Akt在胃腺癌中的表達及其對胃腺癌細胞生存與凋亡的影響.pdf

1、目的：研究Akt在胃腺癌中的表達及其對胃腺癌細胞株AGS生存、凋亡的影響，初步探討Akt在胃腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用及可能機制。 方法：收集60例胃腺癌和20例正常對照標本制作成組織芯片，其中有效胃腺癌標本54例。運用免疫組織化學、免疫細胞化學PowerVisionTM兩步法檢測胃腺癌組織中Akt、PTEN、Bcl-2和Bax蛋白表達以及胃腺癌細胞株AGS中Akt蛋白表達。分別以2％FBS-RPMI 1640和10％FBS-RPMI

2、 1640培養(yǎng)胃腺癌細胞株AGS，采用0.1、1、5、10、20μM Akt抑制劑API-2干預胃腺癌細胞株AGS，24h、48h后采用MTS方法檢測胃腺癌細胞株AGS吸光值，評估API-2對胃腺癌細胞株AGS生存的影響；以2％FBS-RPMI 1640培養(yǎng)胃腺癌細胞株AGS，給予20μM Akt抑制劑API-2干預胃腺癌細胞株AGS，24h、48h后采用Annexin V-FITC凋亡檢測試劑盒I檢測胃腺癌細胞株AGS凋亡率，評估AP

3、I-2對胃腺癌細胞株AGS凋亡的影響。 結(jié)果： 1.Akt在54例胃腺癌和20例正常對照標本中表達的陽性率分別為74.1％和45％，兩者差異有統(tǒng)計學意義(x2=5.515，P<0.05)；Akt表達與年齡、性別、組織學類型、浸潤深度、血管浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理TNM分期無關(guān)(P>0.05)，而與分化程度有關(guān)(x2=11.307，P<0.05)。PTEN在54例胃腺癌和20例正常對照標本中表達的陽性率分別為63％和80％，

4、兩者差異無統(tǒng)計學意義(x2=1.933，P>0.05)；PTEN表達與年齡、性別、組織學類型、分化程度、浸潤深度、血管浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理TNM分期無關(guān)(P>0.05)。Bcl-2在54例胃腺癌和20例正常對照標本中表達的陽性率分別為53.7％和15％；兩者差異有統(tǒng)計學意義(x2=8.908和，P<0.05)。Bcl-2表達與年齡、性別、組織學類型、分化程度、浸潤深度、血管浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理TNM分期無關(guān)(P>0.05)。Bax在

5、54例胃腺癌和20例正常對照標本中表達的陽性率分別為61.1％和30％，兩者差異有統(tǒng)計學意義(x2=5.667，P<0.05)。Bax表達與年齡、性別、組織學類型、分化程度、浸潤深度、血管浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和病理TNM分期無關(guān)(P>0.05)。胃腺癌中Akt與PTEN表達無顯著相關(guān)性(P>0.05)，Akt與Bcl-2表達呈正相關(guān)(r=0.298，P<0.05)，Akt與Bax表達無顯著相關(guān)性(P>0.05)。 2.胃腺癌細胞株A

6、GS中表達Akt蛋白。API-2對2％FBS-RPIM1640培養(yǎng)的胃腺癌細胞株AGS生存抑制呈劑量依賴性(F=6.078，P<0.05)，其中20μm API-2干預胃腺癌細胞AGS48h后吸光值最低，生存率為37.06％。API-2對10％FBS-RPIM1640培養(yǎng)的胃腺癌細胞株AGS生存抑制呈劑量依賴性(F=5.043，P<0.05)，其中20μm API-2干預胃腺癌細胞AGS 48h后吸光值最低，生存率為47.94％。比較2

7、％FBS-RPIM1640和10％FBS-RPIM1640培養(yǎng)的胃腺癌細胞株在不同濃度API-2干預24h或48h后吸光值，差異無統(tǒng)計學意義(F=0.977，P>0.05)。20μM Akt抑制劑API-2干預胃腺癌細胞株AGS 24h凋亡率較對照組(DMSO)高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，20μM Akt抑制劑API-2干預胃腺癌細胞株AGS 48h凋亡率與對照組(DMSO)比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結(jié)論