探討ITGB1在GPER介導(dǎo)的乳腺癌他莫昔芬耐受中的作用及機制研究.pdf

1、目的：研究GPER介導(dǎo)的ITGB1的表達(dá)在乳腺癌他莫昔芬（tamoxifen）耐受中發(fā)揮的作用，并探討其分子機制。
　　方法：運用免疫組化方法分析經(jīng)他莫昔芬治療復(fù)發(fā)前后的乳腺癌組織中ITGB1的表達(dá)，并比較EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)差異。采用Western blot檢測人乳腺癌MCF-7細(xì)胞及其他莫昔芬耐受細(xì)胞株（MCF-7R）中ITGB1的表達(dá)。前期cDNA芯片發(fā)現(xiàn)ITGB1是GPER的下游基因，應(yīng)用GPER特異性的激動劑G1及其特異

2、性阻斷劑G15驗證芯片結(jié)果。通過使用小分子阻斷劑研究GPER調(diào)控ITGB1的機制。構(gòu)建ITGB1基因干擾慢病毒，并建立穩(wěn)定干擾ITGB1表達(dá)的MCF-7R細(xì)胞。MTT及Transwell實驗分別檢測ITGB1對乳腺癌細(xì)胞增殖與遷移能力的影響。
　　結(jié)果：復(fù)發(fā)乳腺癌組織中ITGB1及間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物（Fibronectin及Vimentin）的表達(dá)水平明顯高于復(fù)發(fā)前組織（p<0.05），且ITGB1的表達(dá)與GPER有正相關(guān)性（p=0.

3、001）。MCF-7R細(xì)胞中ITGB1的表達(dá)明顯高于MCF-7細(xì)胞（p<0.05），且MCF-7R細(xì)胞中ITGB1的表達(dá)受GPER/EGFR/ERK信號通路調(diào)控。MCF-7R細(xì)胞干擾ITGB1表達(dá)后不僅恢復(fù)其對他莫昔芬的敏感性，而且抑制了CAF對其遷移能力及EMT的促進(jìn)作用。ITGB1下游的FAK、Src及AKT在MCF-7R細(xì)胞中活化程度較MCF-7細(xì)胞高（p<0.05），且介導(dǎo)MCF-7R細(xì)胞與CAF細(xì)胞間的相互作用。
　　結(jié)