單純皰疹病毒1型的Th細(xì)胞和B細(xì)胞表位重組核酸疫苗的構(gòu)建及真核表達(dá).pdf

1、目的：
　　構(gòu)建單純皰疹病毒1型(Herpes Simplex Virus1，HSV-1)糖蛋白B(Glycoprotein B，gB)和糖蛋白D(Glycoprotein D，gD)的Th細(xì)胞表位及B細(xì)胞表位重組串聯(lián)核酸疫苗并鑒定其真核表達(dá)。
　　方法：
　　利用生物信息學(xué)分析軟件預(yù)測(cè)HSV-1 gB和gD的Th細(xì)胞表位和B細(xì)胞表位，結(jié)合已發(fā)表文獻(xiàn)，設(shè)計(jì)合成HSV-1的Th細(xì)胞和B細(xì)胞表位重組串聯(lián)抗原基因（Th/B基

2、因）。將Th/B基因定向克隆入真核表達(dá)載體pVAX1，構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒p VAX1-Th/B。用制備的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染COS-7細(xì)胞，裂解細(xì)胞后經(jīng)Western blot鑒定其蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　預(yù)測(cè)得到了HSV-1 gB和gD的Th細(xì)胞和B細(xì)胞表位，成功構(gòu)建真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-Th/B，經(jīng)測(cè)序確認(rèn)序列正確。SDS-PAGE分離出相應(yīng)大小的蛋白表達(dá)片段，經(jīng)Western blot鑒定并證實(shí)該重組核酸疫苗能夠在體外真核細(xì)胞