2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、背景:
  Hedgehog(Hh)信號通路是在研究果蠅基因突變遺傳分析時發(fā)現(xiàn)的,對機體多種器官發(fā)育起著重要的作用。近年來越來越多的研究發(fā)現(xiàn)Hh信號通路與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展亦密切有關(guān),比如基底細胞癌、非小細胞肺癌、膀胱癌和胰腺癌等。在級聯(lián)Hh信號通路中,轉(zhuǎn)錄因子Gli是其級聯(lián)傳導(dǎo)的末點,因此,又有人稱之為Hh/Gli信號通路。Suppressor of Fused(SuFu)是Hedgehog(Hh)信號通路最保守的關(guān)鍵組分之一,

2、在Hh信號通路中發(fā)揮重要作用。有研究報道SuFu可以抑制Hh信號通路的活性,但其調(diào)節(jié)Hh信號通路的機制還不是很清楚。
  Nek2A是絲氨酸/蘇氨酸激酶Nek家族蛋白中的一員,主要調(diào)節(jié)細胞中的中心體。Nek家族蛋白主要有3種剪切形式,分別是Nek2A、Nek2B和Nek2C,在脊椎動物中主要以Nek2A和Nek2B兩種剪切形式存在。由于Nek2在細胞有絲分裂以及癌癥相關(guān)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中重要的調(diào)節(jié)作用,其已成為一個重要的致癌基因。在

3、Nek2高表達的腫瘤中,患者表現(xiàn)出不良預(yù)后。
  我們前期的研究發(fā)現(xiàn)NIMA相關(guān)表達激酶2A(Nek2A)與Hh信號通路抑制因子SuFu相互作用,鑒于Nek2A和SuFu在腫瘤中發(fā)揮的重要作用及他們之間的相互作用,研究Hh/SuFu/Nek2A之間的相互作用將會為解決人類疾病提供一個新的思路。
  目的:
  1、研究Nek2A對SuFu的調(diào)控機制;
  2、分析Nek2A與Hh信號通路之間的相互作用;
 

4、 3、闡明Gli1/2調(diào)控NEK2A的分子機制。
  方法:
  1、Western blot檢測Nek2A對SuFu及Hh信號通路各組份蛋白表達的影響;
  2、免疫共沉淀檢測Nek2A對SuFu蛋白穩(wěn)定性的影響;
  3、Real-time PCR檢測Nek2A對Hh信號通路各組分mRNA的影響;
  4、雙熒光素報告基因和染色質(zhì)免疫共沉淀實驗檢測Gli1/2調(diào)控NEK2A轉(zhuǎn)錄的分子機制。
  結(jié)

5、果:
  1、Western blot實驗結(jié)果表明Nek2A抑制SuFu泛素化降解;
  2、Western blot和Real-time PCR實驗結(jié)果表明干擾Nek2A激活Hh信號通路;
  3、Western blot和Real-time PCR實驗結(jié)果表明Hh信號通路調(diào)節(jié)Nek2A;
  4、雙熒光素報告基因和染色質(zhì)免疫共沉淀實驗結(jié)果表明NEK2A是Gli1/2的靶基因。
  結(jié)論:
  Gl

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