乙肝病毒感染對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞相互作用的影響及其后果.pdf

1、該研究從細(xì)胞生物學(xué)和流行病學(xué)兩個(gè)方面分三個(gè)部分對(duì)其進(jìn)行研究:1.乙肝病毒表面抗原作為單病原負(fù)荷對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞相互作用的影響:該部分研究首先通過間接免疫熒光試驗(yàn)確認(rèn)HBsAg與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附現(xiàn)象;然后,選擇整合有HBV全基因組的HepG2.2.15細(xì)胞的上清及HBV的主要結(jié)構(gòu)成份—乙肝病毒的表面抗原(HBsAg),分別與人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞株ECV-304和單核細(xì)胞株THP-1進(jìn)行孵育,檢測其對(duì)這兩種細(xì)胞的粘附和趨化功能的影

2、響;并進(jìn)一步檢測孵育后ECV-304細(xì)胞中與AS相關(guān)的部分趨化因子的表達(dá).從免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)角度研究了HepG2.2.15細(xì)胞上清或乙肝病毒的表面抗原作為單病原負(fù)荷,對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞相互作用的可能影響.2.乙肝病毒表面抗原在多病原負(fù)荷時(shí)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞相互作用的影響:為了進(jìn)一步研究HBV及其結(jié)構(gòu)成份在多病原負(fù)荷狀態(tài)下,是否會(huì)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞與單核細(xì)胞的相互作用產(chǎn)生同樣影響.該部分引入了細(xì)菌源性感染因子LPS,探討雙病原負(fù)

3、荷狀態(tài)下,HBV及其結(jié)構(gòu)成份對(duì)單核細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞相互作用的影響.以LPS作用后的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV-304作為應(yīng)激狀態(tài)細(xì)胞模型,在此基礎(chǔ)上,進(jìn)行粘附及趨化功能的檢測.結(jié)果表明,在應(yīng)激狀態(tài)下,HepG2.2.15細(xì)胞上清或HBsAg作用于臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞ECV-304,不能顯著影響其對(duì)單核細(xì)胞的趨化及粘附活性,而HBsAg作用于單核細(xì)胞THP-1,其不僅維持了其作為單病原負(fù)荷時(shí),增加單核細(xì)胞粘附的特性(粘附細(xì)胞百分率依然維持在約40﹪

4、),還可顯著抑制應(yīng)激狀態(tài)下,ECV-304對(duì)THP-1的強(qiáng)趨化作用(趨化細(xì)胞百分率由約16﹪降至3﹪).進(jìn)一步在mRNA水平檢測與HBsAg孵育后的THP-1,結(jié)果顯示,多個(gè)趨化因子受體水平顯著下調(diào).3.乙型肝炎感染與動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病相關(guān)性的血清流行病學(xué)研究:為進(jìn)一步澄清HBV在人群中的動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病中是否發(fā)揮作用.我們收集了共446例行冠脈造影術(shù)的患者,根據(jù)冠脈造影結(jié)果將其分為冠脈狹窄組和非狹窄組,并用2復(fù)旦大學(xué)碩士論文ELISA方

5、法檢測患者血清中的乙肝病毒感染兩對(duì)半指標(biāo)及CRP水平,從血清流行病學(xué)角度探討HBV感染的血清學(xué)指標(biāo)、病毒載量和冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生及冠脈狹窄程度之間的關(guān)系;分析了HBV感染與其它動(dòng)脈粥樣硬化傳統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)因子之間可能存在的交互作用;并進(jìn)一步研究了炎癥水平對(duì)HBV感染與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系的影響.綜上所述,我們的研究表明,HBsAg可以影響體外單核細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的相互作用,在單個(gè)和多個(gè)病原負(fù)荷存在時(shí),這種影響基本是一致的,即:HBV及其結(jié)構(gòu)成