S1P通過(guò)S1PR2抑制癌細(xì)胞遷移及其信號(hào)通路的研究.pdf

1、癌癥是危及人類健康的重大疾病之一，癌癥的發(fā)生和發(fā)展受許多信號(hào)通路的調(diào)控。細(xì)胞膜上的S1P受體S1PRs（包括S1PR1、S1PR2、S1PR3、S1PR4和S1PR5）能夠被S1P激活，介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)多條信號(hào)通路，調(diào)控細(xì)胞的生理功能，如細(xì)胞增殖、遷移、凋亡、血管生成等。這些受體是跨膜蛋白，能夠與細(xì)胞內(nèi)不同類型的G蛋白偶聯(lián)，激活下游的信號(hào)分子，傳遞信號(hào)。腫瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖和轉(zhuǎn)移的特性。有研究報(bào)道S1PR2能夠抑制內(nèi)皮細(xì)胞和黑色素瘤細(xì)胞的遷移

2、，還能抑制彌散性B細(xì)胞淋巴瘤的產(chǎn)生，可能是一種具有抑癌作用的受體。因此，研究S1PR2在腫瘤細(xì)胞遷移中的作用及其信號(hào)通路對(duì)于腫瘤治療具有重要的意義。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用Real Time PCR技術(shù)檢測(cè)多種細(xì)胞中S1PRs的表達(dá)。并選取S1PR2高表達(dá)的人胃癌細(xì)胞SGC-7901和BGC-803細(xì)胞，用Micro Chemotaxis Chamber檢查了S1P刺激下細(xì)胞的遷移，同時(shí)用S1PR2的拈抗劑JTE-013預(yù)處理細(xì)胞后，檢測(cè)S1PS1P

3、刺激下細(xì)胞遷移，探究S1PR2對(duì)細(xì)胞遷移的影響?？寺×巳薙1PR2的cDNA，構(gòu)建了S1PR2過(guò)表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染到S1PR2低表達(dá)的人肺癌細(xì)胞A549中，成功構(gòu)建S1PR2過(guò)表達(dá)細(xì)胞模型，并檢查S1P刺激下細(xì)胞遷移，進(jìn)一步驗(yàn)證S1PR2對(duì)細(xì)胞遷移的作用。利用S1PR2高表達(dá)的SGC-7901細(xì)胞，使用了多種抑制劑（Gi蛋白抑制劑PTX，ERK的抑制劑PD98059，Rho激酶抑制劑Y27632和NF-κB抑制劑BAY）探索S1PR2抑制細(xì)

4、胞遷移的信號(hào)通路。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:在A549、HCT-116、A2780、HO-8910細(xì)胞中S1PR3高表達(dá)，S1PR2表達(dá)量低于S1PR3表達(dá)量，在我們檢測(cè)的胃癌細(xì)胞中S1PR2都高表達(dá)。用S1P刺激細(xì)胞后，細(xì)胞的遷移能力下降，當(dāng)用JTE-013預(yù)處理細(xì)胞，被S1P抑制的細(xì)胞遷移能力得到恢復(fù)，證明S1P通過(guò)S1PR2抑制了細(xì)胞的遷移。當(dāng)用抑制劑PTX、PD98059、Y27632和BAY處理細(xì)胞后，S1P通過(guò)S1PR2抑制細(xì)胞遷移的作