HDAC經(jīng)MAPK通路調(diào)節(jié)關(guān)節(jié)軟骨細胞IL-1β誘導(dǎo)的ADAMTS-5表達.pdf

1、目的：
　　研究IL-1β引起的關(guān)節(jié)軟骨細胞ADAMTS-5上調(diào)的現(xiàn)象和作用機制，以及在此病理過程中HDAC對其調(diào)控機制。
　　方法：
　　使用濃度梯度的IL-1β刺激大鼠軟骨細胞24h，用PCR檢測ADAMTS-5的表達，CCK8檢測細胞增殖毒性的影響。再用10ng/mL的IL-1β刺激大鼠軟骨細胞，用WB和PCR檢測時間依賴的ADAMTS-5和MAPK相關(guān)信號分子的表達規(guī)律，并以相應(yīng)的信號通路激動劑和抑制劑加以驗證

2、。IL-1β處理軟骨細胞后，以PCR檢測軟骨細胞的HDAC各亞型變化，并使用TSA和PCI-34051兩種HDAC抑制劑研究它們對經(jīng)IL-1β刺激的軟骨細胞的影響。在這它們預(yù)處理軟骨細胞后再使用IL-1β刺激細胞，以研究上述影響的作用機制。另外再用對應(yīng)的siRNA驗證上述抑制劑的效應(yīng)及機制。
　　結(jié)果：
　　與對照組相比，IL-1β刺激可引起軟骨細胞ADAMTS-5表達增高，在此過程中可以觀察到ADAMTS-5的上升具有時間

3、依賴性，同時伴有ERK及JNK分子的磷酸化。相應(yīng)的ERK和JNK的激動劑或者抑制劑可以模擬或者阻斷IL-1β刺激結(jié)果。IL-1β刺激后，HDAC4和HDAC8表達增加。TSA和PCI-34051則可以阻斷IL-1β的刺激結(jié)果，經(jīng)它們預(yù)處理后的細胞再經(jīng)IL-1β刺激時ERK和JNK磷酸化較未處理組有不同程度的減弱。對應(yīng)的 siRNA處理結(jié)果與上述抑制劑預(yù)處理結(jié)果類似。
　　結(jié)論：
　　IL-1β可上調(diào)HDAC4和HDAC8，進