型研究無創(chuàng)性遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)處理（ romote limb ischemic preconditioning,RLIP）對大鼠腦缺血再灌注損傷的作用，探討RLIP是否通過降低p38MAPK信號通路的活性減輕神經(jīng)細(xì)胞凋亡發(fā)揮腦保護(hù)的作用。
　　方法：
　　36只健康雄性SD大鼠，體重200-250g，鼠齡3-4個月，隨機(jī)分成3組（n=12）：假手術(shù)組（Sham組）、缺血再灌注組（I

2、/R組）、無創(chuàng)性遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)處理組（RLIP組）。①Sham組：只分離大鼠右側(cè)的頸總動脈（CCA）、頸內(nèi)動脈（ICA）和頸外動脈（ECA），不插入線栓和結(jié)扎血管，縫合傷口后觀察24h。②I/R組：參照Longa的線栓法制作右側(cè)大腦中動脈缺血再灌注（MCAO）模型，缺血2h，再灌注24h。③RLIP組：在大鼠右后肢根部用自制的改良血壓袖帶施行缺血預(yù)處理，缺血5min，再灌注5min，共3個循環(huán)，遠(yuǎn)端肢體缺血預(yù)處理后即刻行大鼠右側(cè)大腦中動

3、脈阻塞再灌注，余步驟同前。三組大鼠均再灌注24h后行神經(jīng)功能缺陷評分（ Neurologic deficit scores，NDS）；用TTC法測定腦梗死容積；HE染色觀察大鼠海馬CA1區(qū)組織細(xì)胞的形態(tài)；免疫組織化學(xué)法檢測海馬CA1區(qū)P-p38MAPK蛋白、Caspase8蛋白及Caspase3蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　?、偕窠?jīng)功能缺陷評分：Sham組無神經(jīng)功能缺陷；與I/R組相比，RLIP組評分降低，但兩組評分中位數(shù)相同

4、。②TTC染色：Sham組無腦梗死，與I/R組相比，RLIP組腦梗死容積顯著減小，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。③HE染色：Sham組海馬CA1區(qū)椎體細(xì)胞數(shù)量和形態(tài)正常，排列整齊、致密，為2-3層，染色呈淺藍(lán)色，間質(zhì)無水腫。I/R組椎體細(xì)胞數(shù)量明顯減少，細(xì)胞體積縮小、變形，細(xì)胞核碎裂、溶解、染色加深，間質(zhì)水腫嚴(yán)重。與I/R組比較，RLIP組海馬CA1區(qū)椎體細(xì)胞數(shù)目較多且形態(tài)較為完整，層次較清晰，間質(zhì)水腫明顯減輕。④免疫組織化學(xué)結(jié)果顯