Hippo-TAZ信號通路在骨肉瘤耐藥過程中的機(jī)制研究.pdf

1、目的:骨肉瘤(osteosarcoma)是最常見的骨的原發(fā)惡性腫瘤，新輔助化療加手術(shù)切除是目前治療骨肉瘤的通用方法。但有一定比例的患者存在先天或繼發(fā)的對化療藥物的耐藥，其生存率明顯低于非化療耐藥的患者。Hioop信號通路是由一系列蛋白激酶和轉(zhuǎn)錄共激活因子所組成，負(fù)責(zé)調(diào)控細(xì)胞的增殖、分化和凋亡等功能。現(xiàn)在的研究發(fā)現(xiàn)Hioop信號通路的失調(diào)不僅與多種腫瘤的發(fā)生相關(guān)，并且在腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生對化療的耐藥性方面也扮演了重要角色。我們此次主要研究骨肉瘤

2、細(xì)胞株MG63細(xì)胞中Hippo/TAZ信號通路在接受化療藥物處理后的變化情況，希望能夠發(fā)現(xiàn)Hippo/TAZ信號通路在骨肉瘤細(xì)胞耐藥性方面的作用及功能。
　　方法:我們建立了穩(wěn)定敲低TAZ的骨肉瘤細(xì)胞株MG63，用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測細(xì)胞增殖情況，并用流式細(xì)胞儀檢測了其凋亡情況。我們用蛋白免疫印跡技術(shù)檢測骨肉瘤細(xì)胞株MG63在接受化療藥物甲氨蝶呤和阿霉素處理后，細(xì)胞內(nèi)TAZ蛋白水平的變化。用RT-PCR技術(shù)檢測骨肉瘤細(xì)胞株MG63在接受

3、化療藥物甲氨蝶呤和阿霉素處理后，細(xì)胞內(nèi)TAZ及下游基因CTGF、Cyr61的mRNA水平的變化。
　　結(jié)果:敲低TAZ能夠抑制骨肉瘤細(xì)胞增殖并增加其對化療藥物的敏感性，化療藥物處理可以降低骨肉瘤細(xì)胞內(nèi)TAZ的蛋白量，阿霉素通過轉(zhuǎn)錄水平降低骨肉瘤細(xì)胞內(nèi)TAZ的蛋白量，甲氨喋呤促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞內(nèi)TAZ的出核和降解?；熕幬锾幚斫档凸侨饬黾?xì)胞中TAZ蛋白下游靶基因CTGF和Cyr61的表達(dá)。
　　結(jié)論:我們此次研究首次發(fā)現(xiàn)TAZ的低