矽肺患者自身免疫相關(guān)指標(biāo)水平及與臨床病情關(guān)系的研究.pdf

1、背景及目的：塵肺是我國(guó)頭號(hào)職業(yè)病，是指在職業(yè)活動(dòng)中長(zhǎng)期吸入生產(chǎn)性礦物性粉塵并在肺內(nèi)潴留而引起的以肺組織彌漫性纖維化為主的疾病。其中，又以矽肺對(duì)工人健康危害最為嚴(yán)重，其病例數(shù)占?jí)m肺總病例逾半。因矽肺患者人數(shù)眾多，對(duì)工人健康危害大，矽肺的發(fā)病機(jī)制一直是國(guó)內(nèi)外職業(yè)衛(wèi)生研究人員關(guān)注的重點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，吸入體內(nèi)的粉塵顆?？梢约せ钭陨砻庖呒?xì)胞從而介導(dǎo)包括自身免疫病在內(nèi)的許多免疫異常。本研究通過(guò)分析矽肺患者血清中與自身免疫情況相關(guān)的類風(fēng)濕因子（RF）、

2、抗雙鏈 DNA抗體（抗ds-DNA抗體）、叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子3（Foxp3）、維甲酸相關(guān)孤核受體γt（RORγt）、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞（CD4+CD25+regulatory T cells，Tregs）、輔助性T細(xì)胞17（T help cell17, Th17）、白介素17（IL-17）等免疫指標(biāo)的表達(dá)水平和抗核抗體(ANA)的異常率，及其與矽肺患者肺部病變程度的相關(guān)性。初步探討矽肺患者免疫狀況及其與矽肺患者自身肺部病變程

3、度的相關(guān)性。嘗試找出能協(xié)助反映矽肺患者肺部實(shí)際病變情況的客觀指標(biāo)，為輔佐臨床診斷、病情判斷、改善治療方案及療效判斷等提供理論參考依據(jù)。
　　方法：
　　1.研究對(duì)象
　　分別以120例矽肺患者為矽肺組，90例無(wú)職業(yè)危害因素接觸的醫(yī)務(wù)工作者及辦公室文職人員為健康對(duì)照組，收集兩組人員的年齡、性別、吸煙習(xí)慣、既往疾病史等一般情況。收集矽肺組的工種、工齡、矽肺診斷期別、總體密集度。
　　2.實(shí)驗(yàn)方法
　　2.1 血

4、樣標(biāo)本收集收集矽肺組患者入院后第2天晨起空腹全血5ml/10ml，收集健康對(duì)照組晨起空腹全血5ml/10ml，經(jīng)離心后留取血清備檢。
　　2.2 采用免疫比濁法檢測(cè)類風(fēng)濕因子表達(dá)水平、酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)抗ds-DNA抗體、間接免疫熒光法檢測(cè)ANA滴度、Real-time PCR法測(cè)定轉(zhuǎn)錄因子Foxp3及RORγt表達(dá)水平、流式細(xì)胞計(jì)量法測(cè)定Treg、Th17細(xì)胞表達(dá)水平、ELISA方法測(cè)定血清IL-17細(xì)胞因子水平。
　　2

5、.3 矽肺組入院后第二日進(jìn)行血?dú)夥治鰴z測(cè)，收集血?dú)夥治鲋笜?biāo)二氧化碳分壓（PCO2）、氧分壓（PO2）檢查結(jié)果。
　　2.4 矽肺組入院后第二日進(jìn)行肺通氣功能檢測(cè)，收集相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)結(jié)果。檢測(cè)項(xiàng)目包括用力肺活量( FVC)、第1秒用力呼氣容量(FEV1)、1秒率(FEV1％)、最高呼氣流量(PEF)、最大呼氣期流量(FEF25～75%)；用力呼氣25%肺活量的瞬間流量( FEF25%)、用力呼氣50%肺活量的瞬間流量( FEF50%)

6、、用力呼氣75%肺活量的瞬間流量( FEF75%)、第1秒用力呼氣容量占肺活量百分比（FEV1/VC%）。
　　3.統(tǒng)計(jì)方法
　　采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有計(jì)量資料均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)（K-S檢驗(yàn)），符合正態(tài)分布用xs形式描述，不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用M（P25，P75）描述，兩組之間比較采用兩樣本的t檢驗(yàn)或兩樣本的秩和檢驗(yàn)，多組之間比較采用方差分析或多樣本比較的秩和檢驗(yàn)；率比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher's

7、確切概率法；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析或Spearman等級(jí)相關(guān)分析。
　　結(jié)果：
　　1、矽肺組ANA異常率高于健康對(duì)照組（P＜0.05），但在不同的矽塵接觸時(shí)間、矽肺分期、總體密集度、肺通氣功能及血?dú)夥治鲋笜?biāo)氧分壓正常與否間的異常率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　2、矽肺組與健康對(duì)照組血清中的RF、抗ds-DNA抗體表達(dá)水平均在檢測(cè)正常范圍內(nèi)，兩組間的RF、ds-DNA抗體表達(dá)水平比較，差異

8、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同矽肺分期、總體密集度之間RF、抗ds-DNA抗體表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；矽肺患者RF表達(dá)水平與年齡存在弱的正相關(guān)（rs為0.227，P＜0.05），與矽塵接觸時(shí)間、肺通氣功能實(shí)測(cè)值占預(yù)計(jì)值的百分比、血二氧化碳分壓、血氧分壓均不存在相關(guān)關(guān)系（P＞0.05）；抗ds-DNA抗體表達(dá)水平與年齡、矽塵接觸時(shí)間、肺通氣功能實(shí)測(cè)值占預(yù)計(jì)值的百分比、血二氧化碳分壓、血氧分壓均不存在相關(guān)關(guān)系（P＞0.05

9、）。
　　3、矽肺組血清中的轉(zhuǎn)錄因子Foxp3及RORγt表達(dá)水平高于健康對(duì)照組（P＜0.05）；矽肺叁期患者血清轉(zhuǎn)錄因子Foxp3表達(dá)水平高于矽肺壹期、矽肺貳期患者（P＜0.05）；矽肺叁期患者血清轉(zhuǎn)錄因子RORγt高于矽肺壹期患者（P＜0.05）；矽肺壹期、貳期間Foxp3及RORγt表達(dá)水平比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；矽肺貳期與叁期患者間轉(zhuǎn)錄因子RORγt表達(dá)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。不同總體密集度矽

10、肺患者間Foxp3及RORγt表達(dá)水平比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；Foxp3及RORγt表達(dá)水平與矽肺患者年齡、矽塵接觸時(shí)間、肺通氣功能、血?dú)夥治鼍淮嬖谙嚓P(guān)關(guān)系（P＞0.05）。
　　4、矽肺組血清中的Treg、Th17細(xì)胞表達(dá)水平高于健康對(duì)照組（P＜0.05）；矽肺壹期與貳期+叁期兩組間患者的血清Treg、Th17細(xì)胞表達(dá)水平比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；矽肺患者Treg細(xì)胞表達(dá)水平與矽塵接觸時(shí)間存在負(fù)相關(guān)（rs為

11、-0.390，P＜0.05），與肺通氣功能FVC、FEV1實(shí)測(cè)值占預(yù)計(jì)值的百分比存在正相關(guān)（rs分別為0.487、0.460，P＜0.05），與年齡、血氧分壓、血二氧化碳分壓、肺通氣功能其他指標(biāo)的實(shí)測(cè)值占預(yù)計(jì)值的百分比不存在相關(guān)關(guān)系（P＞0.05）；矽肺患者Th17細(xì)胞表達(dá)水平與年齡、矽塵接觸時(shí)間、肺通氣功能、血?dú)夥治鼍淮嬖谙嚓P(guān)關(guān)系（P＞0.05）。
　　5、矽肺組血清中的IL-17表達(dá)水平高于健康對(duì)照組（P＜0.05）；不同矽

12、肺分期、總體密集度之間IL-17表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；IL-17表達(dá)水平與矽肺患者年齡、矽塵接觸時(shí)間、肺通氣功能、血?dú)夥治鼍淮嬖谙嚓P(guān)關(guān)系（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、部分矽肺患者出現(xiàn)機(jī)體免疫紊亂，可出現(xiàn)自身免疫抗體；
　　2、矽肺患者ANA異常率高于正常人，但目前未發(fā)現(xiàn)其與矽肺肺部病變程度存在相關(guān)性；
　　3、矽肺患者RF值、抗ds-DNA抗體水平均在正常范圍內(nèi)，抗ds-DNA抗體水平

13、有隨矽肺分期增加而升高的趨勢(shì)，但與正常人群比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；且目前未發(fā)現(xiàn)上述兩者與矽肺肺部病變程度存在相關(guān)性。
　　4、矽肺患者Treg、Th17細(xì)胞及其關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子Foxp3、RORγt和細(xì)胞因子IL-17的表達(dá)水平均高于正常人群，且Foxp3、RORγt和IL-17的表達(dá)水平表現(xiàn)出隨矽肺分期增加而升高的趨勢(shì)，說(shuō)明Treg、Th17及其關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子參與了矽肺患者的免疫紊亂，可能與矽肺嚴(yán)重程度存在關(guān)聯(lián)。
　　5、目