TRAIL基因多態(tài)性與中國山東漢族人慢性乙型肝炎的相關性研究.pdf

1、第一部分TRAIL基因多態(tài)性與中國山東漢族人慢性乙型肝炎的相關性研究 背景： 乙型肝炎是由乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引起的肝臟炎癥性病變，是我國當前流行最廣、危害最嚴重的一種傳染病，其中約5％-10％感染者可轉為慢性，遷延數年，反復活動，甚至轉變?yōu)楦斡不蚋伟Ｒ倚透窝茁曰c多種因素有關，包括年齡、免疫功能、飲酒、合并感染或藥物等。目前，凋亡因子在慢性乙型肝炎病變過程中的作用已引起許多學

2、者的關注。 腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體（tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand，TRAIL），是1995年由Wiley發(fā)現并命名的，人TRAIL基因定位于染色體3q26，由5個外顯子組成，編碼1.77 kb mRNA，并可編碼281個氨基酸殘基組成的分子量為32.5 KDa的Ⅱ型跨膜蛋白。TRAIL屬于TNF超家族成員，其結構與該家族的其他成員相仿。TRA

3、IL可通過與其受體結合，誘導細胞凋亡，或發(fā)揮其他生物學作用。近幾年通過臨床資料及動物實驗研究，發(fā)現TRAIL的表達水平與乙肝病毒在人體的感染呈現相關性，外周血sTRAIL的分泌能夠從一定程度上反映HBV感染后疾病的進展及肝臟的損傷狀況，表明TRAIL參與乙型病毒性肝炎的致病過程，但TRAIL的多態(tài)性是否與慢性乙型肝炎的發(fā)生有關尚未見報道。 目的： 通過檢測慢性乙型肝炎和健康對照組人群TRAIL基因第五外顯子3’-非編碼區(qū)

4、（3’-untranslated region，3’-UTR）1525G/A、1595C/T位點基因單核苷酸多態(tài)性（SNPs），探討慢性乙型肝炎與TRAIL基因SNPs的關聯(lián)性。 方法： 采用病例對照的方法，收集確診的慢性乙型肝炎患者187例，同時選擇142例健康個體作為對照。全部選擇對象均空腹抽取靜脈血，通過聚合酶鏈式反應-限制性內切酶片段長度多態(tài)性（polymerase chain reaction-Restrict

5、ion fragment length polymorphism，PCR-RFLP）法檢測兩組人群TRAIL基因第五外顯子3’-非編碼區(qū)1525/1595兩位點基因多態(tài)性。 結果： 1.TRAIL等位基因1525G/A和1595C/T在病例組和對照組中的分布已達到遺傳平衡。病例組（x2=1.207，P=0.547）和對照組（x2=0.917，P=0.632）P值均大于0.05，無顯著性差異。 2.TRAIL基因1

6、525位點檢測到GG、GA、AA三種基因型，從1595位點檢測到CC、CT、TT三種基因型。并發(fā)現TRAIL基因1525位點的GG、GA、AA基因型分布分別與1595位點的CC、CT、TT基因型一一對應。 3.正常對照組中，男性的TRAIL基因1525G/A和1595C/T位點三種基因型1525GG/1595CC、1525GA/1595CT、1525AA/1595TT的出現頻率分別為34.2％、41.0％、24.8％；女性出現頻

7、率分別為24.0％、60.0％、16.0％，TRAIL1525G/A和1595C/T位點SNPs在男性、女性中分布無顯著性差異（x2=3.016，P=0.221），說明在正常個體中TRAIL基因1525及1595位點三種基因型分布無性別差異，該位點SNPs與性別無關。 4.慢性乙型肝炎組中，男性TRAIL基因1525G/A和1595C/T位點三種基因型1525GG/1595CC、1525GA/1595CT、1525AA/1595

8、TT的出現頻率分別為39.2％、51.0％、9.8％；女性出現頻率分別為14.7％、61.8％、23.5％，兩組比較有顯著性差異（x2=9.680，P=0.008），提示在慢性乙型肝炎患者中，1525G/A、1595C/T位點SNPs與性別有關，在女性中多表現為1525AA/1595TT純合，而在男性中多表現為1525GG/1595CC純合。 5.TRAIL1525G/A和1595C/位點三種基因型1525GG/1595CC、1

9、525GA/1595CT、1525AA/1595TT在對照組中出現頻率分別為32.4％、44.4％、23.2％；而慢性乙型肝炎組出現頻率分別為34.8％、52.9％、12.3％，兩組比較有顯著性差異（x2=7.014，P=0.03）。但等位基因1595C/1525G和1595T/1525A在對照組與病例組中的分布無顯著性差異（x2=2.940，P=0.086）。 6.慢性乙肝HBeAg陽性患者TRAIL基因1525G/A和159

10、5C/T位點三種基因型1525GG/1595CC、1525GA/1595CT、1525AA/1595TT出現頻率分別為39.0％、50.5％、10.5％，與對照組比較有顯著性差異（x2=6.230，P=0.044）；而慢性乙肝HBeAg陰性患者出現頻率分別為24.2％、59.7％、16.1％，與對照組比較無顯著性差異（x2=4.070，P=0.131）。慢性乙肝HBeAg陽性與陰性患者TRAIL基因1525G/A和1595C/T位點SN

11、Ps比較也無顯著性差異（x2=3.970，P=0.137）。 結論： 中國漢族人存在TRAIL基因1525G/A、1595C/T多態(tài)位點，且1525G/A、1595C/T位點SNPs情況完全一致。TRAIL基因1525G/A、1595C/T位點的SNPs在正常人群的分布無性別差異，而在慢性乙型肝炎患者中的分布存在性別差異。慢性乙肝HBeAg陽性患者與正常人比較，TRAIL基因1525G/A、1595C/T位點SNPs有顯

12、著差異；而慢性乙肝HBeAg陰性患者與正常人比較，TRAIL基因1525G/A、1595C/T位點SNPs無顯著差異。TRAIL基因1525G/A、1595C/T位點SNPs在慢性乙型肝炎組與正常人群的分布有顯著差異，提示TRAIL SNPs與慢性乙型肝炎的易感性有關。 第二部分慢性乙型肝炎患者外周血中睪酮的變化及其意義 背景: 乙型肝炎是由乙肝病毒（hepatitis B virus，HBV）感染引起的肝臟炎癥

13、性病變，是我國當前流行最廣、危害最嚴重的一種傳染病，其中約5％-10％感染者可轉為慢性，遷延數年，反復活動，甚至轉變?yōu)楦斡不蚋伟?。乙型肝炎慢性化與多種因素有關，包括年齡、免疫功能、飲酒、合并感染或藥物等。近年來研究發(fā)現，慢性乙型肝炎患者男性明顯多于女性，至于性激素是否在該病的發(fā)生中起一定作用，目前尚未見相關研究。在睪酮與肝癌的相關性研究中，發(fā)現HBsAg陽性的肝癌患者其血清睪酮水平顯著高于HBsAg陰性患者，為進一步明確血清睪酮水平與

14、慢性乙型肝炎發(fā)生的相關性，本文采用電化學發(fā)光法檢測了65例慢性乙型肝炎患者及35例正常人血清中的睪酮水平，并進一步檢測分析了睪酮與其他生化指標的相關性，旨在探討血清雄激素睪酮在慢性乙型肝炎發(fā)生中的作用及其意義，為慢性乙型肝炎的預防、診斷及治療提供新的思路。 目的: 探討睪酮水平與慢性乙型肝炎發(fā)生的相關性。 方法: 用電化學發(fā)光法測定65例慢性乙型肝炎患者和35例健康者血清睪酮水平，同時用臨床化學國際聯(lián)盟（

15、IFCC）推薦方法分別檢測血清丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、谷氨酸氨基轉移酶（AST）以及γ-谷氨?；D肽酶（GGT），DCA終點法檢測血清總膽紅素（TBIL），AMP法檢測堿性磷酸酶（ALP），免疫比濁法檢測免疫球蛋白IgG、IgM、IgA，熒光定量PCR檢測外周血HBV DNA水平。 結果: 慢性乙型肝炎患者血清睪酮水平顯著高于正常對照組（P<0.01），尤其以20-40歲的慢性乙型肝炎患者血清睪酮升高最為明顯，HBe