蟹膜修復(fù)神經(jīng)鞘瘤所致10mm坐骨神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)觀察.pdf

1、周圍神經(jīng)損傷,是臨床上的常見病及多發(fā)病,腫瘤所致的周圍神經(jīng)損傷在臨床上亦較常見,臨床上直接將缺損的神經(jīng)直接縫合,但易導(dǎo)致神經(jīng)假瘤的形成而影響神經(jīng)的功能恢復(fù),尤其中長段神經(jīng)缺損(≥10mm),因張力過大而無法直接縫合,而臨床上采用的自體神經(jīng)移植后,導(dǎo)致移植區(qū)域出現(xiàn)失神經(jīng)癥狀,所移植的神經(jīng)也無法達(dá)到理想的恢復(fù)狀態(tài),從而導(dǎo)致臨床對神經(jīng)缺損治療較為棘手。隨著交通化快節(jié)奏的生活方式改變,導(dǎo)致周圍神經(jīng)損傷發(fā)病率呈逐年上升狀態(tài),神經(jīng)缺損嚴(yán)重的影響了人

2、們的生活和工作質(zhì)量。因此,中長段周圍神經(jīng)損傷的臨床治療成為了神經(jīng)移植研究領(lǐng)域里的重要課題。近些年,隨著生物醫(yī)學(xué)的迅猛發(fā)展,神經(jīng)導(dǎo)管已成為神經(jīng)移植方面的佼佼者,尤為生物可降解型導(dǎo)管的發(fā)展,已成為神經(jīng)移植領(lǐng)域里的領(lǐng)軍者,它為臨床神經(jīng)移植奠定了堅實(shí)的基礎(chǔ),但此型生物導(dǎo)管費(fèi)用較高,亦存在排斥反應(yīng),因而導(dǎo)致臨床上應(yīng)用較為困難。蟹膜(即螃蟹蟹鰲內(nèi)的一層較為堅韌的透明膜,簡稱蟹膜),實(shí)屬原生物可降解型材料,本課題采取人工方法建立神經(jīng)鞘瘤的大鼠模型,將

3、蟹膜移植在大鼠坐骨神經(jīng)缺損處(神經(jīng)缺損≥10mm),以觀察蟹膜對周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)作用,亦為再續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究奠定堅實(shí)的基礎(chǔ)及理論依據(jù)。
　　目的:
　　觀察蟹膜修復(fù)神經(jīng)鞘瘤所致10mm坐骨神經(jīng)缺損的神經(jīng)再生與功能恢復(fù)情況,并探討蟹膜對神經(jīng)缺損的修復(fù)作用,并為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究奠定堅實(shí)的基礎(chǔ)及確鑿的數(shù)據(jù)。
　　方法:
　　1.制備神經(jīng)鞘瘤模型:選取清潔級SD大鼠16只,將所有大鼠的右側(cè)坐骨神經(jīng)切斷后進(jìn)行端端縫合術(shù),術(shù)后4

4、周即可形成神經(jīng)鞘瘤模型,再將所有大鼠完全隨機(jī)分成兩組,即蟹膜A組和坐骨神經(jīng)缺損B組。
　　2.蟹膜準(zhǔn)備:選取蟹鰲較大的10只新鮮河蟹,將蟹鰲內(nèi)的透明膜用生理鹽水浸泡去除其表面的雜質(zhì)后,放置無菌的EP管內(nèi),于-80℃的超低溫冰箱進(jìn)行冷凍72小時,以去除蟹膜內(nèi)的抗原成分,再將蟹膜于常溫室內(nèi)(溫度為20-25°)進(jìn)行復(fù)溫48小時后實(shí)驗(yàn)備用。
　　3.兩組均先將神經(jīng)鞘瘤切除(使神經(jīng)缺損達(dá)到10mm),A組用蟹膜進(jìn)行橋接兩端缺損處的神

5、經(jīng),B組將兩端缺損處的神經(jīng)直接縫合于鄰近的腹壁上,觀察兩組缺損神經(jīng)的生長與功能恢復(fù)等狀況。
　　4.術(shù)后觀察大鼠的大體狀況,于術(shù)后30分鐘內(nèi),以及第2、4、6、8、10、12周采用足跡測量法進(jìn)行坐骨神經(jīng)指數(shù)的測定,于術(shù)后4、8、12周時于手術(shù)顯微鏡下觀察兩組神經(jīng)生長狀況,12周時行大體標(biāo)本、神經(jīng)電生理等方面檢測,并將A、B兩組進(jìn)行比較。
　　結(jié)果:
　　1.大體觀察:
　　術(shù)后30分鐘內(nèi)觀察:所有大鼠均出現(xiàn)右后足

6、下垂、右趾并攏等拖拽右后肢行走的癱瘓狀態(tài),針刺所有大鼠的右足(趾),無右足(趾)回縮動作、無展爪反射形成。術(shù)后3周起,逐漸出現(xiàn)較遲鈍的右足(趾)回縮動作及展爪反射;6-10周大部分大鼠的右足(趾)回縮動作及展爪反射已逐漸趨于較靈敏狀態(tài);11周時蟹膜A組所有8只大鼠的右足(趾)回縮動作及展爪反射已靈敏,右后肢自主活動與正常側(cè)一致;12周時坐骨神經(jīng)缺損B組有2只大鼠的右足(趾)回縮動作及展爪反射已靈敏,右后肢自主活動與正常側(cè)一致,3只為稍靈

7、敏狀態(tài),3只為較遲鈍狀態(tài)。
　　2.手術(shù)顯微鏡下觀察:
　　術(shù)后4周:A、B兩組均與周圍組織粘連,A組重于B組;8周:A組輕于B組,剪開A組導(dǎo)管可見再生的神經(jīng)纖維和遠(yuǎn)端已連接,且開始降解吸收;12周:A、B兩組的再生神經(jīng)纖維全部長入遠(yuǎn)端,蟹膜組降解吸收完畢且無明顯粘連,神經(jīng)連續(xù)性良好,B組導(dǎo)管可見神經(jīng)假瘤形成,使神經(jīng)再生通過障礙。A組再生神經(jīng)恢復(fù)效果明顯優(yōu)于B組。
　　3.坐骨神經(jīng)指數(shù):
　　于術(shù)后30分鐘內(nèi),術(shù)

8、后第2、4、6、8、10、12周時進(jìn)行大鼠坐骨神經(jīng)指數(shù)測量并與之比較:在30分鐘內(nèi)兩組一致,2、4周時兩組無明顯差別,而在第6、8、10、12周,尤其是12周時兩組具有顯著性差別,A組較B組明顯加快。
　　4.電生理及再生形態(tài)學(xué):
　　術(shù)后12周兩組進(jìn)行電生理、再生神經(jīng)形態(tài)學(xué)比較:A組大鼠在傳導(dǎo)速度、最大振幅、有髓神經(jīng)軸突直徑、髓鞘厚度及纖維密度上明顯高于B組大鼠。注:傳導(dǎo)速度與B組相比較,(P<0.01);最大振幅與B組相