人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞提取的微囊對大鼠腎缺血再灌注損傷腎組織中HIF-1α表達(dá)的影響.pdf

1、背景及目的：
　　腎缺血再灌注損傷(Renal ischemia reperfusion injury,RIRI)是急性腎動(dòng)脈阻斷和腎臟移植等臨床治療過程中比較常見的病理生理過程，為腎移植、休克腎、腎部分切除、腎盂積水等疾病的常見并發(fā)癥。缺氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxiainduciblefactor，HIF-1)是一種缺氧條件下于人和哺乳動(dòng)物體內(nèi)廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子，可以激活許多缺氧反應(yīng)性基因的表達(dá)，從而維持細(xì)胞在缺血缺氧狀態(tài)下的生

2、存。作為HIF-1活性的主要控制亞基，HIF-1α在缺血再灌注組織中的表達(dá)頗受關(guān)注。間充質(zhì)干細(xì)胞能夠通過旁分泌或內(nèi)分泌的方式來減輕急慢性腎損害，而目前微囊被人們認(rèn)為是細(xì)胞間彼此交流的重要媒介，能發(fā)揮和干細(xì)胞類似的腎保護(hù)功能。我們實(shí)驗(yàn)小組前期的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs）提取的微囊(microvesicles,MVs)對急性腎損傷有保護(hù)作用

3、，然而其具體機(jī)制尚不完全清楚。因此本實(shí)驗(yàn)希望通過觀察人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞提取的微囊對大鼠腎缺血再灌注損傷后腎組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）表達(dá)的影響，初步探討HIF-1α在人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞提取的微囊發(fā)揮腎保護(hù)作用中可能的機(jī)制。
　　方法：
　　健康成年SD雄性大鼠30只，隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham組）、缺血再灌注組（ischemia-reperfusion ijury group以下稱IRI組）和微囊治療組（MVs

4、 treatment group，以下稱MVs組），每組10只。采用右腎切除左腎缺血的方法制備腎臟缺血再灌注損傷模型，術(shù)中三組大鼠均切除右腎，IRI組及MVs組術(shù)中予動(dòng)脈夾夾閉左腎動(dòng)脈45min后松開，假手術(shù)組模擬手術(shù)操作過程但不夾閉左腎動(dòng)脈。MVs組手術(shù)同時(shí)經(jīng)尾靜脈給予含100ug蛋白量的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（HMSCs）提取的MVs；,缺血再灌注組及Sham組術(shù)中經(jīng)尾靜脈注射等容量生理鹽水；24h后急性處死大鼠立即通過下腔靜脈采血，檢

5、測血Scr、BUN含量并同時(shí)切除左腎，取二分之一左腎置入4％多聚甲醛液中固定，以便進(jìn)行切片PAS染色；二分之一左腎保存于-80℃冰箱中，以便采用weston-blot法進(jìn)行檢測各組腎組織HIF-1α表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　與Sham組相比，IRI組腎臟病理損傷較重，表現(xiàn)為不同程度腎小球、腎間質(zhì)充血，腎小管上皮細(xì)胞水腫、細(xì)胞內(nèi)玻璃樣變及脂肪變性，腎小管腔內(nèi)蛋白管型明顯，HIF-1α表達(dá)及血Scr、BUN水平表達(dá)明顯升高，差

6、異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而MVs組與Sham組相比較腎臟病理損傷略加重，血Scr、BUN水平表達(dá)略有升高，HIF-1α表達(dá)略有下降，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與IRI組比較，MVs組腎臟病理損傷明顯減輕，表現(xiàn)為個(gè)別標(biāo)本存在蛋白管型，輕度水腫，血Scr、BUN水平顯著降低，HIF-1α表達(dá)明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.缺血再灌注損傷后腎組織HIF-1α的表達(dá)明顯升高<