葡萄霜霉病拮抗菌和抗生素篩選及其防治效果的研究.pdf

1、葡萄霜霉病(Grape Downy Mildew)嚴重危害葡萄生產(chǎn)，是制約葡萄產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要因素。目前對葡萄霜霉病的防治，仍以化學防控為主要措施，在葡萄生長季需多次、大量施用化學藥劑，因此存在著病菌產(chǎn)生抗藥性、環(huán)境污染和農(nóng)藥殘毒等諸多問題。因此，開展葡萄霜霉病的生物防治研究具有重要意義。本文旨在通過葡萄霜霉病拮抗菌及抗生素的篩選，以期為葡萄霜霉病的生物防治提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。葡萄霜霉病菌為一種專性寄生菌，存在著病菌難以獲得、發(fā)病

2、時間較長等問題，為了保證后期篩選拮抗菌和抗生素的順利進行，開展了對葡萄霜霉病菌孢子囊形成及離體萌發(fā)適宜條件的研究。研究結(jié)果如下:
　　1將接種葡萄霜霉病菌的離體葡萄葉片，設(shè)置不同光照、溫度、濕度和養(yǎng)分的條件，觀察其發(fā)病情況，發(fā)現(xiàn)在20℃黑暗、濕度為100％并加入2％乳糖的條件下，最適合葡萄霜霉病菌孢子囊的形成。采用水瓊脂法固定孢子囊，研究葡萄霜霉病孢子囊離體萌發(fā)的條件，結(jié)果表明:葡萄霜霉病菌孢子囊懸浮液經(jīng)4℃低溫刺激0.5 h，用

3、2％乳糖置于15℃黑暗條件下培養(yǎng)，孢子囊萌發(fā)率最高，萌發(fā)率為85.3％。
　　2在葡萄霜霉病離體葉片實驗中，與龜裂鏈霉菌、CN300、6Y1混合的葡萄霜霉病孢子囊懸浮液，接于健康葉片5d后發(fā)病率分別為15％、10.83％、0％，較對照在α=0.05水平下有顯著差異。將發(fā)病率較低的CN300、6Y1兩種菌株采用搖床發(fā)酵的方法，對培養(yǎng)液不同濃度和不同成分進行葡萄霜霉病菌抑制效果的進一步研究，結(jié)果表明，真菌6Y1的菌絲對葡萄霜霉病的防治

4、效果顯著，并且隨菌絲濃度的增加，防治效果越明顯。通過形態(tài)學鑒定和18SrDNA ITS序列分析，確定6Y1為蕓苔鏈格孢，為了獲得更多對霜霉病菌有抑制作用的6Y1菌絲，通過單因素及L9(33)正交試驗，研究6Y1發(fā)酵過程中培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)速、接種量、裝液量對6Y1真菌菌絲產(chǎn)量的影響，確定轉(zhuǎn)速為200 r/min，接菌量為2塊、裝瓶量為175 mL的優(yōu)化組合下，菌絲的產(chǎn)量最大，可達到0.907 g/100 mL。
　　3用不同抗生素對健康葡

5、萄葉片處理后，接種葡萄霜霉病菌孢子囊，測定其對葡萄霜霉病的預防效果，發(fā)現(xiàn)武夷菌素300倍、春雷霉素200倍、多抗霉素1000倍3種抗生素對葡萄霜霉病的預防效果分別為81.67％、55％、66.67％，井岡霉素無明顯抑菌效果;在室內(nèi)對已發(fā)病的葡萄葉片（清水洗掉孢子囊），噴灑4種抗生素，3d后觀察治療效果，結(jié)果表明春雷霉素對葡萄霜霉病菌有治療作用。將脂溶性滲透劑與春雷霉素混合后，通過離體葉片治療和田間治療試驗，結(jié)果表明脂溶性滲透劑對春雷霉素