靶向干預(yù)AKR1B10-S1P信號(hào)通路抑制小鼠肝癌生長的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是最常見的惡性腫瘤之一，全球半數(shù)以上的肝癌發(fā)生在中國，由于其病情發(fā)展隱匿，且缺乏有效的早期診斷方法，使得大部分肝癌病人治療時(shí)已至中晚期，預(yù)后往往較差。AKR1B10最先是從肝癌組織中克隆分離出來的，研究表明，AKR1B10可成為肝癌早期診斷的血清學(xué)分子標(biāo)志物。近期我們研究發(fā)現(xiàn)，S1P是AKR1B10的下游信號(hào)分子，抑制AKR1B10可抑制腫瘤細(xì)胞的生長

2、，并且S1P的水平降低。為進(jìn)一步明確靶向干預(yù)AKR1B10-S1P信號(hào)通路對(duì)肝癌生長的影響，本文將從動(dòng)物水平進(jìn)行研究，探討AKR1B10-S1P信號(hào)通路是否能作為肝癌新的潛在的治療靶點(diǎn)。
　　方法：
　　1.采用肝癌細(xì)胞HepG2建立肝癌皮下移植瘤模型。將裸鼠隨機(jī)分成對(duì)照組、OA實(shí)驗(yàn)組和FTY720實(shí)驗(yàn)組。
　　2.當(dāng)腫瘤體積達(dá)到70–100 mm3時(shí)，各組分別腹腔注射生理鹽水、OA(20 mg/kg)或 FTY720

3、(10 mg/kg)，隔天注射一次，共治療21天。
　　3.每?jī)商煊糜螛?biāo)卡尺測(cè)量腫瘤的大小，用公式計(jì)算出腫瘤的體積大小V=[L×W2]÷2，V代表體積，L代表長徑，W代表短徑。治療結(jié)束后收集腫瘤組織。
　　4.收集腫瘤標(biāo)本和血液標(biāo)本，稱量裸鼠腫瘤的重量，用HE染色的方法觀測(cè)裸鼠腫瘤的細(xì)胞形態(tài)。
　　5.采用Western-blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)AKR1B10-S1P信號(hào)通路的一些重要蛋白的表達(dá)水平。
　　6.TUNEL

4、檢測(cè)分析腫瘤組織細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)果：
　　1.AKR1B10抑制劑OA明顯抑制腫瘤生長。
　　2.S1P抑制劑FTY720明顯抑制腫瘤生長。
　　3.OA和FTY720抑制裸鼠腫瘤AKR1B10的表達(dá)。
　　4.OA和FTY720抑制S1P相關(guān)代謝酶的表達(dá)。
　　5.靶向抑制AKR1B10-S1P誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)論：
　　1.靶向干預(yù)AKR1B10-S1P信號(hào)通路可顯著抑制肝癌