常染色體顯性遺傳玻璃體視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜病變一家系的致病基因篩查及臨床分析.pdf

1、目的:常染色體顯性遺傳玻璃體視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜病變(Autosomal dominant vitreoretino choroidopathy ADVIRC)是一類(lèi)進(jìn)行性的、不可逆的視力損害眼病，嚴(yán)重的威脅到人類(lèi)的視覺(jué)質(zhì)量，該病具有復(fù)雜的臨床表現(xiàn)及高度的遺傳異質(zhì)性，至今發(fā)病機(jī)制尚未明確。臨床上是以環(huán)形的周邊視網(wǎng)膜色素沉著和和外圍視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜萎縮為主要典型特征的疾病，常伴有小角膜、小眼球、先天性白內(nèi)障、黃斑病變。針對(duì)這類(lèi)遺傳性眼科疾病，研究其治

2、病基因和突變譜，不但可以在優(yōu)生優(yōu)育上進(jìn)行預(yù)測(cè)和指導(dǎo)，提高早期預(yù)防及早期診斷率，還可以從分子水平了解其發(fā)病機(jī)制，對(duì)病變組織、細(xì)胞和基因進(jìn)行靶向基因或者細(xì)胞治療。伴隨分子生物學(xué)技術(shù)的高速發(fā)展，基因診斷技術(shù)不斷提高，目前所使用的高通量第二代測(cè)序技術(shù)(Nest generation sequencing，NGS)，已經(jīng)使得篩查致病基因的檢測(cè)更為簡(jiǎn)便、高效和準(zhǔn)確，有助于基因診斷，應(yīng)用于臨床。本研究通過(guò)基因第二代測(cè)序技術(shù)結(jié)合眼科芯片這一新方法，對(duì)常

3、染色體顯性遺傳玻璃體視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜病變家系致病基因和致病突變的檢測(cè)和驗(yàn)證，并詳細(xì)的分析該家系的臨床表型特征、及其與突變基因型的關(guān)聯(lián)。
　　方法:收集常染色體顯性遺傳玻璃體視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜病變家系的患者詳細(xì)病史和繪制家系圖，并對(duì)所有家系進(jìn)行眼科檢查，明確診斷。簽訂知情同意書(shū)，抽取家系成員外周靜脈血進(jìn)行保存或者制備基因組DNA，應(yīng)用基于目標(biāo)區(qū)域外顯子捕獲測(cè)序(TES)技術(shù)，并使用眼科芯片對(duì)家系患者進(jìn)行基因突變檢測(cè)，對(duì)變異位點(diǎn)進(jìn)行雙脫氧核苷酸

4、末端終止法(Sanger sequencing)驗(yàn)證，通過(guò)生物信息學(xué)技術(shù)對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行分析，確定致病基因，根據(jù)致病基因的臨床表型對(duì)該家系進(jìn)行臨床分析。
　　結(jié)果:該ADVIRC家系患者臨床表現(xiàn)有:先天性小角膜、先天性白內(nèi)障、周邊視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜發(fā)育萎縮、角膜內(nèi)皮發(fā)育不良，晚期發(fā)展成閉角型青光眼;完成該家系的分子遺傳研究，檢測(cè)發(fā)現(xiàn)第六外顯子的雜合突變BEST-1，c.704TR→C，此例家系突變位點(diǎn)未在中國(guó)地區(qū)報(bào)道。
　　結(jié)論:該