廣西副豬嗜血桿菌分子流行病學調查及其病原的分離和生物學特性研究.pdf

1、副豬嗜血桿菌(HPs)引發(fā)一種以多發(fā)性漿膜炎、關節(jié)炎、腦膜炎及高死亡率為特征的傳染病，嚴重的危害著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。本研究從廣西9個地區(qū)(市)26個地縣各豬場采集了235份材料，進行了HPs的分子流行病學和細菌的分離鑒定等方面的研究。其研究主要結果如下： 1、HPs的分子流行病學調查2006年11月至2008年2月，從廣西9個市26個地區(qū)采集到235份病料，根據(jù)HPs 16S rRNA序列設計的引物進行PCR擴增，結果得出14株陽性

2、病料，陽性率為5.96％。分別是南寧市郊4份，武鳴1份，上林1份，陸川3份，興業(yè)1份，新興2份，天等1份。該結果表明HPs已經(jīng)在廣西發(fā)生，但并未形成廣泛流行。 2、廣西HPs 16S rRNA的克隆與序列分析試驗將822 bp擴增片段連入T-載體后測序，再與GenBank中的序列進行比對。14份陽性材料同國外發(fā)表的序列進行同源性分析，結果表明同源性為94.3％～99.8％，14個廣西株之間核苷酸同源性為94.5％～100％。這說

3、明廣西菌株之間及其與國外菌株之間的變異不大。 3、HPs的分離和生物學特性研究 (1)HPs的分離。從14株PCR檢測為陽性的材料中，分離出7株菌株，分別是GXNN3、GXNNST1、GXNNWM1、GXLZXX1、GXLZXX2、GXLZ1、GXYLLC1。經(jīng)鏡檢、生化試驗等，表明其菌落特征、細菌形態(tài)及對各種生化試劑的反應結果與HPs特征相符，再經(jīng)PCR方法確定為HPs。 (2)藥敏試驗。將分離到的7株陽性菌株

4、進行藥敏試驗確定其對藥物的敏感性。結果7株分離細菌對各種藥物大多呈現(xiàn)不同的敏感性。其中敏感性較高的為頭孢拉定和恩諾沙星，其次是先鋒V和氧氟沙星。據(jù)此結果，在廣西3個豬場應用于臨床后，成功的控制了本病。說明實驗結果與臨床應用結果基本符合，為治療本病提供了寶貴的經(jīng)驗。 (3)分離株的毒力測定。取健康小白鼠，用純化的病原菌制成細菌懸液，腹腔注射0.5ml，觀察小鼠情況，以測定分離株的毒力。結果GXLZXX2、GXLZ1的毒力最強，GX