PTEN多態(tài)性與乙肝病毒變異在肝細胞癌發(fā)生發(fā)展中的交互作用.pdf

1、肝細胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)是我國重要的惡性腫瘤，居農村和城市惡性腫瘤死亡原因的第一和第二位。HCC的發(fā)生受環(huán)境因素、病毒因素和機體的遺傳因素等的綜合影響。在我國，乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)慢性感染是HCC發(fā)生的主要原因。我國HBV感染者占全世界1/3，但是HCC發(fā)病數(shù)占全球50％以上，此外，HCC的發(fā)生與HBV慢性感染導致的肝臟慢性炎癥相關，但是多數(shù)的慢性肝炎患者

2、終身并沒有發(fā)生HCC，這提示我們中國人遺傳易感性在HCC發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。
　　 PTEN(Phosphatase and tensin homologue deleted Chromatosome10, PTEN)為人10號染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源的基因，是人類發(fā)現(xiàn)的第一個具有雙重特異性磷酸酶活性的抑癌基因。PTEN多態(tài)性與多種腫瘤有關，另外，研究發(fā)現(xiàn)HBX表達可調節(jié)PTEN的轉錄活化，促進AKT的磷酸化，從而促

3、進腫瘤生長增殖，抑制腫瘤細胞的凋亡。HBX在肝癌中起著重要的作用，因此探討PTEN多態(tài)性與HBV變異在HCC中的交互作用更有意義。
　　 目的:研究PTEN多態(tài)性(rs1234220，rs2299939，rs1234213)與HCC易感性之間的關系，以及分析PTEN多態(tài)性與HCC相關HBV變異在乙肝陽性HCC發(fā)生發(fā)展中的交互作用，揭示HCC發(fā)生的遺傳和病毒危險因素，為我國HBV相關HCC危險因素預防以及預測HCC的發(fā)生提供理論依

4、據(jù)。
　　 方法:本研究使用熒光探針實時定量PCR法對1012例健康對照、302例HBV自然清除者、990例非肝癌HBV感染者(316例ASCs、316例CHB、358例LC)及1021例HCC患者的PTEN基因的單核苷酸多態(tài)性位點進行基因型檢測。Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗在Internet上進行(http://ihg.gsf.de/ihg/snps.html)。使用SPSS16.0軟件進行數(shù)據(jù)的錄入與分析，應用獨

5、立樣本t檢驗、方差分析、x2檢驗和非條件Logistic回歸模型分析PTEN基因多態(tài)性與HBV慢性感染或HCC的關系及其與HBV變異在HCC中的交互作用。
　　 結果:
　　 1.PTEN多態(tài)性位點與HBV慢性感染或HCC的關系
　　 (1)以健康人群為對照，rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)顯著增加HCC的發(fā)生風險(AOR=1.37，95％CI=1.08-1.73; AOR=1.35，95

6、％CI=1.07-1.69)。以非肝癌HBV感染者為對照，rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)顯著增加HCC的發(fā)生風險(AOR=1.28，95％CI=1.02-1.61;AOR=1.27，1.01-1.57)，rs2299939 GT基因型、T等位基因(GT+TT)能降低HCC的發(fā)生風險(AOR=0.75，95％CI=0.62-0.92; AOR=0.79，95％CI=0.65-0.96)。以所有非HCC者作為對照，

7、rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)顯著增加HCC的發(fā)生風險(AOR=1.30，95％CI=1.08-1.56; AOR=1.29，1.07-1.54)，rs2299939 GT基因型能降低HCC的發(fā)生風險(AOR=0.84，95％CI=0.71-0.99)。
　　 (2)按性別分層后:在男性中與健康對照比較，rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)顯著增加HCC的發(fā)生風險(AOR=1.35，

8、95％CI=1.04-1.75;AOR=1.33，95％CI=1.03-1.71)。與非肝癌HBV感染者比較，rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)顯著增加HCC的發(fā)生風險(AOR=1.31，95％CI=1.01-1.70;AOR=1.30，95％CI=1.01-1.67)，rs2299939 GT基因型、T等位基因(GT+TT)能降低HBV相關HCC的風險(AOR=0.72，95％CI=0.57-0.90; AOR=

9、0.76，95％CI=0.62-0.95)。與所有非肝癌者比較，rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)顯著增加HCC的發(fā)生風險(AOR=1.30，95％CI=1.06-1.60; AOR=1.29，95％CI=1.06-1.58)，rs2299939 GT基因型能降低HBV相關HCC的風險(AOR=0.81，95％CI=0.68-0.98)。
　　 在女性中PTEN的三個多態(tài)性位點各基因型頻率在健康對照、HBV

10、自然清除者、非HCC的HBV感染者、所有非HCC對照者與HCC之間的差異沒有統(tǒng)計學意義。
　　 (3)在所有乙肝病毒感染者中，rs2299939 T等位基因(GT+TT)與高水平的ALT有關(AOR=1.26，95％CI=1.01-1.57)， rs2299939 GT基因型、T等位基因(GT+TT)均與高濃度的HBV DNA有關(AOR=1.33，95％CI=1.06-1.67; AOR=1.29，95％CI=1.03-1.6

11、0)。在男性乙肝病毒感染者中rs2299939 GT基因型、T等位基因(GT+TT)與高水平的ALT(AOR=1.35，95％CI=1.04-1.75; AOR=1.36，95％CI=1.06-1.74)有關，與高濃度的HBV DNA(AOR=1.38，95％CI=1.07-1.78;AOR=1.29，95％CI=1.01-1.66)有關。PTEN的3個多態(tài)性位點均與HBV慢性感染無關。
　　 (4)按基因型分層后，在HBV基因

12、型B中，以非HCC乙肝病毒感染者(ASCs、CHB、LC)作為對照，rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)能夠增加HCC發(fā)生的風險(AOR=2.02，95％CI=1.14-3.59; AOR=2.02，95％CI=1.14-3.59)。但是這可能是因為樣本量較少有關，需增加樣本量進行驗證。
　　 (5)按HBeAg的狀態(tài)分層后，在HBeAg陰性中與非肝癌HBV感染者比較，rs2299939 GT基因型、T等位基

13、因(TC+TT)能降低HCC的發(fā)生風險(AOR=0.68，95％CI=0.53-0.87; AOR=0.72,95％CI=0.57-0.92)。
　　 2.PTEN多態(tài)性與HBV變異及基因型之間的交互作用
　　 (1) rs1234220多態(tài)性與HBV變異的交互作用:分別以rs1234220 TT以及A1762T/G1764A、A3054T、C3116T的野生型為對照，經(jīng)年齡、性別校正后，發(fā)現(xiàn):A1762T/G1764A

14、的單獨作用能增加HCC的發(fā)病風險(AOR=3.71，95％CI=2.69-5.11)，rs1234220 C(CT+CC)與A1762T/G1764A共同作用在HBV感染者中顯著增加HCC的發(fā)病風險(AOR=2.44，95％CI=1.93-3.07)。但是rs1234220多態(tài)性與A1762T/G1764A、A3054T、C3116T之間不存在交互作用。按性別分層后得到的結果與總體一致。
　　 (2) rs2299939多態(tài)性與

15、HBV變異的交互作用:分別以rs2299939 GG及A1762T/G1764A、A3054T、C3116T的野生型為對照，經(jīng)年齡、性別校正后，A1762T/G1764A、C3116T的單獨作用能增加HCC的發(fā)病風險(AOR=3.55，95％CI=2.48-5.08; AOR=2.17,95％CI=1.42-3.32); rs2299939 T(GT+TT)與A1762T/G1764A共同作用能增加HCC的發(fā)病風險(AOR=1.70，9

16、5％CI=1.39-2.08);A3054T為野生型時，rs2299939 T(GT+TT)的單獨作用能降低HCC的發(fā)病風險(AOR=0.62，95％CI=0.44-0.87)。但是，rs2299939多態(tài)性與A1762T/G1764A之間不存在交互作用，rs2299939多態(tài)性與A3054T的交互作用能增加HCC的發(fā)病風險(AOR=2.41，95％CI=1.08-5.35)，rs2299939多態(tài)性與C3116T的交互作用能降低HCC

17、的發(fā)病風險(AOR=0.34，95％CI=0.18-0.66)。按性別分層后，僅在男性中rs2299939多態(tài)性與C3116T之間存在交互作用。
　　 (3) rs1234213多態(tài)性與HBV變異的交互作用:分別以rs1234213 CC及A1762T/G1764A、A3054T、C3116T的野生型為對照，經(jīng)年齡、性別校正后，發(fā)現(xiàn)A1762T/G1764A的單獨作用能增加HCC的發(fā)病風險(AOR=3.95，95％CI=2.23

18、-7.01)，C3116T的單獨作用能降低HCC的發(fā)病風險(AOR=0.51，95％CI=0.27-0.97)。但是rs1234213多態(tài)性與A1762T/G1764A、A3054T之間不存在交互作用，rs1234213多態(tài)性與C3116T之間的交互作用顯著增加HCC的發(fā)病風險(AOR=3.68，95％CI=1.74-7.76)。按性別分層后，僅在男性中rs1234213多態(tài)性與C3116T之間存在交互作用。
　　 (4)乙肝病

19、毒基因型與PTEN多態(tài)性的交互作用:以HBV B基因型及rs1234220TT、rs2299939 GG、rs1234213 CC為對照，經(jīng)年齡、性別校正后，發(fā)現(xiàn)HBV C基因型分別與rs1234220 C(CT+CC)、rs2299939 T(GT+TT)、rs1234213T(CT+TT)共同作用顯著增加HCC的發(fā)病風險(AOR=1.68，95％CI=1.38-2.05;AOR=1.32，95％CI=1.10-1.60; AOR=1

20、.29，95％CI=1.01-1.66)，HBV基因型為B時，rs1234220 C(CT+CC)的單獨作用能增加HCC的發(fā)病風險(AOR=2.02，95％CI=1.14-3.59); rs1234220TT時，HBV C基因型的單獨作用顯著增加HCC的發(fā)病風險(AOR=2.37，95％CI=1.72-3.28); rs2299939 GG時HBV C基因型的單獨作用顯著增加HCC的發(fā)病風險(AOR=2.11，95％CI=1.47-3.

21、01)。但是PTEN多態(tài)性與HBV基因型之間在肝細胞癌發(fā)生發(fā)展中不存在交互作用。
　　 3.PTEN單倍型與HCC的關系
　　 與健康對照相比，rs1234220C-rs2299939G-rs1234213T單倍型顯著增加HCC的發(fā)生風險(AOR=1.32，95％CI=1.06-1.63)。
　　 結論:
　　 1.rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)顯著增加HCC的發(fā)生風險，rs22

22、99939 GT基因型顯著降低HCC的發(fā)生風險。在男性中也得到相同的結果。PTEN的3個多態(tài)性位點均與HBV慢性感染無關。
　　 2.在HBV基因型B中，rs1234220 CT基因型、C等位基因(CT+CC)能夠增加HCC發(fā)生的風險，但需要更大的樣本量進行驗證。
　　 3.在HBeAg陰性中rs2299939 GT基因型、T等位基因(GT+TT)能降低HCC的發(fā)生風險。
　　 4.rs2299939多態(tài)性與A3