Slit2-Robo1在肝細(xì)胞癌生長(zhǎng)過(guò)程中的作用及其機(jī)制研究.pdf

1、神經(jīng)軸突的生長(zhǎng)依賴(lài)于一系列導(dǎo)向系統(tǒng)的控制。近年來(lái)的研究結(jié)果表明，神經(jīng)導(dǎo)向分子系統(tǒng)不僅調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，在血管新生和腫瘤發(fā)展等方面也發(fā)揮著重要的調(diào)控作用。Slit2及其受體Robo1是神經(jīng)導(dǎo)向分子Slit-Robo家族中的成員。目前的研究表明Slit2和Robo1可在腫瘤血管新生、侵襲、轉(zhuǎn)移等腫瘤進(jìn)程中的多個(gè)方面產(chǎn)生影響，但在其具體作用上和作用機(jī)制尚存在一定的爭(zhēng)議。此外，它們?cè)诟伟┻M(jìn)程中的作用也未見(jiàn)研究報(bào)道。肝癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，

2、查詢(xún)資料和我們實(shí)驗(yàn)檢測(cè)都表明在多數(shù)肝癌細(xì)胞中受體Robo1的表達(dá)較正常肝細(xì)胞有顯著增高，而配體Slit2在肝癌組織的表達(dá)雖然有較大的差別，但多數(shù)情況下為低調(diào)表達(dá)。這種受體和配體表達(dá)的不一致性提示在肝癌中Slit2和Robo1可能存在復(fù)雜的作用機(jī)制。為此我們?cè)O(shè)立本研究探討Slit2和Robo1在肝癌腫瘤生長(zhǎng)過(guò)程中的作用及其機(jī)制。
　　 我們分別通過(guò)建立Robo1及其配體Slit2基因沉默和Robo1過(guò)表達(dá)的的肝癌細(xì)胞系，研究Rob

3、o1及Slit2對(duì)肝癌細(xì)胞的增殖、遷移、粘附和皮下成瘤、轉(zhuǎn)移等特性的影響，以及它們對(duì)血管新生的影響。我們的研究發(fā)現(xiàn)，在高量表達(dá)Robo1的肝癌細(xì)胞系(QGY-TR50)中調(diào)低該基因表達(dá)，癌細(xì)胞的增殖力減低、粘附力增強(qiáng)、遷移力降低，皮下裸鼠成瘤的體積減小、重量減低、血管密度顯著降低。相反在低量表達(dá)Robo1的肝癌細(xì)胞系(SK-HEP-1)中過(guò)表達(dá)該基因，癌細(xì)胞系增殖力有升高的趨勢(shì)，細(xì)胞的粘附力降低、遷移力增高，皮下裸鼠成瘤的體積增大，重量

4、增加、血管密度顯著增高。通過(guò)鼠尾靜脈注射實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)過(guò)量表達(dá)Robo1的肝癌細(xì)胞形成轉(zhuǎn)移瘤的能力明顯增強(qiáng)。但是，在針對(duì)Robo1的配體Slit2RNAi實(shí)驗(yàn)中，我們卻發(fā)現(xiàn)低調(diào)Slit2肝癌細(xì)胞的增殖能力升高、粘附力降低、遷移力增強(qiáng)，體積增大，重量增加、血管密度顯著增高，鼠尾靜脈注射形成轉(zhuǎn)移瘤的能力也明顯增強(qiáng)。這與過(guò)表達(dá)而不是抑制其受體的影響相同。同樣，對(duì)于癌細(xì)胞黏附與轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子表達(dá)的檢測(cè)也表明過(guò)量表達(dá)Robo1和低調(diào)Slit2表達(dá)

5、后都出現(xiàn)E-cadherin降低，N-cadherin及vimentin表達(dá)量明顯升高;而低調(diào)Robo1則結(jié)果相反。對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行Slit2和Robo1表達(dá)間關(guān)系中我們發(fā)現(xiàn)，配體Slit2被干擾后受體Robo1的表達(dá)出現(xiàn)升高，而Robo1表達(dá)的變化對(duì)Slit2的表達(dá)則沒(méi)有發(fā)生明顯的影響。
　　 以上研究表明，Slit2和Robo1的表達(dá)變化均可在多方面影響肝癌的發(fā)展，而且受體與配體表達(dá)水平對(duì)肝癌發(fā)展影響存在明顯的非同一性;這種非