喜樹堿類似物FL118對(duì)人乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響及機(jī)制研究.pdf

1、 喜樹堿類 喜樹堿類似物 似物 FL118 FL118 對(duì)人乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響及機(jī)制研究 對(duì)人乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的影響及機(jī)制研究 摘要 摘要 目的 目的 探討喜樹堿類似物 FL118 對(duì)人乳腺癌 MDA-MB-231 細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響及其作用機(jī)制。 方法 方法 以高轉(zhuǎn)移的人乳腺癌 MDA-MB-231 細(xì)胞為研究對(duì)象，通過細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT)觀察 FL118對(duì)腫瘤細(xì)胞活性及增殖情況的影響； 流式細(xì)胞儀測(cè)定腫瘤細(xì)胞周期分布；細(xì)胞

2、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)及 Transwell 侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè) FL118 干預(yù)后腫瘤細(xì)胞的平板克隆形成、轉(zhuǎn)移及侵襲能力變化；實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(qPCR)、免疫細(xì)胞化學(xué) （ICC） 和免疫印跡雜交 （Western Blot） 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FL118對(duì)乳腺癌細(xì)胞survivin和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 （EMT） 相關(guān)信號(hào)分子E-鈣黏蛋白 （E-Cadherin） 、 波形蛋白 （Vimentin）以及 Wnt 信號(hào)通路核內(nèi)關(guān)鍵蛋白 β -

3、連環(huán)蛋白（β -catenin）及細(xì)胞周期素 1（CyclinDl）的 mRNA 和蛋白水平的表達(dá)。 結(jié)果 結(jié)果 FL118 對(duì) MDA-MB-231 細(xì)胞有增殖抑制作用，呈現(xiàn)一定的量效及時(shí)效關(guān)系(P<0.05)，且效果優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組(P<0.05)；FL118 使 MDA-MB-231 細(xì)胞有絲分裂受阻于 S 期(P<0.05)；FL118 可降低 MDA-MB-231 細(xì)胞的平板克隆形成能力(P<0.05)

4、；劃痕實(shí)驗(yàn)及侵襲實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明 FL118 可以使 MDA-MB-231 細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和侵襲能力下降(P<0.05)；qPCR、 ICC 和 Western Blot 結(jié)果顯示， FL118 干預(yù)后， 乳腺癌 MDA-MB-231細(xì)胞 E-Cadherin 的 mRNA 及蛋白表達(dá)水平上升(P<0.05)，Vimentin、Survivin、β-catenin 及 CyclinDl 的 mRNA 及蛋白表達(dá)水平下降(P＜0.

5、05)。 結(jié)論 結(jié)論 FL118 能抑制乳腺癌 MDA-MB-231 細(xì)胞的增殖、克隆形成能力、轉(zhuǎn)移和侵襲能力，并能提高 E-Cadherin 表達(dá)，降低 Vimentin 和 Survivin 表達(dá),降低核內(nèi)β-catenin 及 CyclinDl 的表達(dá)，初步證明 FL118 抑制 EMT 的機(jī)制與 Wnt 通路有關(guān)。 碩士研究生 碩士研究生 劉冉冉（藥理學(xué)） 劉冉冉（藥理學(xué)） 指導(dǎo)教師 指導(dǎo)教師 金景玉 金景玉 副教授 副教

6、授 姜國(guó)輝 姜國(guó)輝 教授 教授 關(guān)鍵詞： 關(guān)鍵詞： FL118 FL118、乳腺癌、侵襲轉(zhuǎn)移、 、乳腺癌、侵襲轉(zhuǎn)移、EMT EMT、Wnt Wnt 英文縮寫詞表 英文縮寫詞表 縮寫 英文全稱 中文全稱 EMT epithelial-Mesenchymal-transitions 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 ICC immunocytochemistry 免疫細(xì)胞化學(xué) qPCR Real-time fluorescent quantit

7、ative PCR 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR PVDF polyvinylidenedifluoride 聚二氟乙烯膜 WB Western Blot 免疫印跡雜交 ER estrogen receptor 雌激素受體 IGFR-1 insulin-like growth factors-1 胰島素樣生長(zhǎng)因子受體 VEGF vascular endothelial growth factor 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 EGF

8、R Epidermal Growth Factor Receptor 表皮生長(zhǎng)因子受體 HER-2 human epidermalgrowth factor receptor-2 表皮生長(zhǎng)因子受體 2 FGFR Fibroblast Growth Factor Receptor 成纖維生長(zhǎng)因子受體 MAPK mitogen-activated protein kinase 絲裂原活化蛋白激酶 PI3K 磷脂酰肌醇 3 激

9、酶 IRS-1 insulin receptor substrate-1 胰島素受體底物 1 MMPs matrix Metalloproteinases 基質(zhì)金屬蛋白酶 PKB Proteinkinase B 蛋白激酶 B mTOR Mammalian target of rapamycin 哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白 ERK Extracellular regulated protein kinases 細(xì)胞外調(diào)

10、蛋白激酶 TNF-α tumor necrosis factor-α 腫瘤壞死因子-α IFN Interferon 干擾素 CSF colony stimulating factor 集落刺激因子 IL Interleukin 白細(xì)胞介素 BRCA1 Breast cancer susceptibility gene 1 人乳腺癌易感基因 1 ERE Estrogen response elements