PI3K-Akt-GSK3β信號通路在脂肪乳救治布比卡因致H9C2心肌細胞凋亡中的表達.pdf

1、目的：本實驗擬通過干擾PI3K/Akt/GSK3β信號通路和線粒體通透性轉運孔（mPTP）開放，確定此信號通路是否參與脂肪乳（LE）救治BPV所致心肌細胞線粒體功能障礙和凋亡。
　　方法：H9C2心肌細胞復蘇培養(yǎng)，以105/ml細胞密度接種于96孔板上，隨機分為8組：空白對照組（Control組）、1mM布比卡因組（BPV組）、1％脂肪乳組（LE組）、1mM布比卡因+1%脂肪乳組（BPV+LE組）、1mM布比卡因+1%脂肪乳+10

2、μM環(huán)孢素A組（BPV+LE+CsA組）、1mM布比卡因+1%脂肪乳+20μM蒼術苷組（BPV+LE+Atr組）、1mM布比卡因+1%脂肪乳+10μMTWS119組（BPV+LE+TWS組）、1mM布比卡因+1%脂肪乳+30μMLY294002組（BPV+LE+LY組）。細胞孵育24小時后檢測線粒體呼吸鏈復合體（Complex）活性、能量代謝、細胞凋亡率、pAkt/Akt和pGSK3β/GSK3β蛋白表達、mPTP開放情況。
　　

3、結果：Complex活性、能量代謝（ATP、ADP、AMP含量）、細胞凋亡率、pAkt/Akt和pGSK3β/GSK3β蛋白表達和mPTP開放情況（鈣黃綠素熒光強度）不同處理組間差異有統計學意義（P<0.05）。與Control組比較，BPV組Complex活性、能量代謝、pAkt/Akt和pGSK3β/GSK3β蛋白表達、鈣黃綠素熒光強度降低，細胞凋亡率增加，差異有統計學意義(P<0.05)；LE組ComplexⅢ活性、ATP和ADP

4、含量、pAkt/Akt蛋白表達增加，細胞凋亡率降低，差異有統計學意義（P<0.05）；BPV+LE組ATP含量、細胞凋亡率、pAkt/Akt蛋白表達增加、AMP含量、鈣黃綠素熒光強度下降，差異有統計學意義（P<0.05）。與BPV組比較，LE組和BPV+LE組Complex活性、能量代謝、pAkt/Akt和pGSK3β/GSK3β表達水平、鈣黃綠素熒光強度增加，細胞凋亡率下降，差異有統計學意義(P<0.05)。與BPV+LE組比較，LE

5、組、BPV+LE+CsA組及BPV+LE+TWS組部分Complex活性、能量代謝、pAkt/Akt和pGSK3β/GSK3β蛋白表達、鈣黃綠素熒光強度增加，細胞凋亡率下降，差異有統計學意義(P<0.05)；BPV+LE+Atr組和BPV+LE+LY組部分Complex活性、能量代謝、pAkt/Akt和pGSK3β/GSK3β蛋白表達、鈣黃綠素熒光強度降低，細胞凋亡率增加，差異有統計學意義(P<0.05)。
　　結論：LE可能通過