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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討新生大鼠肺、腎、肝和皮膚四種器官成纖維細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點(diǎn)、表面標(biāo)記、多向分化潛能等方面差異,證實(shí)不同器官成纖維細(xì)胞的生物學(xué)表型差別,篩選器官修復(fù)優(yōu)勢(shì)成纖維細(xì)胞。
方法:
利用酶聯(lián)合消化法對(duì)肝、肺、腎和皮膚成纖維細(xì)胞進(jìn)行體外分離培養(yǎng),細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)成纖維細(xì)胞常見標(biāo)記vimentin、DDR2和FSP1,干細(xì)胞表面標(biāo)記nanog和c-kit的表達(dá)差異,條件誘導(dǎo)液體外誘導(dǎo)四個(gè)器官成纖維細(xì)胞成骨、成脂和
2、成神經(jīng)分化,并分析比較其分化差異。
結(jié)果:
采用酶聯(lián)合消化法和差速貼壁法分離培養(yǎng)成纖維細(xì)胞純度高且收獲細(xì)胞量大。新生大鼠肺、肝、腎和皮膚組織塊酶消化時(shí)間分別為30min、25min、35min和80min;各個(gè)器官成纖維細(xì)胞形態(tài)無太大差異;常見成纖維細(xì)胞標(biāo)記DDR2,在皮膚和肝僅有極少部分成纖維細(xì)胞表達(dá),但在肺和腎中未見表達(dá),而vimentin和FSP1在這四種器官的成纖維細(xì)胞中均表達(dá);肺中nanog+成纖維細(xì)胞顯著
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