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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
對(duì)比Lewis肺癌細(xì)胞(LLC)及LLC原位接種后獲得的第一代衍生細(xì)胞和原位接種后獲得的第二代衍生細(xì)胞間的生物學(xué)特性,比較衍生細(xì)胞系與LLC細(xì)胞分別在原位種植模型中的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
方法:
1.建立C57 BL/6小鼠Lewis肺癌原位種植模型。
2.Lewis肺癌衍生細(xì)胞系的建立。
3.離體實(shí)驗(yàn):1)熒光顯微鏡及電鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。2)cck8法測(cè)細(xì)胞增殖能力。3)細(xì)胞克隆形成
2、實(shí)驗(yàn)。4)Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)。
4.活體實(shí)驗(yàn):1)原位種植模型與皮下種植模型的比較。2)細(xì)胞接種數(shù)量對(duì)成瘤與轉(zhuǎn)移的影響。3)第一及第二代衍生細(xì)胞系與親代細(xì)胞間成瘤與轉(zhuǎn)移的對(duì)比。
5.藥物抑制實(shí)驗(yàn):小鼠成瘤的藥物抑制實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果:
1.第一代及第二代衍生細(xì)胞系與LLC細(xì)胞細(xì)胞均呈梭形生長(zhǎng),熒光顯微鏡下均能穩(wěn)定表達(dá)GFP,電鏡下細(xì)胞均表達(dá)出不同程度的肺腺癌細(xì)胞的特征。
2.細(xì)胞系之間
3、的增殖能力無(wú)明顯差異(p>0.05)
3.侵襲能力第二代衍生細(xì)胞系>第一代衍生細(xì)胞系>LLC( p<0.05)。
4.活體實(shí)驗(yàn)顯示:1)接種相同數(shù)目細(xì)胞的原位組較皮下組有更高的成瘤率和轉(zhuǎn)移性。2)隨著原位種植細(xì)胞數(shù)目的增加,小鼠成瘤率明顯增高。3)通過(guò)體內(nèi)多次傳代的衍生細(xì)胞株在原位種植模型中的成瘤率和轉(zhuǎn)移性較強(qiáng),依次為: LLC-R2-Lung>LLC-R1-Lung>LLC-P。
5.順鉑與紫杉醇合并組的
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