IRF4在TAC治療肝移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)中的作用機制研究.pdf

1、背景:肝臟移植是治療終末期肝病的有效手段，但術(shù)后的急性排斥反應(yīng)仍然是肝移植失敗的主要原因之一，同時也是影響病人術(shù)后生存的主要危險因素。他克莫司(TAC)是一種廣泛應(yīng)用于實驗和臨床的免疫抑制劑，在T細(xì)胞中其能夠通過NFAT抑制IL-2的表達(dá)而發(fā)揮免疫抑制作用。IRF4是造血來源細(xì)胞中的一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，其在多種免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。
　　目的:本研究旨在探討IRF4在TAC治療肝移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)中的作用及其機制，以及進(jìn)一步闡

2、明TAC在肝移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)中的免疫藥理作用機制。
　　方法:DA(RT1n)雄性大鼠作為肝移植急性排斥模型的供體大鼠，Lewis(LEW)(RT11)雄性大鼠作為肝移植急性排斥模型的受體大鼠，采用二袖套法，建立肝移植術(shù)后急性排斥模型。生存率分析統(tǒng)計TAC治療組和非治療組大鼠肝移植術(shù)后的存活時間，組織病理分析及Banff評分評價TAC治療組和非治療組的炎性損傷。檢測ALT,AST以及TBIL評價TAC治療組和非治療組的肝功能狀

3、態(tài)。免疫組化，定量PCR，Western blotting檢測TAC治療組和非治療組中IRF4的表達(dá)水平。流式分選TAC治療組和非治療組中脾臟中的Th17和Treg細(xì)胞，分別定量檢測RORγt和Foxp3在兩種細(xì)胞中的表達(dá)水平。ELISA檢測檢測CD4+T細(xì)胞亞群相關(guān)細(xì)胞因子(TGF-β1，IL-10，IL-6，TNF-α，IL-17，IFN-γ)的表達(dá)水平。體外TAC作用脾來源的單核細(xì)胞后，Western blotting檢測TAC-

4、NFAT信號通路中相關(guān)蛋白（IRF4，mTOR，NFAT）以及RORγt和Foxp3的蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:TAC能夠顯著延長大鼠肝移植術(shù)后的生存時間，提高大鼠的生存率，也能夠顯著抑制肝移植術(shù)后的急性排斥反應(yīng)，減輕肝組織的炎性病理損傷，改善肝移植術(shù)后的肝功能狀態(tài)。大鼠肝移植術(shù)后IRF4表達(dá)顯著上調(diào)，TAC能夠顯著抑制IRF4的表達(dá)上調(diào)。體外實驗表明，TAC能夠顯著降低脾臟單核細(xì)胞中TAC-NFAT信號通路相關(guān)蛋白(IRF4，m