喜樹堿類似物FL118對人乳腺癌侵襲轉移的影響及機制研究.pdf

1、 喜樹堿類 喜樹堿類似物 似物 FL118 FL118 對人乳腺癌侵襲轉移的影響及機制研究 對人乳腺癌侵襲轉移的影響及機制研究 摘要 摘要 目的 目的 探討喜樹堿類似物 FL118 對人乳腺癌 MDA-MB-231 細胞侵襲轉移能力的影響及其作用機制。 方法 方法 以高轉移的人乳腺癌 MDA-MB-231 細胞為研究對象，通過細胞增殖實驗(MTT)觀察 FL118對腫瘤細胞活性及增殖情況的影響； 流式細胞儀測定腫瘤細胞周期分布；細胞

2、平板克隆形成實驗、劃痕修復實驗及 Transwell 侵襲實驗檢測 FL118 干預后腫瘤細胞的平板克隆形成、轉移及侵襲能力變化；實時熒光定量 PCR(qPCR)、免疫細胞化學 （ICC） 和免疫印跡雜交 （Western Blot） 實驗檢測FL118對乳腺癌細胞survivin和上皮間質(zhì)轉化 （EMT） 相關信號分子E-鈣黏蛋白 （E-Cadherin） 、 波形蛋白 （Vimentin）以及 Wnt 信號通路核內(nèi)關鍵蛋白 β -

3、連環(huán)蛋白（β -catenin）及細胞周期素 1（CyclinDl）的 mRNA 和蛋白水平的表達。 結果 結果 FL118 對 MDA-MB-231 細胞有增殖抑制作用，呈現(xiàn)一定的量效及時效關系(P<0.05)，且效果優(yōu)于陽性對照組(P<0.05)；FL118 使 MDA-MB-231 細胞有絲分裂受阻于 S 期(P<0.05)；FL118 可降低 MDA-MB-231 細胞的平板克隆形成能力(P<0.05)

4、；劃痕實驗及侵襲實驗的結果表明 FL118 可以使 MDA-MB-231 細胞的轉移和侵襲能力下降(P<0.05)；qPCR、 ICC 和 Western Blot 結果顯示， FL118 干預后， 乳腺癌 MDA-MB-231細胞 E-Cadherin 的 mRNA 及蛋白表達水平上升(P<0.05)，Vimentin、Survivin、β-catenin 及 CyclinDl 的 mRNA 及蛋白表達水平下降(P＜0.

5、05)。 結論 結論 FL118 能抑制乳腺癌 MDA-MB-231 細胞的增殖、克隆形成能力、轉移和侵襲能力，并能提高 E-Cadherin 表達，降低 Vimentin 和 Survivin 表達,降低核內(nèi)β-catenin 及 CyclinDl 的表達，初步證明 FL118 抑制 EMT 的機制與 Wnt 通路有關。 碩士研究生 碩士研究生 劉冉冉（藥理學） 劉冉冉（藥理學） 指導教師 指導教師 金景玉 金景玉 副教授 副教

6、授 姜國輝 姜國輝 教授 教授 關鍵詞： 關鍵詞： FL118 FL118、乳腺癌、侵襲轉移、 、乳腺癌、侵襲轉移、EMT EMT、Wnt Wnt 英文縮寫詞表 英文縮寫詞表 縮寫 英文全稱 中文全稱 EMT epithelial-Mesenchymal-transitions 上皮間質(zhì)轉化 ICC immunocytochemistry 免疫細胞化學 qPCR Real-time fluorescent quantit

7、ative PCR 實時熒光定量 PCR PVDF polyvinylidenedifluoride 聚二氟乙烯膜 WB Western Blot 免疫印跡雜交 ER estrogen receptor 雌激素受體 IGFR-1 insulin-like growth factors-1 胰島素樣生長因子受體 VEGF vascular endothelial growth factor 血管內(nèi)皮生長因子 EGF

8、R Epidermal Growth Factor Receptor 表皮生長因子受體 HER-2 human epidermalgrowth factor receptor-2 表皮生長因子受體 2 FGFR Fibroblast Growth Factor Receptor 成纖維生長因子受體 MAPK mitogen-activated protein kinase 絲裂原活化蛋白激酶 PI3K 磷脂酰肌醇 3 激

9、酶 IRS-1 insulin receptor substrate-1 胰島素受體底物 1 MMPs matrix Metalloproteinases 基質(zhì)金屬蛋白酶 PKB Proteinkinase B 蛋白激酶 B mTOR Mammalian target of rapamycin 哺乳動物雷帕霉素靶蛋白 ERK Extracellular regulated protein kinases 細胞外調(diào)

10、蛋白激酶 TNF-α tumor necrosis factor-α 腫瘤壞死因子-α IFN Interferon 干擾素 CSF colony stimulating factor 集落刺激因子 IL Interleukin 白細胞介素 BRCA1 Breast cancer susceptibility gene 1 人乳腺癌易感基因 1 ERE Estrogen response elements