芍藥苷單用或聯(lián)合氟康唑?qū)π∈笙到y(tǒng)性白念珠菌感染的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:評(píng)價(jià)芍藥苷單用或聯(lián)合氟康唑在小鼠系統(tǒng)性白念珠菌感染模型中的作用及其可能的作用機(jī)制。
　　方法:在本次實(shí)驗(yàn)中，小鼠隨機(jī)分成5組（每組10只）:陽(yáng)性對(duì)照組、芍藥苷組、氟康唑組、芍藥苷+氟康唑組及陰性對(duì)照組。除了陰性對(duì)照組，各組均給予尾靜脈注射白念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC5314細(xì)胞懸液，構(gòu)建小鼠系統(tǒng)性白念珠菌感染模型。在白念珠菌感染前5天，陽(yáng)性對(duì)照組、氟康唑組及陰性對(duì)照組給予生理鹽水灌胃，其余組給予芍藥苷灌胃。感染后繼續(xù)給藥10天，

2、陽(yáng)性對(duì)照組和陰性對(duì)照組給予生理鹽水灌胃，其余組給予相應(yīng)的藥物（芍藥苷、氟康唑或兩者合用）灌胃。在自念珠菌系統(tǒng)感染后觀(guān)察30天，記錄各組小鼠的一般狀況、死亡時(shí)間及死亡數(shù)目。為了進(jìn)一步分析可能的免疫機(jī)制，在感染后第10天，取小鼠眼球靜脈血，利用luminex法測(cè)細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-22、IL-4、IL-17等細(xì)胞因子的水平;與此同時(shí)，利用流式細(xì)胞分析Th1(IFN-γ+CD4+T細(xì)胞)、Th17(IL-17+CD4+T細(xì)胞

3、)及Th2(IL-4+CD4+T細(xì)胞)細(xì)胞的比例。頸椎脫臼處死小鼠，留取各臟器組織，通過(guò)比較各臟器的組織病理學(xué)改變和臟器菌載量評(píng)估炎癥感染程度。另外在感染后第30天，每組隨機(jī)選取4只存活小鼠，頸椎脫臼處死，留取肝、腎、脾進(jìn)行稱(chēng)重、研磨、培養(yǎng)和菌落計(jì)數(shù)。
　　結(jié)果:
　　(1)計(jì)算小鼠30天的平均生存時(shí)間（單位天）:陽(yáng)性對(duì)照組10.4±2.50，芍藥苷組8.2±1.75，氟康唑組29±3.16，芍藥苷+氟康唑組24.6±6.5

4、5，陰性對(duì)照組30。相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照組，芍藥苷組縮短了小鼠的平均生存時(shí)間(p＜0.05);相對(duì)于氟康唑組，芍藥苷+氟康唑組的小鼠的平均生存時(shí)間同樣縮短，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。
　　(2)血清細(xì)胞因子結(jié)果顯示:陽(yáng)性對(duì)照組血清細(xì)胞因子IFN-γ、IL-17及IL-22的水平高于芍藥苷組，而IL-4水平降低。相對(duì)于氟康唑組，芍藥苷+氟康唑組血清細(xì)胞因子IFN-γ、IL-17及IL-22的水平下降，而IL-4水平升高（p＜0.

5、05)。
　　(3)流式細(xì)胞分析表明:相對(duì)于陽(yáng)性對(duì)照組，芍藥苷組Th1(IFN-γ+CD4+)、Th17(IL-17+CD4+)細(xì)胞比例下降，而Th2(IL-4+CD4+)細(xì)胞的比例上升（p＜0.05)。相對(duì)于氟康唑組，芍藥苷+氟康唑組Th1(IFN-γ+CD4+T細(xì)胞)、Th17(IL-17+CD4+T細(xì)胞)比例下降，而Th2(IL-4+CD4+T細(xì)胞)的比例上升(p＜0.05)。
　　(4)計(jì)算感染后第10天、30天，小

6、鼠腎臟菌落計(jì)數(shù)，實(shí)驗(yàn)第10天各組腎臟菌落計(jì)數(shù)為:陽(yáng)性對(duì)照組4.97±0.65，芍藥苷組5.10±0.37，氟康唑組3.21±0.11，芍藥苷+氟康唑組4.61±0.14，陰性對(duì)照組0，陽(yáng)性對(duì)照組腎臟載菌量多于芍藥苷組(P＜0.05)，芍藥苷+氟康唑組腎臟載菌量大于氟康唑組，統(tǒng)計(jì)學(xué)上有明顯意義（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)第30天氟康唑組腎臟載菌量為:3.49±0.52，芍藥苷+氟康唑組腎臟載菌量:5.03±0.55，兩組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p