緩釋BCNU-PLGA微球?qū)Υ笫竽XC6膠質(zhì)瘤治療作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]觀察緩釋BCNU-PLGA微球?qū)Υ笫竽XC6膠質(zhì)瘤的治療作用。 [方法]1．以自制聚乳酸-羥基乙酸共聚物微球(BCNUloadedPLGAMicrospheres，BCNU-PLGA-MS)制備釋放不同時(shí)間(4h、1d、2d、3d、7d、14d、21d)的浸提液，體外培養(yǎng)大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞，以不同時(shí)間點(diǎn)的浸提液作用于體外培養(yǎng)的細(xì)胞，ELISA法檢測(cè)浸提液對(duì)體外培養(yǎng)的大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞MMP-9、b-FGF蛋白表達(dá)的影響。2

2、．立體定向法建立大鼠顱內(nèi)移植膠質(zhì)瘤模型，荷瘤鼠隨機(jī)分為六組，對(duì)照組、腦內(nèi)PLGA組、腦內(nèi)BCNU組、靜脈BCNU組、腹部皮下BCNU-PLGA組、腦內(nèi)BCNU-PLGA組。分別觀察各組荷瘤鼠生存狀態(tài)變化，比較各組大鼠生存期，繪制生存曲線。不同時(shí)間點(diǎn)處死大鼠，留取腦標(biāo)本備用。標(biāo)本HE染色，比較不同時(shí)間點(diǎn)各組腫瘤的病理組織形態(tài)變化。免疫組織化學(xué)法評(píng)價(jià)各組大鼠腫瘤PCNA、Ki-67、MVD表達(dá)變化，比較其在不同時(shí)間點(diǎn)各組腫瘤中的表達(dá)。

3、 [結(jié)果]1．不同釋放時(shí)間的緩釋BCNU-PLGA浸提液作用于體外培養(yǎng)的大鼠C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞，在有效的釋放時(shí)間(21天)內(nèi)可以下調(diào)膠質(zhì)瘤細(xì)胞上清液中MMP-9、bFGF蛋白的表達(dá)(P＜0.01或P＜0.05)，藥效具有時(shí)間依賴性。2．成功建立荷瘤鼠模型后，大鼠隨機(jī)分組，靜脈給藥、腦內(nèi)給原藥，長(zhǎng)時(shí)間微量系統(tǒng)給藥均較對(duì)照組沒有顯示明顯的延長(zhǎng)生存期的作用(P＞0.05)。腦內(nèi)緩釋BCNU-PLGA可以顯著延長(zhǎng)荷瘤鼠的生存期(P＜0.01)。3

4、．腫瘤標(biāo)本的HE染色顯示藥物治療后腫瘤病理形態(tài)發(fā)生了變化。治療后，細(xì)胞密度降低，細(xì)胞發(fā)生了核固縮、凋亡，部分區(qū)域壞死、出血明顯。腫瘤內(nèi)血管減少。4．腦內(nèi)局部緩釋BCNU-PLGA比靜脈給藥、局部原藥、長(zhǎng)時(shí)間系統(tǒng)給藥表現(xiàn)出更顯著的下調(diào)腫瘤細(xì)胞PNCA、Ki-67、MVD的表達(dá)。 [結(jié)論]1．在有效的釋放時(shí)間(21天)內(nèi)可以下調(diào)膠質(zhì)瘤細(xì)胞上清液中MMP-9、bFGF蛋白的表達(dá)，藥效具有時(shí)間依賴性。證明了藥物的緩釋作用，BCNU可能通