探討膽管癌上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程中Wnt-β-catenin通路與TGFβ1-Smad信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路之間的關(guān)系.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)Wnt2b抑制后膽管癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程中TGFβ1-Smad信號(hào)途徑相關(guān)因子的變化，對(duì)膽管癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程中Wnt/β-catenin信號(hào)通路與TGFβ1-Smad信號(hào)通路之間的軸連關(guān)系進(jìn)行初步探討。
　　方法：分別用設(shè)計(jì)出的3種（pLVT1402、pLVT1403及pLVT1404）Wnt2b-siRNA慢病毒載體、3種（pLVT1399、pLVT1400及pLVT1401）β-catenin-siRNA

2、慢病毒載體以及空白慢病毒載體轉(zhuǎn)染人膽管癌細(xì)胞RBE細(xì)胞系，RT-PCR法檢測(cè)Wnt2b和β-catenin表達(dá)，篩選出Wnt2b表達(dá)水平最低的Wnt2b-siRNA-RBE細(xì)胞組、β-catenin表達(dá)水平最低的β-catenin-siRNA-RBE細(xì)胞組，并以空白慢病毒載體轉(zhuǎn)染的RBE細(xì)胞作為陰性對(duì)照組。分別用RT-PCR和Western Blot法測(cè)定各組中E-cadherin、Vimentin、TGFβ1、smad4、snail及

3、slug的表達(dá)。
　　結(jié)果：與陰性對(duì)照組、pLVT1403組及pLVT1404組相比，pLVT1402組RBE細(xì)胞中Wnt2b的表達(dá)水平最低（P＜0.05）；與陰性對(duì)照組、pLVT1400組及pLVT1401組相比，pLVT1399組RBE細(xì)胞中β-catenin的表達(dá)水平最低（P＜0.05）；與陰性對(duì)照組相比，篩選出的Wnt2b-siRNA-RBE細(xì)胞組、β-catenin-siRNA-RBE細(xì)胞組中，E-cadherin表達(dá)上

4、升而Vimentin表達(dá)下降（P＜0.05）。Wnt2b-siRNA-RBE細(xì)胞組與β-catenin-siRNA-RBE細(xì)胞組及陰性對(duì)照組相比，TGFβ1、smad4、snail及slug的表達(dá)下降（P＜0.05），而β-catenin-siRNA-RBE細(xì)胞組與陰性對(duì)照組之間比較上述四種因子的表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：抑制RBE細(xì)胞中Wnt2b或β-catenin的表達(dá)后，細(xì)胞中E-cadherin表達(dá)