卷柏抗輻射作用的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)理研究.pdf

1、目的：篩選出卷柏中具有輻射防護(hù)作用的活性部位，并從細(xì)胞凋亡和抗氧化方面初步探討其發(fā)揮輻射防護(hù)作用的機(jī)理。 方法：1. 利用MTT法檢測(cè)不同接種密度的正常淋巴母細(xì)胞AHH-1的OD490值，以確定最佳的細(xì)胞接種密度，并利用這個(gè)接種密度觀察AHH-1細(xì)胞對(duì)射線的敏感性，篩選出最佳的輻照劑量和檢測(cè)時(shí)間。根據(jù)以上結(jié)果確定藥物篩選條件，檢測(cè)卷柏中各提取部位對(duì)輻照細(xì)胞OD490值的影響，初步篩選出卷柏中具有輻射防護(hù)作用的活性部位。2.通過(guò)小

2、鼠存活率實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證卷柏中具有抗輻射作用的活性部位，直接進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。3.提前給小鼠灌胃卷柏活性部位溶液，觀察其對(duì)接受6.0Gy60Coγ，射線照射小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)、胸腺和脾臟細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡率的影響。4.提前給小鼠灌胃卷柏活性部位溶液，觀察其對(duì)接受6.0Gy60Coγ射線照射小鼠胸腺組織和血清中MDA含量和SOD活力的影響，確定其是否能夠通過(guò)提高機(jī)體的抗氧化能力來(lái)發(fā)揮抗輻射作用。 結(jié)果：1.通過(guò)實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)，AHH

3、-1細(xì)胞對(duì)60Coγ射線非常敏感，用它進(jìn)行藥物體外活性篩選的最佳接種密度為6×105/ml，最佳輻照劑量為6.0Gy，最佳檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)為照后24h和照后48h；體外實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明卷柏水部位能夠明顯提高輻照細(xì)胞的存活率。2.通過(guò)輻照小鼠的30d存活率實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，卷柏水部位能明顯增加接受8.0Gy 60Coγ射線照射小鼠的30d存活率和死亡動(dòng)物平均存活時(shí)間，故將其作為卷柏中具有輻射防護(hù)作用的活性部位。3.提前給小鼠灌胃卷柏水部位溶液，可提高接受

4、6.0Gy 60Coγ射線照射小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)，明顯降低其胸腺和脾臟細(xì)胞的凋亡率，并可降低受照射小鼠胸腺、脾臟細(xì)胞的G0/G1期百分率，升高其G2/M和S期百分率。4.提前給小鼠灌胃卷柏水部位、卷柏多糖、水部位去多糖溶液，可促進(jìn)接受6.0Gy的60Coγ射線照射的小鼠的胸腺和脾臟指數(shù)的恢復(fù)，明顯降低其胸腺和血清中的MDA含量，提高其胸腺和血清中的SOD活力，以卷柏多糖效果最好。 結(jié)論：卷柏水部位具有較好的輻射防護(hù)作用，它可以