復(fù)榮通脈膠囊對糖尿病大鼠血清ET-1、NO水平及胸主動脈PAI-1、T-PA表達影響的實驗研究.pdf

1、目的:
　　觀察復(fù)榮通脈膠囊對糖尿病大鼠血清ET-1、NO水平及胸主動脈PAI-1、t-PA表達的影響，探討其對大血管病變的作用機制，為臨床治療糖尿病性周圍血管病變提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　將60只成年雄性Wistar大鼠隨機分為兩組，正常對照組(NC組)10只，造模組50只。造模組大鼠禁食12h后，一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg（STZ臨用前用0.1M檸檬酸鈉緩沖液配成濃度為1％、pH=4.2

2、的溶液），正常組腹腔注射等量的檸檬酸鈉緩沖液。72h后尾靜脈取血，血糖值≥16.7mmol/L，確定為糖尿病大鼠。造模成功后大鼠隨機抽取40只，分為糖尿病模型組（DM組，n=10）及復(fù)榮通脈膠囊低劑量組(FRL組，n=10、復(fù)榮通脈膠囊中劑量組(FRM組，n=10)、復(fù)榮通脈膠囊高劑量組（FRH組，n=10）。成模后一周，中藥治療組劑量按人體-大鼠體表面積比值表換算出大鼠的等效劑量為復(fù)榮通脈膠囊中劑量組給予1.4g/(kg·d)灌胃，復(fù)

3、榮通脈膠囊低劑量組給予0.7g/(kg·d)灌胃，復(fù)榮通脈膠囊高劑量組給予2.8g/(kg·d)灌胃[1]。每日灌胃1次，連續(xù)8周。正常對照組和模型組每日給予同等劑量生理鹽水灌胃。實驗期間大鼠自由飲水，喂標準飼料，環(huán)境溫度為22-26℃，實驗期間未使用胰島素和其他降糖藥物。給藥8周末，尾靜脈取血測血糖。腹腔注射3％戊巴比妥80mg/kg麻醉大鼠，腹部正中切口，腹主動脈采血，離心分離血清。測定血清、ET-1、NO水平。留取胸主動脈，置于4

4、％中性福爾馬林溶液中固定，采用免疫組織化學(xué)法檢測PAI-1、tPA。計量資料均采用X±S表示，各組自身前后比較采用配對t檢驗;各組間比較采用單因素方差分析，方差不齊時應(yīng)用多個獨立樣本比較的Kruskal-Wallis H檢驗，所有數(shù)據(jù)用SPSS16.0軟件統(tǒng)計處理，檢驗水準α=0.05。
　　結(jié)果:
　　1、對大鼠一般狀態(tài)的影響正常組大鼠精神好，活潑好動，飲水、進食如常，毛色潔白，各糖尿病組大鼠抱團、少動，反應(yīng)慢，飲水量及進

5、食量、尿量增多，毛色晦暗無光澤。
　　2、對血糖的影響造模前各組大鼠的血糖相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，治療前與NC組相比，DM組及FRL、FRM、FRH組大鼠血糖均顯著升高(P＜0.05)，DM組及FRL、FRM、FRH組間血糖比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。經(jīng)灌胃治療8周后，與NC組相比，DM組及FRL、FRM、FRH組大鼠血糖，均顯著升高（P＜0.05），而DM組及FRL、FRM、FRH組大鼠血糖比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞

6、0.05);NC組、DM組及FRL、FRM、FRH組血糖與治療前相比無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　3、對大鼠血清ET-1水平的影響灌胃治療8周后，與NC組比較，DM組、FRL組、FRM組、FRH組大鼠血清ET-1水平明顯升高(P＜0.05)。與DM組比較，F(xiàn)RL組大鼠血清ET-1水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，F(xiàn)RM組、FRH組ET-1水平明顯下降(P＜0.05)。與FRL組比較，F(xiàn)RM組、FRH組ET-1水平明顯下降(P

7、＜0.05)。與FRM組比較，F(xiàn)RH組大鼠血清ET-1水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　4、對大鼠血清NO水平的影響8周后，與NC組比較，DM組、FRL組、FRM組、FRH組大鼠血清NO水平明顯下降(P＜0.05)。與DM組比較，F(xiàn)RL組大鼠血清NO水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)，F(xiàn)RM組、FRH組NO水平明顯升高(P＜0.05)。與FRL組比較，F(xiàn)RM組、FRH組NO水平明顯升高(P＜0.05)。與FRM組比較，F(xiàn)RH組

8、大鼠血清NO水平無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　5、對胸主動脈PAI-1表達的影響。與NC組大鼠動脈中有少量表達相比，DM、FRL、FRM、FRH組大鼠動脈中表達明顯增多（P＜0.05）。與DM組相比，F(xiàn)RL組表達無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);FRM組、FRH組表達明顯減少(P＜0.05)。與FRL組相比，F(xiàn)RM組表達無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）;FRH組表達明顯減少(P＜0.05)。與FRM組相比，F(xiàn)RH組表達無統(tǒng)計學(xué)差

9、異(P＞0.05)。
　　6、對胸主動脈t-PA表達的影響。與NC組大鼠動脈中有表達較多相比，DM、FRL、FRM、FRH組大鼠動脈中表達明顯減少(P＜0.05)。與DM組相比，F(xiàn)RL組表達無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);FRM組、FRH組表達明顯增多(P＜0.05)。與FRL組相比，F(xiàn)RM組表達無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05);FRH組表達明顯增多(P＜0.05)。與FRM組相比，F(xiàn)RH組表達無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。

10、　　7、對大鼠動脈組織病理學(xué)的觀察光鏡下顯示，NC組為正常胸主動脈組織，內(nèi)膜內(nèi)皮細胞緊密連續(xù)，內(nèi)皮下間隙狹小，中膜平滑肌細胞排列緊密、規(guī)律，胞漿色淡，外膜細胞無異常，未見病理改變;DM組內(nèi)皮細胞表面不規(guī)則隆起，中膜平滑肌細胞增多、侵入內(nèi)膜，排列及結(jié)構(gòu)紊亂。FRL組與DM組動脈組織形態(tài)相似;FRM、FRH組內(nèi)皮細胞連接較緊密，內(nèi)皮下間隙小，中膜平滑肌細胞增殖減少，細胞排列紊亂明顯改善。FRM、FRH組動脈組織結(jié)構(gòu)無明顯差別。
　　結(jié)

11、論:
　　1、本實驗經(jīng)過8周后復(fù)制了糖尿病大鼠模型。
　　2、復(fù)榮通脈膠囊對紊亂的糖代謝無作用。
　　3、復(fù)榮通脈膠囊可降低血清ET-1、升高血清NO水平。
　　4、復(fù)榮通脈膠囊可抑制PAI-1、促進t-PA在大鼠胸主動脈的表達。
　　5、本實驗表明復(fù)榮通脈膠囊可改善血管內(nèi)皮舒縮功能紊亂，調(diào)節(jié)纖溶系統(tǒng)，對糖尿病大血管病變有治療作用，低劑量治療組無明顯效果，中劑量治療組與低劑量治療結(jié)果組間的差別明顯，有統(tǒng)計學(xué)