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1、【目的】:研究多胺(精脒)及多胺合成抑制劑DFMO一定濃度對(duì)PC12細(xì)胞生長(zhǎng)特性的影響,同時(shí)探討在其作用下PC12細(xì)胞MAPKs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活化表達(dá)的特點(diǎn)及其相互之間的關(guān)系。 【方法】:取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞株P(guān)C12細(xì)胞,按照作用劑的不同分為兩組,即SPD組(分別含SPD1.25,2.5,5,10mmol/L)和DFMO組(分別含DFMO2,4,6,8mmol/L),分別培養(yǎng)4天,每天觀察PC12細(xì)胞生長(zhǎng)情況。光鏡顯微鏡下觀察
2、細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化;臺(tái)盼藍(lán)染色法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線;用四氮唑鹽(MTT)比色試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)或抑制;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布。同時(shí)用western-blot法檢測(cè)ERK1/2和p38蛋白磷酸化水平,觀察多胺對(duì)PC12細(xì)胞生長(zhǎng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響?! 窘Y(jié)論】:SPD在一定濃度范圍內(nèi)對(duì)PC12細(xì)胞生長(zhǎng)具有促進(jìn)作用,DFMO在一定濃度范圍內(nèi)對(duì)PC12細(xì)胞則具有抑制作用。精脒通過(guò)ERK1/2磷酸化升高和p38磷酸化降低導(dǎo)致PC12細(xì)胞增殖;而D
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