甲胎蛋白診斷試劑（膠體金法）的研制.pdf

1、本技術(shù)旨在建立一種快速、簡便地檢測人血清中甲胎蛋白（AFP）的膠體金免疫層析方法。方法 采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金，然后標(biāo)記抗甲胎蛋白（AFP）單克隆抗體A1制成免疫膠體金結(jié)合墊。在試劑條連接樣品墊的硝酸纖維素膜（NC）上固定有抗甲胎蛋白（AFP）的單克隆抗體A2做為檢測線，羊抗鼠IgG抗體則做為質(zhì)控線,在膜的另一端為吸收樣品的吸水紙墊。當(dāng)被檢測樣品加入樣品墊后，液體便流向免疫膠體金結(jié)合墊，然后流向硝酸纖維素膜并最終流向吸水紙墊。

2、如果樣品中含有甲胎蛋白（AFP），膜上便會出現(xiàn)肉眼可見的微紅色檢測線，這是由于樣品中的AFP與標(biāo)記有單克隆抗體A1的免疫金結(jié)合形成復(fù)合物，復(fù)合物向膜上移動與固定在膜上的檢測線單克隆抗體A2結(jié)合反應(yīng)，結(jié)果在該處形成固定的微紅色線條。如果樣品中無甲胎蛋白（AFP），則不會在膜上顯示可見的微紅色線檢測線。之后，未結(jié)合的免疫膠體金繼續(xù)在膜上流動并與固定羊抗鼠IgG抗體的質(zhì)控線結(jié)合。因此，檢測后總會有質(zhì)控線顯示，因?yàn)椴还軜悠分惺欠窈屑滋サ鞍祝ˋ