大鼠前扣帶皮層內(nèi)去抑制的初步探索：痛情緒調(diào)控的可能機(jī)制.pdf

1、去抑制(disinhibition)可使中樞神經(jīng)元興奮性增高，參與學(xué)習(xí)記憶、藥物成癮、慢性痛等重要的生理、病理過(guò)程。去抑制在痛覺(jué)調(diào)制中的作用逐漸被認(rèn)識(shí)。疼痛包括感覺(jué)分辨和情緒體驗(yàn)兩種成分，痛情緒給病人帶來(lái)無(wú)盡的情感折磨。大量研究提示前扣帶皮層(ACC)在痛情緒中發(fā)揮重要作用，現(xiàn)有研究多著眼于谷氨酸介導(dǎo)的興奮性系統(tǒng)，而有關(guān)ACC內(nèi)去抑制的研究至今鮮有報(bào)道。
　　 本研究采用腦薄片全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)結(jié)合動(dòng)物行為學(xué)方法對(duì)ACC內(nèi)去抑制的

2、功能及可能機(jī)制進(jìn)行初步探索，得到以下主要結(jié)果：
　　 1.首次觀察到去除GABAA受體介導(dǎo)的抑制作用顯著增強(qiáng)ACC內(nèi)的多突觸興奮性傳遞。正常外液灌流時(shí)，電刺激ACC腦片第Ⅱ/Ⅲ層，可在第V層錐體細(xì)胞上引起潛伏期短且恒定的單突觸反應(yīng)，稱之為“早反應(yīng)”。在灌流液中加入GABAA受體拮抗劑bicuculline(10μM)去除GABAA受體介導(dǎo)的抑制作用，四分鐘后同樣的刺激可引起潛伏期較長(zhǎng)且不恒定的“晚反應(yīng)”，繼續(xù)灌流bicucull

3、ine，“晚反應(yīng)”還會(huì)進(jìn)一步增大。高濃度二價(jià)陽(yáng)離子(4.2 mM Mg2+，7.0 mM Ca2+)的外液可阻斷“晚反應(yīng)”，并且“晚反應(yīng)”不能跟隨較高頻率的電刺激，這說(shuō)明“晚反應(yīng)”為多突觸反應(yīng)。GABAB受體拮抗劑saclofen(250μM)或甘氨酸受體拮抗劑strychnine(0.5μM)均不能引起與bicuculline相似的效應(yīng)。藥理學(xué)分析顯示，“早反應(yīng)”和“晚反應(yīng)”均可被谷氨酸受體拮抗劑DNQX(10μM)和AP-V(50μ

4、M)所阻斷，表明去除ACC內(nèi)GABAA受體介導(dǎo)的抑制作用可大大增強(qiáng)ACC內(nèi)的興奮性突觸傳遞。
　　 2.為進(jìn)一步分析GABA去抑制在痛情緒調(diào)控中的作用，本研究采用動(dòng)物行為學(xué)方法，在大鼠福爾馬林誘導(dǎo)的條件位置回避(F-CPA)模型上，觀察ACC內(nèi)微量注射GABAA受體激動(dòng)劑muscimol對(duì)痛情緒反應(yīng)的影響。對(duì)照組動(dòng)物訓(xùn)練后對(duì)福爾馬林匹配室產(chǎn)生明顯回避，回避分?jǐn)?shù)為191±44s(n=8)。福爾馬林訓(xùn)練前，在ACC內(nèi)微量注射musc

5、imol(10 mM，0.6μL)可阻斷F-CPA的形成，回避分?jǐn)?shù)為-4±25s(n=8)；但muscimol對(duì)福爾馬林引起的急性痛行為沒(méi)有明顯影響。這提示ACC內(nèi)GABA能去抑制可能參與痛厭惡情緒的誘導(dǎo)。
　　 3.首次觀察到多巴胺通過(guò)D2受體和突觸后機(jī)制抑制ACC第V層錐體細(xì)胞上的抑制性突觸后電流(IPSC)。用谷氨酸受體拮抗劑DNQX(10μM)和AP-V(50μM)阻斷興奮性傳遞后，在ACC腦片第Ⅱ/Ⅲ層給予刺激可在第Ⅴ

6、層錐體細(xì)胞上記錄到抑制性突觸后電流(IPSC)，此IPSC可被bicuculline(10μM)阻斷。灌流給予多巴胺(50μM)可抑制IPSC幅度至對(duì)照水平的70.7±7.1％(n=14)。D2受體激動(dòng)劑quinpirole(10μM)也可抑制IPSC，而D1受體激動(dòng)劑SKF38393(10μM)對(duì)IPSC沒(méi)有明顯影響；同時(shí)，多巴胺對(duì)IPSC的抑制作用可被D2受體拮抗劑eticlopride(5μM)所阻斷，而D1受體拮抗劑SCH233

7、90(10μM)則不能翻轉(zhuǎn)多巴胺對(duì)IPSC的抑制作用，這些結(jié)果顯示多巴胺通過(guò)D2受體抑制IPSC。此外，多巴胺可抑制局部給予GABA誘導(dǎo)的電流，而多巴胺對(duì)配對(duì)刺激所引起反應(yīng)的幅度之比率沒(méi)有影響，這提示多巴胺通過(guò)突觸后機(jī)制抑制IPSC。
　　 綜合以上結(jié)果可得出以下結(jié)論：ACC內(nèi)GABA能去抑制可增強(qiáng)ACC內(nèi)的多突觸興奮性傳遞，并可能參與痛相關(guān)情緒的形成；多巴胺通過(guò)D2受體和突觸后機(jī)制抑制ACC第V層錐體神經(jīng)元的IPSC，這可能為