大黃素抗大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)作用時(shí)機(jī)及其作用機(jī)制.pdf

1、器官移植術(shù)后的排斥反應(yīng)，特別是急性排斥反應(yīng)是困擾移植學(xué)的主要難題，但臨床上應(yīng)用的抗排斥藥物大多具有明顯毒副作用。近年來，人們對(duì)中醫(yī)藥抗移植排斥反應(yīng)的進(jìn)行了深入的研究，以期獲得具有一定療效且毒副作用較輕的新型抗排斥藥物。雷公藤是最具代表性的成果之一，臨床應(yīng)用中，雷公藤抗排斥作用的療效較好，副作用小，可用于抗移植排斥的輔助治療。 體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，中藥大黃及其有效單體大黃素對(duì)各種原因所致炎性介質(zhì)的釋放具有明顯的抑制作用，但大黃素是否也能

2、阻斷移植免疫應(yīng)答過程中類似的細(xì)胞因子的釋放，從而起到抑制排斥反應(yīng)的作用，目前國(guó)內(nèi)外尚無涉足該問題的研究報(bào)道。本課題組以往的研究已經(jīng)證實(shí)，在一定的劑量作用下，大黃素能有效的延長(zhǎng)肝移植大鼠的存活時(shí)間。本課題繼續(xù)上述研究，通過對(duì)移植肝的組織病理學(xué)、移植術(shù)后大鼠外周血細(xì)胞因子水平和T細(xì)胞分化情況的觀察，來確定大黃素抗大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)的作用時(shí)機(jī)及其機(jī)理。 目的： 以近交系大鼠OLT模型為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以模型大鼠的存活期、移植肝急

3、性排斥反應(yīng)指數(shù)(RAI)、外周血細(xì)胞因子水平及T細(xì)胞分化為觀察指標(biāo)，研究大黃素抗大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)的作用時(shí)機(jī)及其機(jī)理。 方法： 在實(shí)驗(yàn)第一部分，先以SD→SD大鼠OLT模型為對(duì)象，學(xué)習(xí)建立大鼠OLT模型。 第二部分，以SPF級(jí)Wistar→SD大鼠OLT模型為對(duì)象，建立大鼠原位肝移植模型。按照給予大黃素的時(shí)間不同，將模型隨機(jī)分為4組，每組12只。A組作為空白對(duì)照，B、C、D三組分別于術(shù)前8d至手術(shù)當(dāng)天、術(shù)前4

4、d至術(shù)后4d、術(shù)后第1～8d以腹腔注射給予大黃素50.0mg·kg-1·d-1。觀察各組大鼠存活時(shí)間和移植肝組織病理變化，并確定排斥活動(dòng)指數(shù)(RAI)。 第三部分，以SPF級(jí)近交系Lewis(LEW)和Brown Norway(BN)大鼠分別作為供受體，建立LEW→BN大鼠OLT動(dòng)物模型，以存活期大于48小時(shí)的模型動(dòng)物為研究對(duì)象。模型動(dòng)物隨機(jī)分為A組(同基因?qū)φ战M)、B組(急性排斥組)、C組(大黃素組)，每組16只大鼠，術(shù)后每天

5、分別腹腔注射給藥，其中A組不作特殊處理；B組：生理鹽水0.5ml，每天；C組：大黃素50.0 mg·kg-1·d-1，連續(xù)用藥7天后停藥。每組隨機(jī)取6只大鼠，于給藥后第1d、3d、5d、7d尾靜脈取血清0.2ml，第7d處死，門靜脈取新鮮血送流式細(xì)胞檢測(cè)，另取移植肝新鮮組織標(biāo)本備檢，其余10只留作觀察生存。 結(jié)果： 0～8d組術(shù)后受者存活時(shí)間為(25.3±3.2)d，比其他三組明顯延長(zhǎng)(P<0.05)；0～8d組移植肝的

6、排斥活動(dòng)指數(shù)為6.16±0.55，比其他三組明顯減輕(P<0.05)。大黃素明顯延長(zhǎng)術(shù)后生存期，減輕肝臟病理組織學(xué)改變，降低外周血IL-2、IFN-γ的含量，上調(diào)IL-4水平，使Th1/Th2細(xì)胞平衡向Th2移動(dòng)。大黃素組大鼠外周血CD4+細(xì)胞比例較排斥組下降，CD4+/CD8+下降。 結(jié)論： 于肝移植術(shù)后第1～8d給予大黃素對(duì)大鼠移植肝的排斥反應(yīng)有明顯抑制作用，能顯著延長(zhǎng)移植大鼠的存活時(shí)間。大黃素能夠有效抑制肝移植大鼠