阿替普酶對急性腦梗死大鼠超時間窗靜脈溶栓的療效評價.pdf

1、背景
　　腦梗死是世界范圍內(nèi)最常見的致死疾病，也是成人殘疾的首位原因。其中，急性缺血性腦梗死約占1/3～1/4。因此積極治療急性缺血性腦梗死，是我們面臨的重要問題。早期及時的溶栓治療可以使堵塞的腦血管再通，恢復局部腦組織的血液灌流，減少梗死體積、改善其神經(jīng)功能缺損，是目前治療急性腦梗死的唯一有效手段。
　　阿替普酶（r-tPA）是美國FDA唯一認可的作為急性缺血性腦梗死早期溶栓治療的藥物，其安全有效的靜脈使用時間為急性缺血性

2、腦卒中后4.5h內(nèi)。然而急性缺血性腦梗死4.5h后應用r-tPA的有效性及安全性如何？目前仍有爭議。近年來，大量研究通過磁共振成像技術發(fā)現(xiàn)，DWI序列和PWI序列的不匹配區(qū)域可以代表缺血半暗帶，并提出在急性腦梗死癥狀出現(xiàn)后3-9h應用r-tPA靜脈溶栓（超時間窗溶栓）仍可獲益。但超時間窗溶栓是通過何種機制獲益？以及獲益的程度是多少？目前尚無定論。
　　目的
　　本研究應用SD大鼠建立大鼠血栓性大腦中動脈栓塞模型，通過計算腦組

3、織梗死面積、微血管密度和檢測炎癥因子ICAM-1、VCAM-1表達的變化，探究超時間窗r-tPA靜脈溶栓的效果，并研究其機制。
　　方法
　　1.動物模型:216只健康成年SD大鼠隨機分為對照組、梗死組、4.5h溶栓組和6h溶栓組，4.5h溶栓組和6h溶栓組分別于血栓性MCAO模型建立后4.5h、6h給予r-tPA。梗死組、4.5h溶栓組和6h溶栓組分為3個亞組，分別于梗死后1、3、7d處死取腦。對照組大鼠手術操作方法同模型

4、組，只注射生理鹽水，于對應時間點處死取腦。
　　2.TTC染色:通過TTC染色觀察腦梗死體積，梗死組織為白色，非梗死區(qū)域為紅色，使用圖像分析軟件計算腦梗死體積。
　　3.免疫組織化學二步法:使用CD34抗體標記血管，觀察各組在不同時間點(1、3、7d)腦梗死組織周圍微血管，并計算微血管密度。
　　4.實時定量PCR:檢測各組腦組織梗死周圍組織不同時間點(1、3、7d)ICAM-1、VCAM-1mRNA的表達
　　

5、結果
　　1.各時間點(1、3、7d)4.5h溶栓組和6h溶栓組腦梗死體積較梗死組均明顯縮小（P均＜0.01）。6h溶栓組腦梗死體積在3個時間點較4.5h溶栓組體積均增大(P＜0.05);對照組大鼠未發(fā)現(xiàn)梗死灶。
　　2.腦梗死3d，4.5h溶栓組和6h溶栓組微血管密度(MVD)表達較梗死組均增加（P均＜0.05），7d時，4.5h溶栓組和6h溶栓組MVD表達較梗死組增加更為明顯（P均＜0.01）。隨病程進展，4.5h溶栓組

6、和6h溶栓組MVD逐步增加，7d較3d時增加明顯(P＜0.05)，但兩溶栓組之間比較，在1、3、7dMVD無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05);對照組和梗死組MVD無明顯改變。
　　3.腦梗死后ICAM-1、VCAM-1mRNA表達量與對照組相比，1d時開始升高(P＜0.01)，3d達高峰(P＜0.01)，7d仍高于對照組(P＜0.01)，4.5h溶栓組和6h溶栓組各時間點ICAM-1、VCAM-1mRNA表達量均較梗死組明顯降低(P