左旋精氨酸改善肺高壓中自由基平衡的分子機制.pdf

1、肺高壓(PH)是臨床常見的病理生理過程,常繼發(fā)于心肺血管疾病,也可為原發(fā)性。如果PH不及早預防或治療將預后甚差。然而,至今對PH發(fā)生的機制,尤其是分子機制仍未完全清楚,為PH的預防和治療帶來明顯的障礙,因此,目前還未找到確切能預防和治療PH的方法,了解清楚PH發(fā)生的機制將有助于尋找PH的防治方法。目前已知血管內(nèi)皮細胞功能在PH中起到異常重要的作用,一氧化氮(NO)是由血管內(nèi)皮細胞產(chǎn)生和釋放的一種舒血管活性物質(zhì),對肺血管平滑肌有選擇性的舒

2、張作用,并可阻斷血管壁的損傷,抑制肺血管平滑肌和成纖維細胞增殖等。已有報道PH中NO產(chǎn)生下降,而應用左旋精氨酸(L-Arg)(生成NO的前體物質(zhì))對早期PH有防治效果,但對中晚期PH的作用及機制未明。 NO與氧自由基(O2-)的平衡在許多心肺血管疾病的發(fā)生和發(fā)展中起相當重要的作用,而內(nèi)皮一氧化氮合酶(eNOS)與熱休克蛋白90(HSP90)的相互作用在這對平衡中有著重要的調(diào)節(jié)作用。但PH中這些變化如何,L-Arg對這些變化有何影

3、響等問題仍未清楚。本研究旨在探討PH發(fā)生的分子機制及L-Arg對中期PH形成的影響及其機理。 方法: 采用一次性腹腔注射野百合堿(MCT)作為誘導大鼠PH模型。選用健康雄性SD大鼠22只,隨機分為3組。正常對照組(C組,n=10);PH組(M組,n=6);L-Arg+PH組(L組,n=6)。分別給后2組大鼠一次性腹腔注射MCT(50 mg/kg)溶液(MCT用生理鹽水和乙醇混合液配制);C組大鼠腹腔注射等量生理鹽水和乙醇

4、的混合液。自注射MCT后每日給L組大鼠連續(xù)腹腔注射L-Arg溶液(300mg/kg)三周；C組、M組大鼠分別每同連續(xù)腹腔注射等量生理鹽水三周。每組大鼠在三周后進行以下各項指標的測定。本研究檢測指標為：(1)通過右心導管檢測右心室收縮壓(RVSP,反映肺動脈壓力)。(2)用化學比色法檢測血漿NO濃度。(3)用二氫溴化乙啶(HEt)灌注肺以檢測肺組織O2-產(chǎn)量。(4)病理學指標(觀察肺動脈壁厚度)。(5)用西點雜交法測定肺組織eNOS和HS

5、P90的表達量。(6)用免疫沉淀試驗測定eNOS與HSP90的結(jié)合量。 結(jié)果: 1.RVSP:M和L組與C組比較均升高,但L組增加幅度較M組小(P<0.05)。 2.NO:C組與L組比較無明顯差異,但M組與前兩組相比減少(P<0.05)。 3.肺組織O2-:M和L組與C組比較均升高,但L組增加幅度較M組小(P<0.05)。 4.病理學指標(肺動脈壁厚度):M和L組與C組比較均增厚,但L組增加幅度較

6、M組小。 5.肺組織eNOS和HSP90的表達：(1)eNOS:M組和L組與C組比較均減少,但L組減少幅度較M組小。(2)HSP90:M組、L組、C三組比較均無明顯差異。 6.肺組織eNOS與HSP90的結(jié)合量:M和L組與C組比較均減少,但L組減少幅度較M組小。 結(jié)論: 本研究表明在PH的形成過程中血漿NO水平下降、肺組織O2-產(chǎn)生增加、肺組織eNOS表達減少和eNOS與HSP90的結(jié)合減少、eNOS的功