JAK-STAT信號通路在腸道病毒71型感染THP-1細胞中的作用機制.pdf

1、目的：研究JAK/STAT信號通路在腸道病毒71型（EV71）感染THP-1細胞中的作用機制，闡明EV71感染THP-1細胞后JAK/STAT信號通路關鍵蛋白的變化，為抗病毒藥物的研發(fā)提供新的途徑和思路。
　　方法：人橫紋肌肉瘤（RD）細胞擴增 EV71，采用Reed-Muench測定病毒滴度。采用實時熒光定量（real-time qRT-PCR）法檢測EV71感染人單核巨噬細胞（THP-1）后4種干擾素刺激基因ISG15、ISG

2、56、OAS和MXA的mRNA水平和IFN-β的產生，觀察IFN-β1a（1000u/ml）和IFN-α2b（1000u/ml）對EV71感染及復制的作用，并采用Western blot分析JAK1、TYK2、IFNAR及轉錄因子STAT1和STAT2磷酸化水平,以及 JAK/STAT信號通路轉錄因子STAT1抑制劑Fludarabine(20μM)和慢病毒介導的shRNA-STAT1沉默對4種干擾素刺激基因及EV71/VP1表達水平的

3、影響。
　　結果：EV71感染 THP-1細胞后，IFN-β mRNA的相對表達量上調，并刺激了MXA、OAS1和ISG56 mRNA的表達及JAK1、TYK2及STAT1的磷酸化水平。與EV71感染組相比，EV71感染的THP-1細胞經Ⅰ型干擾素（IFN-α2b和IFN-β1a）處理后JAK1、TYK2及STAT1磷酸化水平明顯上調，而IFNAR未見明顯變化，并抑制EV71復制。THP-1細胞經STAT1抑制劑Fludarabi